CCT是真核生物胞漿中唯一的伴侶素，屬Ⅱ型伴侶素，是一種廣泛存在于細(xì)胞漿中的異型寡聚蛋白，在肌動蛋白、微管蛋白的組裝和折疊中發(fā)揮著重要的作用。CCT6A是CCT的ζ亞基。在開產(chǎn)后的雞卵巢中CCT6A的mRNA表達(dá)量顯著升高，孕激素處理雞卵泡顆粒細(xì)胞，可顯著上調(diào)CCT6A基因的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)CCT6A啟動子區(qū)存在孕酮受體結(jié)合元件（PREs），表明CCT6A基因參與孕酮調(diào)控通路。以上研究揭示了CCT6A基因在卵泡發(fā)育中的重要作用。但其在雞卵泡發(fā)育中的功能及表達(dá)調(diào)控的相關(guān)研究還很少。本研究通過qRT-PCR分析得到CCT6A基因在雞卵泡膜細(xì)胞中的mRNA表達(dá)量顯著高于顆粒細(xì)胞，并在F4卵泡膜細(xì)胞中表達(dá)量最高。通過構(gòu)建雞卵泡膜細(xì)胞的體外模型，并利用pGPU6/GFP/Neo真核表達(dá)載體為骨架，構(gòu)建靶向CCT6A mRNA序列的shRNA表達(dá)載體：pGPU6/GFP/Neo-shRNA-213/699/1272/1404和pGPU6/GFP/Neo-shRNA-NC。將shRNA表達(dá)載體轉(zhuǎn)染進(jìn)雞卵泡膜細(xì)胞中，48h后檢測，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染pGPU6/GFP/Neo-shRNA-1272后，CCT6A基因在... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RNA干擾基因沉默的細(xì)胞通路（楊倫，2012）

分析A 功能的研究方面泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞中 CCT6A 的表達(dá)趨勢 在雞卵泡膜細(xì)胞中的 mRNA 表達(dá)顯著高于顆粒細(xì)胞（P=0.0101），如 至 F4 雞卵泡膜細(xì)胞中 CCT6A 的表達(dá)逐漸上升，在 F4 卵泡膜細(xì)胞中.1659），從 F4 至 F1 卵泡，膜細(xì)胞中 CCT6A 的表達(dá)量維持高水平，直而分析卵泡體積的增長趨勢，發(fā)現(xiàn)由 F5 發(fā)育至 F4 卵泡時，卵泡直 4）。因此，推測 CCT6A 的表達(dá)與卵泡體積的增長有密切的關(guān)系。

圖 3 各級卵泡膜細(xì)胞中 CCT6A 的 mRNA 表達(dá)情況Figure 3 The expression of CCT6A mRNA in theca cells of all levels of chicken follicles圖 4 雞卵泡增長趨勢Figure 4 The development trend of follicles of chicken

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]伴侶素CCT6A在結(jié)腸直腸癌中的表達(dá)及其意義[J]. 王廷峰,馮波,馬君俊,王磊,鄭民華,陸愛國.  外科理論與實(shí)踐. 2009(03)
[2]孕激素對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Ishikawa影響的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J]. 張瑜,張怡,林秋華.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2006(08)

博士論文
[1]雞繁殖性狀相關(guān)基因及卵巢組織差異表達(dá)基因研究[D]. 張寧波.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3548617