本研究是以體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞為試驗(yàn)對(duì)象,探究甘氨酸（Gly）對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖、凋亡以及免疫應(yīng)答的影響。試驗(yàn)分別測定了Gly培養(yǎng)乳腺上皮細(xì)胞后,細(xì)胞的增殖活性、細(xì)胞周期變化、細(xì)胞凋亡率以及四種免疫因子（IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α）的基因表達(dá)量,旨在闡明Gly是否參與奶牛乳腺上皮細(xì)胞的生長和免疫調(diào)節(jié)過程以及對(duì)乳腺上皮細(xì)胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生的影響。本論文的研究內(nèi)容和結(jié)果如下：1、膠原酶消化法分離出奶牛乳腺上皮細(xì)胞,培養(yǎng)基中添加0、1、2、5、10和20mmol/L的Gly后在體外條件下培養(yǎng)細(xì)胞24、48和72h,用MTT法檢測細(xì)胞增殖活性。結(jié)果表明,Gly對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖活性有低濃度（1mmol/L）促進(jìn),高濃度（10-20mmol/L）顯著抑制的作用（P<0.05）。2、使用流式細(xì)胞儀技術(shù),應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測不同濃度Gly（0、1、2、5、10和20mmol/L）培養(yǎng)后的奶牛乳腺上皮細(xì)胞周期,結(jié)果發(fā)現(xiàn),Gly能夠顯著促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞周期向S期和G2/M期轉(zhuǎn)化（P<0.05）,并促進(jìn)細(xì)胞分裂。3、使用流式細(xì)胞儀技術(shù)... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
1 引言
    1.1 國內(nèi)外研究進(jìn)展
        1.1.1 甘氨酸營養(yǎng)概述
        1.1.2 甘氨酸的代謝途徑
        1.1.3 甘氨酸的免疫調(diào)節(jié)作用
        1.1.4 甘氨酸的細(xì)胞保護(hù)作用
        1.1.5 甘氨酸保護(hù)作用的機(jī)制
    1.2 奶牛乳腺上皮細(xì)胞的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)
        1.2.2 影響乳腺上皮細(xì)胞生長和分化的因素
        1.2.3 氨基酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖及免疫應(yīng)答的調(diào)控
    1.3 本研究的目的和意義
    1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.4.1 研究內(nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
2 試驗(yàn)部分
    2.1 甘氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖活性的影響
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
        2.1.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1.4 討論
        2.1.5 小結(jié)
    2.2 甘氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞周期的影響
        2.2.1 試驗(yàn)材料
        2.2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.2.4 討論
        2.2.5 小結(jié)
    2.3 甘氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞凋亡的影響
        2.3.1 試驗(yàn)材料
        2.3.2 試驗(yàn)方法
        2.3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.4 討論
        2.3.5 小結(jié)
    2.4 甘氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞免疫因子基因表達(dá)的影響
        2.4.1 試驗(yàn)材料
        2.4.2 試驗(yàn)方法
        2.4.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.4.4 討論
        2.4.5 小結(jié)
3 論文總體討論與結(jié)論
    3.1 總體討論
    3.2 結(jié)論
4 創(chuàng)新點(diǎn)
5 有待于進(jìn)一步解決的問題
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]亮氨酸對(duì)κ-酪蛋白合成的影響及相關(guān)信號(hào)通路的研究[J]. 龐學(xué)燕,季昀,田青,王洪榮.  中國畜牧雜志. 2013(09)
[2]牛奶中乳腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定[J]. 崔新潔,王婷,劉秉春,陶林,王瀟.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(03)
[3]甘氨酸對(duì)非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織TLR4及TREM-1、2表達(dá)的影響[J]. 王小娟,秦濤,劉近春,馬靜.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(04)
[4]胰島素、催乳素和氫化可的松對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 田青,王洪榮.  中國飼料. 2013(02)
[5]Effects of glycine on phagocytosis and secretion by Kupffer cells in vitro[J]. Hui-Wen Wu,Ke-Ming Yun,De-Wu Han,Rui-Ling Xu,YuanChang Zhao,Institute of Hepatology,Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,Shanxi Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(20)
[6]不同泌乳相關(guān)激素和生長因子對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響[J]. 劉暢,趙鋒,李慶章.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[7]精氨酸水平對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外生長及κ-酪蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 徐柏林,王夢(mèng)芝,張興夫,哈斯,王春艷,敖長金,王洪榮.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2012(05)
[8]苜蓿青貯對(duì)低質(zhì)粗飼料條件下奶牛產(chǎn)奶性能的影響[J]. 馬玉霞,廉紅霞,高騰云,王相根.  中國奶牛. 2010(09)
[9]甘氨酸對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠瘦素水平的影響[J]. 劉靖,陸大祥,戚仁斌,王彥平.  山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(05)
[10]MTT比色法檢測賴氨酸、蛋氨酸對(duì)體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響[J]. 李喜艷,王加啟,魏宏陽,卜登攀,胡菡,周凌云.  生物技術(shù)通報(bào). 2010(03)

博士論文
[1]不同日糧模式對(duì)泌乳奶牛乳腺乳蛋白合成影響的研究[D]. 張興夫.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]蛋氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞亞細(xì)胞器蛋白質(zhì)組學(xué)影響[D]. 王佳麗.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]甘氨酸的細(xì)胞保護(hù)作用及機(jī)制研究[D]. 秦霞.南京醫(yī)科大學(xué) 2009
[3]奶牛乳腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及應(yīng)用[D]. 王治國.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
[4]甘氨酸受體細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制研究[D]. 蔣玲琳.南京醫(yī)科大學(xué) 2007
[5]甘氨酸保護(hù)心肌細(xì)胞防止內(nèi)毒素性損傷的作用和機(jī)制研究[D]. 胡晶晶.暨南大學(xué) 2007
[6]半胱胺鹽酸鹽和兩種必需氨基酸對(duì)山羊細(xì)胞免疫功能的影響[D]. 解紅梅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3542646