本研究以泰深王鴿為研究對象,研究了 DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2和FABP3五個基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的遺傳相關(guān),利用熒光定量PCR技術(shù)研究了基因在鴿組織中的表達特點,采取組織學(xué)切片技術(shù)研究了鴿肌纖維發(fā)育特征。在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用慢病毒介導(dǎo)的RANi技術(shù)研究了干擾FABP1、FABP2和FABP3基因?qū)澟咛コ衫w維細胞增殖和凋亡的影響。主要研究結(jié)果如下:1、利用直接測序法對200只4周齡鴿的DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2和FABP3五個基因進行了多態(tài)性檢測和分型,并與屠體及肉質(zhì)性狀進行了關(guān)聯(lián)分析。(1)在DGAT2基因上共檢測到了 5個SNP位點,其中有2個位點與鴿屠體及肉質(zhì)性狀有顯著相關(guān)。在G18398T位點上,AA和AB基因型的腹脂重和腹脂率極顯著高于BB基因型(P<0.01),而BB基因型的肌苷酸和肌內(nèi)脂肪含量極顯著高于AA和AB基因型(P<0.01);在G22484C位點上,AA基因型的宰前活重、屠體重、半凈膛重、全凈膛重和胸肌重極顯著高于AB和BB基因型(P<0.01),BB基因型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于AA和AB基因型(P&...

【文章來源】： 浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 SNP的研究進展
        1.1 SNP的分類及作用
        1.2 SNP的特性
        1.3 SNP的檢測技術(shù)
        1.4 SNP的研究意義
    2 性狀相關(guān)基因的研究進展
        2.1 DGAT2基因的研究進展
        2.2 ADSL基因的研究進展
        2.3 FABP1、FABP2、FABP3基因的研究進展
    3 肉品質(zhì)和肌肉組織學(xué)特性的研究進展
        3.1 肉品質(zhì)的評價指標
        3.2 肉品質(zhì)的影響因素
        3.3 肌肉組織學(xué)特性及其與肉品質(zhì)的關(guān)系
        3.4 肌纖維發(fā)育特征及影響因素
    4 RNA干擾的研究進展
        4.1 RNA干擾的發(fā)現(xiàn)
        4.2 RNA干擾的作用機制
        4.3 RNA干擾的特點
        4.4 RNA干擾的應(yīng)用
    5 本研究目的和意義
第二章 鴿DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 溶液試劑配制
        1.5 實驗器材處理與滅菌
    2 實驗方法
        2.1 屠體性狀測定
        2.2 肉質(zhì)性狀測定
        2.3 基因組DNA的提取及檢測
        2.4 引物設(shè)計、溶解及稀釋
        2.5 PCR反應(yīng)體系及程序
        2.6 PCR產(chǎn)物直接測序、SNP分型及氨基酸序列分析
        2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 基因組DNA的提取結(jié)果
        3.2 PCR擴增結(jié)果
        3.3 基因多態(tài)性及氨基酸序列分析結(jié)果
        3.4 基因頻率、基因型頻率及群體遺傳特性
        3.5 基因多態(tài)性與屠體性狀及肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
    4 討論
        4.1 DGAT2基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
        4.2 ADSL基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
        4.3 FABP1基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
        4.4 FABP2基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
        4.5 FABP3基因多態(tài)性及其與屠體和肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析
第三章 鴿DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因時空表達及肌纖維發(fā)育特征的研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 溶液試劑配制
        1.5 實驗器材處理與滅菌
    2 實驗方法
        2.1 基因時空表達譜的建立
        2.2 鴿肌纖維切片制作和圖像分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 DGAT2基因時空表達譜
        3.2 ADSL基因時空表達譜
        3.3 FABP1基因時空表達譜
        3.4 FABP2基因時空表達譜
        3.5 FABP3基因時空表達譜
        3.6 鴿肌纖維發(fā)育特征
    4 討論
        4.1 關(guān)于相對定量法條件優(yōu)化
        4.2 DGAT2基因的表達
        4.3 ADSL基因的表達
        4.4 FABP1基因的表達
        4.5 FABP2基因的表達
        4.6 FABP3基因的表達
        4.7 肌纖維發(fā)育特征
第四章 慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾FABP1、FABP2和FABP3基因?qū)澟咛コ衫w維細胞增殖與凋亡的初步研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 溶液試劑配制
        1.5 實驗器材處理與滅菌
    2 實驗方法
        2.1 鴿胚胎成纖維細胞的培養(yǎng)、傳代與凍存
        2.2 siRNA的設(shè)計、轉(zhuǎn)染及篩選
        2.3 慢病毒載體構(gòu)建及包裝
        2.4 重組慢病毒轉(zhuǎn)染成纖維細胞
        2.5 轉(zhuǎn)染后細胞增殖與凋亡檢測
    3 結(jié)果與分析
        3.1 鴿成纖維細胞原代細胞與傳代細胞形態(tài)觀察
        3.2 鴿胚胎成纖維細胞生長曲線
        3.3 siRNA的篩選結(jié)果
        3.4 重組慢病毒干擾載體的測序鑒定結(jié)果
        3.5 慢病毒滴度測定結(jié)果
        3.6 重組慢病毒轉(zhuǎn)染效率檢測
        3.7 干擾FABP1、FABP2和FABP3基因后細胞增殖檢測
        3.8 干擾FABP1、FABP2和FABP3基因后細胞凋亡檢測
    4 討論
        4.1 鴿胚胎成纖維細胞的培養(yǎng)
        4.2 慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾
        4.3 FABP1、FABP2和FABP3基因干擾對成纖維細胞增殖的影響
        4.4 FABP1、FABP2和FABP3基因干擾對成纖維細胞凋亡的影響
第五章 結(jié)論、創(chuàng)新點及研究展望
參考文獻
博士期間科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[7]南陽牛幾個基因的多態(tài)性及其與生長發(fā)育性狀的相關(guān)性的研究[D]. 張爭鋒.西北農(nóng)林科技大學(xué). 2006



本文編號：3539773