禽流感(Avian influenza, AI)是由禽流感病毒引起禽類神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)乃至全身性感染,甚至死亡的一種烈性傳染病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物傳染病。2003年,高致病禽流感(Highly pathogenic avian influenza, HPAI)的爆發(fā)出現(xiàn)于東南亞的一些國(guó)家。HPAIV H5N1在歐洲、亞洲以及非洲的頻頻爆發(fā)已經(jīng)導(dǎo)致了數(shù)以萬(wàn)計(jì)禽類的死亡,給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了不可估計(jì)的損失。AIV的難以控制也讓人們?cè)桨l(fā)擔(dān)心新型禽流感病毒會(huì)在人與人之間傳播,而大多數(shù)人感染HPAIV的病例均有與病死禽接觸的歷史。人們通常通過(guò)大面積的撲殺病禽來(lái)控制疫情,但事實(shí)證明,HPAI快速的傳播速度決定了撲殺并不能從根本上消滅病毒,因此在高危地區(qū)進(jìn)行預(yù)防性疫苗接種已經(jīng)成為當(dāng)今最有效手段之一。目前,已經(jīng)有許多種類的疫苗被研制成功,包括基因工程亞單位疫苗、DNA疫苗、滅活疫苗等,它們都具有較好的免疫保護(hù)作用以及安全性,但也有各自的局限性。 新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)像AIV一樣,可以在禽類中廣泛傳播并引起高致死率。新...

【文章來(lái)源】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 禽流感病毒概述
        1.1.1 禽流感病毒的一般特性
        1.1.2 禽流感病毒的HA蛋白
        1.1.3 禽流感病毒的臨床癥狀
        1.1.4 禽流感病毒的流行病學(xué)
        1.1.5 禽流感病毒的防控
        1.1.6 禽流感疫苗的研究現(xiàn)狀
            1.1.6.1 禽流感病毒滅活全病毒疫苗
            1.1.6.2 禽流感病毒亞單位疫苗
            1.1.6.3 禽流感病毒DNA疫苗
            1.1.6.4 禽流感病毒重組活載體疫苗
            1.1.6.5 新型疫苗的新走向—密碼子優(yōu)化
        1.1.7 NDV作為活載體疫苗的研究現(xiàn)狀
        1.1.8 研究的目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)部分
    2.1 材料
        2.1.1 病毒株和細(xì)胞
        2.1.2 質(zhì)粒
        2.1.3 高免血清和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.4 主要試劑和儀器
    2.2 方法
        2.2.1 表達(dá)兩種HA基因的重組病毒基因組全長(zhǎng)cDNA克隆的構(gòu)建
            2.2.1.1 引物的設(shè)計(jì)與合成
            2.2.1.2 表達(dá)兩種HA基因的重組病毒全長(zhǎng)cDNA的構(gòu)建
        2.2.2 重組病毒的拯救
        2.2.3 重組病毒的鑒定
            2.2.3.1 RT-PCR鑒定
            2.2.3.2 利用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)重組病毒的蛋白的表達(dá)
            2.2.3.3 Western blot檢測(cè)重組病毒的NDV蛋白以及HA蛋白的表達(dá)
        2.2.4 兩種重組病毒在雞胚成纖維細(xì)胞中的生長(zhǎng)曲線測(cè)定
        2.2.5 重組病毒的免疫效果評(píng)估
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 兩種重組病毒基因組全長(zhǎng)cDNA克隆的構(gòu)建與病毒的拯救
        2.3.2 RT-PCR鑒定
        2.3.3 HA蛋白的表達(dá)和定位
        2.3.4 western blot鑒定HA蛋白表達(dá)的差異
        2.3.5 生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)比較重組病毒生長(zhǎng)差異
        2.3.6 重組病毒對(duì)SPF雞的免疫反應(yīng)
    2.4 討論
第三章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3538461