牛病毒性腹瀉（Bovine viral diarrhea,BVD）是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的牛的一種臨床癥狀復(fù)雜多樣,可在牛群中持續(xù)感染的重要牛病毒性傳染病之一。由于BVDV獨(dú)特的致病機(jī)制能夠造成宿主的免疫抑制,從而導(dǎo)致免疫失敗以及其它呼吸道傳染病的發(fā)生。同時(shí),被BVDV感染的牛群,其繁殖、產(chǎn)肉、產(chǎn)奶等生產(chǎn)性能會受到極大地影響,進(jìn)而引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前,預(yù)防BVD主要采用疫苗接種,包括弱毒疫苗和滅活疫苗。出于對弱毒疫苗的安全性考慮,免疫接種仍以滅活疫苗為主,但由于BVDV易發(fā)生突變,滅活疫苗應(yīng)對病毒突變的能力差,常常導(dǎo)致免疫失敗。因此,研制能夠有效預(yù)防BVDV感染的新型疫苗對防控牛病毒性腹瀉病具有重要意義。本研究基于BVDV主要經(jīng)消化道黏膜感染的特點(diǎn),誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生有效的保護(hù)性黏膜免疫應(yīng)答可構(gòu)筑機(jī)體抵抗BVDV經(jīng)黏膜感染的第一道防線為指導(dǎo)思想實(shí)施課題研究,選擇BVDV保護(hù)性抗原E2蛋白為免疫原及霍亂毒素B亞單位（CTB）為免疫佐劑,利用干酪乳桿菌作為抗原傳遞載體,構(gòu)建融合表達(dá)BVDV E2蛋白和CTB的基因工程乳酸菌... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

目的基因E2的PCR擴(kuò)增結(jié)果

Marker DL8000；1：pPG-E2 經(jīng) Sa Marker DL8000;1: pPG-E2 digested 重組質(zhì)粒 pPG-E2 的雙酶切鑒tification of pPG-E2 digested by pPG-E2/Lc W56 表達(dá) E果c W56 靜置培養(yǎng) 24 h，收集菌后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血酪乳桿菌 pPG-E2/Lc W56 出應(yīng)條帶，表明目的蛋白獲得表

：DNA Marker DL8000；1：pPG-E2 經(jīng) SacI、ApaI 雙酶: DNA Marker DL8000;1: pPG-E2 digested by SacI and A圖 3-8 重組質(zhì)粒 pPG-E2 的雙酶切鑒定結(jié)果-8 Identification of pPG-E2 digested by Sac I and Ap菌 pPG-E2/Lc W56 表達(dá) E2 蛋白的定結(jié)果G-E2/Lc W56 靜置培養(yǎng) 24 h，收集菌體并進(jìn)行裂PVDF 膜后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血清和 HRP重組干酪乳桿菌 pPG-E2/Lc W56 出現(xiàn)預(yù)期大小未見相應(yīng)條帶，表明目的蛋白獲得表達(dá)（見圖 3

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重組乳酸菌的構(gòu)建及其免疫原性的研究[J]. 趙維靜,趙建偉,胡譯文,謝靜,劉瓊,王春鳳,王建忠,錢愛東.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(04)
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碩士論文
[1]新型豬流行性腹瀉病毒S1基因重組乳酸菌載體的構(gòu)建及小鼠免疫研究[D]. 郭夢茹.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]表達(dá)傳染性法氏囊病病毒VP2重組乳酸菌主動遞送活載體的構(gòu)建及免疫效果評價(jià)[D]. 劉琳琳.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[3]融合表達(dá)TGEV 6Ds與PEDV ps420非抗性標(biāo)記重組干酪乳桿菌表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建及免疫效果評價(jià)[D]. 王玉賽.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]表達(dá)PEDV保護(hù)性抗原靶向融合肽乳酸桿菌活菌載體的構(gòu)建及其免疫原性分析[D]. 陳蘇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3537643