兔腦炎微孢子蟲（Encephalitozoon cuniculi,E.cuniculi）又稱兔腦炎原蟲,屬腦炎微孢子蟲屬,能夠引起家兔、狐、人和犬的機會性感染,是重要的人畜共患胞內寄生蟲。E.cuniculi對藍狐極易感染,在2013年遼寧省出現(xiàn)了中國首例藍狐腦炎微孢子蟲病。該病主要寄生于幼狐腎臟、腦組織,經(jīng)胎盤、尿液傳播,引起藍狐大量淘汰,給藍狐養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,目前國內對該病報道極少,且沒有相關的免疫預防措施。吉林省九臺、白城和黑龍江省漠河部分藍狐養(yǎng)殖場發(fā)生疑似藍狐腦炎微孢子蟲病疫情,本試驗通過臨床癥狀觀察、病理剖檢、PCR檢測,之后對病料進行蟲株純化、染色觀察、蟲株分離、電鏡觀察以及分離株PTP1、PTP2、PTP4基因的核苷酸序列分析,為免疫診斷打下理論基礎。本研究調查了吉林省九臺、白城和黑龍江省漠河部分藍狐養(yǎng)殖場發(fā)生的疫情,病狐表現(xiàn)不同程度脫水、生長停滯、眼睛失明,剖檢可見腎臟蒼白、腫大,將腎臟、肝臟等病料固定制備石蠟切片并進行HE染色、改良Masson三色染色、革蘭染色比較觀察,腎臟、肝臟等主要臟器檢測到微孢子蟲。根據(jù)Genebank登陸的E.cuniculi I... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

至4月齡藍狐呈現(xiàn)精神萎靡、生長停滯、消瘦和被毛粗亂等癥狀Fig.2-13to4monthsoldbluefoxeswithsymptomssuchaswilting,stagnantgrowth,weight

至 2-3 月仍與初斷奶幼狐沒有區(qū)別（如圖 2-1），飲水量增加性感染趨勢。 2-1 3 至 4 月齡藍狐呈現(xiàn)精神萎靡、生長停滯、消瘦和被毛粗亂等癥 to 4 months old blue foxes with symptoms such as wilting, stagnant growtloss and rough hair病理變化藍狐進行剖檢，觀察到腎臟腫大，比正常的大 2~3 倍，呈蒼白

臟切片的革蘭染色Fig.2-3Aand B: Blue fox kidney pathology section (400 x)Aand B：Modified Marssontrichrome staining of kidney sections , C and D: Gram staining of kidney sections ；E and F:Gram staining of spleen sections2.3.2 藍狐腦炎微孢子蟲病的 PCR 檢測不同地區(qū)藍狐養(yǎng)殖區(qū)域的 35 份腎臟組織研磨提取 DNA 作為模板，進行 PCR檢測，成功克隆 762bp 大小的片段，檢測到陽性樣品共 12 份（如圖 2-4）。其中九臺市某養(yǎng)殖場 11 只剖檢藍狐腎臟中檢測出 5 份為陽性，漠河市某養(yǎng)殖場 12 只剖檢藍狐腎臟中檢測出 4 份為陽性，白城市某養(yǎng)殖場 12 只藍狐中檢測出 3 份為陽性。使用畢氏微孢子蟲、腸腦炎微孢子蟲 ITS 基因特異性引物和細菌 16sDNA 通用引物 27F、1492R 檢測腎臟中畢氏微孢子蟲、腸腦炎微孢子蟲細菌的感染，將PCR 擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳驗證結果顯示并未擴增出 392bp、930bp 和1500bp 左右大小的目的條帶。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]2種在組織切片上鑒別兔腦炎原蟲的新方法[J]. 李瑞珍,劉志科,梁瑩瑩,郝軍紅,趙俊江,潘耀謙.  安徽農業(yè)科學. 2015(16)
[2]微孢子蟲研究進展[J]. 張志芳,沈中元,何家祿.  蠶業(yè)科學. 2000(01)
[3]與艾滋病相關的人微孢子蟲研究[J]. 余南.  中山大學研究生學刊(自然科學版). 1994(03)
[4]與艾滋病相關的人微孢子蟲研究[J]. 余南.  中山大學研究生學刊(自然科學版). 1994 (03)



本文編號：3535553