豬干擾素α和γ在家蠶中的共表達(dá)及抗病毒活性測(cè)定
發(fā)布時(shí)間:2021-12-09 11:16
近年來,隨著規(guī);纳i養(yǎng)殖廠越來越多,生豬發(fā)生重大疫病的風(fēng)險(xiǎn)在不斷加大,豬瘟、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、口蹄疫等重大疫病時(shí)有發(fā)生。豬的各類傳染病,特別是病毒性傳染病嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展,常常造成重大經(jīng)濟(jì)損失,部分人畜共患病毒性傳染病還直接危害到人類的健康。因此病毒病的預(yù)防和治療顯得尤為重要,研制出高效經(jīng)濟(jì)的抗病毒和免疫增強(qiáng)藥物是非常重要的應(yīng)對(duì)舉措。干擾素是人和動(dòng)物細(xì)胞受到特定干擾素誘生劑刺激后,產(chǎn)生的一種具有多種生物學(xué)活性的細(xì)胞因子。干擾素具有抗病毒、抗腫瘤和免疫增強(qiáng)等多種生物活性,是一種可治可防的抗病毒生物制劑。Ⅰ型干擾素和Ⅱ型干擾素聯(lián)合使用具有協(xié)同作用,比單獨(dú)使用其中一種具有更強(qiáng)的抗病毒效果。因此利用基因工程技術(shù)制備出含有豬干擾素α和豬干擾素γ的復(fù)合型干擾素對(duì)防治豬的病毒性疾病具有重要意義。本研究以家蠶桿狀病毒為表達(dá)載體,在家蠶幼蟲內(nèi)成功地共表達(dá)了有活性的豬干擾素α和γ。首先優(yōu)化并合成了豬干擾素α和γ基因,構(gòu)建了含有豬干擾素α和γ基因的轉(zhuǎn)移載體pVL-α-IRES-γ,與線性化的Bm-BacPAK6DNA用脂質(zhì)體包埋共轉(zhuǎn)染Bm-N細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)同源重組,收集共轉(zhuǎn)...
【文章來源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
重組質(zhì)粒pBm035-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.1IdentificationofpBm035-IRES-γbyenzymedigestion
重組質(zhì)粒pBm035-α-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.2IdentificationofpBm035-α-IRES-γbyenzymedigestionM:DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);1:重組質(zhì)粒pBm035-α-IRES-γ的雙酶切產(chǎn)物(BamHI/EcoRI)
重組質(zhì)粒pVL-α-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.3IdentificationofpVL-α-IRES-γbyenzymedigestionM:DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);1:重組質(zhì)粒pVL-α-IRES-γ的雙酶切產(chǎn)物(BamHI/EcoRI)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]ICTV第九次報(bào)告對(duì)病毒分類系統(tǒng)的一些修改[J]. 張忠信. 病毒學(xué)報(bào). 2012(05)
[2]豬干擾素α、β和γ的融合表達(dá)及活性[J]. 鄭鳴,邊傳周,王老七,王永芬. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(09)
[3]ICTV報(bào)告VⅢ以來昆蟲病毒分類上的變化[J]. 景天忠,董瀛謙,王志英. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2011(02)
[4]豬γ干擾素的表達(dá)及其抗病毒活性的安全檢測(cè)[J]. 賀番,孫元,葛金英,李淼,常天明,步志高,仇華吉. 生物工程學(xué)報(bào). 2010(04)
[5]桑蠶的生物學(xué)特性及飼養(yǎng)技術(shù)[J]. 朱慶明. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2009(12)
[6]表達(dá)增強(qiáng)綠色熒光蛋白重組水皰性口炎病毒印第安納株的構(gòu)建[J]. 溫志遠(yuǎn),葛金英,胡森,王永,步志高. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(12)
[7]獸用干擾素的研究進(jìn)展[J]. 劉宇鵬,吳瓊,任曉慧,劉松財(cái). 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2007(11)
[8]內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)及應(yīng)用[J]. 高飛,徐開林,潘秀英. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2005(05)
[9]豬白細(xì)胞干擾素防治仔豬腹瀉效果觀察[J]. 張泉軍,鄧紹基. 畜禽業(yè). 2005(03)
[10]干擾素在腫瘤治療中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 潘燁,鄭起. 國(guó)外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊(cè)). 2005(01)
博士論文
[1]動(dòng)物狂犬病基因工程亞單位疫苗研究[D]. 殷相平.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]家蠶生物反應(yīng)器表達(dá)hIL-28A及其抗腫瘤能力評(píng)價(jià)[D]. 陸葉.蘇州大學(xué) 2010
[3]豬干擾素a和γ在桿狀病毒/昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)中表達(dá)及重組蛋白初步應(yīng)用[D]. 王彥彬.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[4]AsiaⅠ型口蹄疫病毒空衣殼抗原的表達(dá)與免疫研究[D]. 李志勇.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
[5]重組牛、豬和雞β干擾素在CHO細(xì)胞中的高效穩(wěn)定表達(dá)及其生物學(xué)活性研究[D]. 陳偉業(yè).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]家蠶桿狀病毒解旋酶基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)與功能分析及表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用[D]. 肖慶利.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2002
碩士論文
[1]斜紋夜蛾核型多角體病毒ⅡORF50基因的研究[D]. 閔丹.蘇州大學(xué) 2010
[2]豬α、γ干擾素的原核表達(dá)、純化及抗病毒活性初步檢測(cè)[D]. 趙偉鴿.上海交通大學(xué) 2010
[3]口蹄疫病毒組合基因在家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)及差異分析[D]. 張韻.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[4]豬α干擾素在畢赤酵母中的分泌表達(dá)及其免疫佐劑功能研究[D]. 周國(guó)棟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號(hào):3530538
【文章來源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
重組質(zhì)粒pBm035-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.1IdentificationofpBm035-IRES-γbyenzymedigestion
重組質(zhì)粒pBm035-α-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.2IdentificationofpBm035-α-IRES-γbyenzymedigestionM:DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);1:重組質(zhì)粒pBm035-α-IRES-γ的雙酶切產(chǎn)物(BamHI/EcoRI)
重組質(zhì)粒pVL-α-IRES-γ的酶切鑒定Figure2.3IdentificationofpVL-α-IRES-γbyenzymedigestionM:DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);1:重組質(zhì)粒pVL-α-IRES-γ的雙酶切產(chǎn)物(BamHI/EcoRI)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]豬干擾素α、β和γ的融合表達(dá)及活性[J]. 鄭鳴,邊傳周,王老七,王永芬. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(09)
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[5]桑蠶的生物學(xué)特性及飼養(yǎng)技術(shù)[J]. 朱慶明. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2009(12)
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[8]內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)及應(yīng)用[J]. 高飛,徐開林,潘秀英. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2005(05)
[9]豬白細(xì)胞干擾素防治仔豬腹瀉效果觀察[J]. 張泉軍,鄧紹基. 畜禽業(yè). 2005(03)
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博士論文
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[3]豬干擾素a和γ在桿狀病毒/昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)中表達(dá)及重組蛋白初步應(yīng)用[D]. 王彥彬.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
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[5]重組牛、豬和雞β干擾素在CHO細(xì)胞中的高效穩(wěn)定表達(dá)及其生物學(xué)活性研究[D]. 陳偉業(yè).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]家蠶桿狀病毒解旋酶基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)與功能分析及表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用[D]. 肖慶利.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2002
碩士論文
[1]斜紋夜蛾核型多角體病毒ⅡORF50基因的研究[D]. 閔丹.蘇州大學(xué) 2010
[2]豬α、γ干擾素的原核表達(dá)、純化及抗病毒活性初步檢測(cè)[D]. 趙偉鴿.上海交通大學(xué) 2010
[3]口蹄疫病毒組合基因在家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)及差異分析[D]. 張韻.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[4]豬α干擾素在畢赤酵母中的分泌表達(dá)及其免疫佐劑功能研究[D]. 周國(guó)棟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號(hào):3530538
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