鸚鵡熱衣原體屬于衣原體科衣原體屬,是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生的革蘭氏陰性菌。是引起人類、家禽、鳥類及多種哺乳動(dòng)物感染的一種人獸共患病病原體。鸚鵡熱衣原體不僅對(duì)家禽業(yè)的有序發(fā)展造成嚴(yán)重的干擾,也對(duì)人類的健康形成嚴(yán)重的威脅。目前國內(nèi)對(duì)動(dòng)物衣原體病的診斷主要依賴于間接血凝試驗(yàn)（IHA）,由于衣原體感染動(dòng)物具有自身的的抗體消長(zhǎng)規(guī)律,通過IHA檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象。為避免抗體消長(zhǎng)造成的檢測(cè)假陰性結(jié)果,針對(duì)該病原體開發(fā)新的診斷方法顯得尤為重要。根據(jù)沙眼衣原體質(zhì)粒PGP3蛋白在感染人期間持續(xù)分泌的特性,選擇該鸚鵡熱衣原體質(zhì)粒PGP3蛋白基因作為研究的靶點(diǎn),為準(zhǔn)確檢測(cè)鸚鵡熱衣原體病提供理論依據(jù)。以蘭州廣場(chǎng)觀賞鴿糞便中提取總基因組DNA為模板,根據(jù)GenBank鸚鵡熱衣原體Pgp3基因序列（DQ414846.1）設(shè)計(jì)合成1對(duì)特異性引物,對(duì)目的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,連接到pMD-18T載體并進(jìn)行測(cè)序鑒定。對(duì)測(cè)序無誤的序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,顯示鸚鵡熱衣原體PGP3蛋白與沙眼衣原體PGP3蛋白具有相似的二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu),表明鸚鵡熱衣原體PGP3蛋白可能具有與沙眼衣原體PGP3蛋白相似的特性。將Pgp3基因構(gòu)建至p... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鸚鵡熱衣原體的雙相發(fā)育周期Fig.1-1developmentcycleofCpsittaci(KNITTLERetal.,2015)

的呼吸道人畜共患病的病原，尤其是鸚鵡和長(zhǎng)尾小鸚鵡，但也有來自食品行業(yè)的雞以及野生鴿子(LONGBOTTOMetal.,2003)。流產(chǎn)衣原體主要寄生于豬、牛、羊等多種動(dòng)物生殖道黏膜表面的上皮細(xì)胞，造成生殖道黏膜受損，母畜流產(chǎn)、死胎、弱胎，公畜睪丸炎、包皮炎，嚴(yán)重威脅畜牧業(yè)的發(fā)展，孕婦與感染的動(dòng)物直接接觸可能會(huì)造成感染(ALVAREZetal.,2015)。因此，找到衣原體感染快速、準(zhǔn)確的診斷方法至關(guān)重要。1.2鸚鵡熱衣原體病鸚鵡熱衣原體是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生，能感染包括人在內(nèi)的多種哺乳動(dòng)物及禽類鳥類，是一種人獸共患病病原體（圖1-2）。目前，有7種已知的基因型（A-F和E/B）。所有的基因型均可傳播給人類，引起鸚鵡病或鸚鵡熱(ANDERSENetal.,2000)。鸚鵡熱衣原體能感染跨越30種不同鳥類目的至少465種鳥類，其中至少153種為雀形目(KALETAetal.,2003)，尤其是鸚鵡科（鳳頭鸚鵡、鸚鵡、長(zhǎng)尾鸚鵡）以及鴿類。鸚鵡熱衣原體的主要傳播方式是通過吸入了來自病畜或無癥狀帶菌者尿液、呼吸道和眼部分泌物或干燥糞便的污染氣溶膠。人類與患病的鳥類及其糞便、羽毛等密切接觸時(shí)極有可能會(huì)感染鸚鵡熱衣原體，引起嚴(yán)重的疾病(MAIR-JENKINSetal.,2018；VANROMPAYetal.,2007)。鸚鵡病有可能在人與人之間傳播，但較為罕見(HUGHESetal.,1997；ITOetal.,2002)。圖1-2衣原體的人獸共患潛力Fig.1-2Zoonoticpotentialoftheanimalpathogens(LONGBOTTOMandCOULTER,2003)鸚鵡熱衣原體主要引起人類呼吸道感染，臨床癥狀千變?nèi)f化。可從最初的呼吸系統(tǒng)的上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞擴(kuò)散到全身，影響不同的器官（心臟、肝臟和胃腸道）。人類鸚鵡熱衣原體疾病的發(fā)病通常遵循5-14天的潛伏期，但是根據(jù)血清學(xué)的檢測(cè)結(jié)果報(bào)告的潛伏期更長(zhǎng)(YUNGetal.,1988)。嚴(yán)重程度從輕微的非特異性疾病到帶有

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論6TARP-CPAF）ELISA與MikrogenrecomLine免疫印跡法檢測(cè)沙眼衣原體血清抗體IgG，從而對(duì)輸卵管因素不孕（ITF）進(jìn)行預(yù)測(cè)。兩種方法檢測(cè)臨床樣本有很好的一致性。1.3.3.3微量間接免疫熒光試驗(yàn)(Microindirectimmunofluorescencetest,MIF)微量間接免疫熒光試驗(yàn)，曾被推薦為診斷肺炎衣原體的最可靠的血清學(xué)方法(DOWELLetal.,2001)，DONATIetal.,(2009)將純化的衣原體原體（EB）建立的MIF作為檢測(cè)是否有衣原體感染的標(biāo)準(zhǔn)。但該診斷方法技術(shù)要求高，耗時(shí)長(zhǎng)，因此并沒有成為肺炎衣原體的常用檢測(cè)項(xiàng)目(MIYASHITAetal.,2008)。王菲等（2018）對(duì)肺炎衣原體和肺炎支原體臨床血清學(xué)檢測(cè)試劑研發(fā)中發(fā)現(xiàn)，rCpn-MOMP存在屬特異性抗原表位，有較強(qiáng)的抗原性，是臨床檢驗(yàn)肺炎衣原體的一個(gè)好手段。1.4衣原體質(zhì)粒糖蛋白3（PGP3）衣原體質(zhì)粒是一種大小約為7.5kb、高度保守的、非結(jié)合的、非整合的DNA分子，在許多衣原體物種中存在，其中包括沙眼衣原體、鼠衣原體、貓衣原體、豚鼠衣原體、鸚鵡熱衣原體、反芻動(dòng)物衣原體。在大多數(shù)生物系統(tǒng)中，自主復(fù)制的質(zhì)�？勺鳛檫z傳變異的工具。許多嚴(yán)重疾病都是質(zhì)粒攜帶的毒力因子直接導(dǎo)致的。Ct與Cps質(zhì)粒含有8個(gè)開放閱讀框（ORF），Cm含有7個(gè)。質(zhì)粒糖蛋白1、2、6、8即PGP1、PGP2、PGP6、PGP8與質(zhì)粒的維護(hù)和復(fù)制相關(guān)。質(zhì)粒糖蛋白4、5即PGP4、PGP5參與染色體基因的表達(dá)(CARLSONetal.,2008)，PGP3是唯一一個(gè)能分泌到宿主細(xì)胞質(zhì)的質(zhì)粒糖蛋白（圖1-3）(BUDRYSetal.,2012；LIetal.,2008)。圖1-3衣原體的生長(zhǎng)和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)Fig.1-3Chlamydiagrowthandplasmidstructure(ROCKEY,2011)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3528315