益生菌具有改善腸道健康的益生性能,在養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用已經(jīng)日漸廣泛,可作為飼用抗生素促生長劑的潛在替代物。益生菌飼喂后,通過胃腸到達(dá)作用部位的活菌數(shù)量直接影響其益生效果,而由宿主肝臟分泌、促進(jìn)脂肪代謝的膽鹽是細(xì)菌在胃腸道中必須面臨的抑菌物質(zhì)之一,因此膽鹽耐受是益生菌在腸道中發(fā)揮益生作用的基礎(chǔ),然而目前關(guān)于益生菌抵抗膽鹽的分子機(jī)制尚不清楚,因此,闡明益生菌膽鹽耐受的分子機(jī)制對(duì)益生菌的篩選及應(yīng)用具有重要意義。屎腸球菌屬于雞腸道的正常微生物區(qū)系,能改善雞腸道健康,提高生產(chǎn)效率,可作為飼用益生菌使用。因此,本研究以肉雞腸道屎腸球菌為研究對(duì)象,通過檢測其益生特性和安全性,篩選出可用于飼料添加的益生屎腸球菌;進(jìn)一步通過多種分子生物學(xué)手段闡明屎腸球菌雙組分系統(tǒng)介導(dǎo)的膽鹽耐受調(diào)控機(jī)制和膽鹽水解酶介導(dǎo)的膽鹽耐受機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:1.通過耐酸試驗(yàn)和16s rDNA序列種屬鑒定,從健康肉雞腸道分離的106株乳酸菌中篩選出8株屎腸球菌作為候選菌株,通過耐膽鹽試驗(yàn)、粘附試驗(yàn)、抑菌試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、生物被膜形成試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、毒力因子檢測,獲得一株屎腸球菌NW2。NW2菌株對(duì)上皮細(xì)胞粘附率高,對(duì)4種病原菌（腸炎沙門... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

游離型和結(jié)合型膽酸（KoeppenandStanton2018）

收后的膽鹽通過門靜脈回到肝臟，被肝臟細(xì)胞吸收結(jié)程被稱為腸肝循環(huán)（圖 1-2）表 1-2 膽汁酸的種類Table 1-2 Different forms of bile acid甘氨酸結(jié)合膽汁酸 �；撬峤Y(jié)合膽汁Glycocholic acid甘氨膽酸 GCATaurocholic aci牛磺膽酸 TCAholic acidCDAGlycochenodeoxycholic acid甘氨鵝脫氧膽酸 GCDATaurochenodeo�；蛆Z脫氧膽酸acidAGlycodeoxycholic acid甘氨脫氧膽酸 GDCATaurodeoxycho�；敲撗跄懰� cidGlycolithocholic acid甘氨石膽酸 GLATaurolithocholi牛磺石膽酸 Tolic acidUAGlycoursodeoxycholic acid甘氨熊脫氧膽酸 GUATauroursodeoxy�；切苊撗跄懰�

S 由兩種蛋白質(zhì)組成：位于細(xì)胞膜上，負(fù)責(zé)信號(hào)傳感的組氨酸蛋白激酶（Histinase，HK），可感知環(huán)境變化；位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白（Response regulator，R調(diào)節(jié)適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)，通常是調(diào)控下游基因的表達(dá)。HK 響應(yīng)環(huán)境因子，其自激酶結(jié)構(gòu)保守的組氨酸殘基發(fā)生自磷酸化，然后將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到相應(yīng) RR 上的天冬氨酸，RR 在磷酸化后活化，通常會(huì)結(jié)合到下游靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域，調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)而啟動(dòng)對(duì)環(huán)境因子的應(yīng)答反應(yīng)（圖 1-3）。TCS 在細(xì)菌細(xì)胞膜應(yīng)激反應(yīng)中起到重要作用。研究表明，大腸桿菌的 Cpx 雙組統(tǒng)能被細(xì)胞膜刺激因子誘導(dǎo)，如堿性 pH、特異性相關(guān)蛋白和膜結(jié)構(gòu)變化。這些因變化導(dǎo)致組氨酸蛋白激酶 CpxA 自磷酸化，然后將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移至反應(yīng)調(diào)節(jié)子 C保守天冬氨酸殘基，CpxR 磷酸化后，上調(diào)幾個(gè)涉及蛋白折疊、降解和轉(zhuǎn)錄的基MacRitchie et al. 2008）。在枯草芽孢桿菌中，BceRS 是首先被描述的 TCS，它能調(diào)BC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 BceAB，使其對(duì)桿菌肽產(chǎn)生抗性（Papadimitriou et al. 2016）。另外， CG 含量的革蘭氏陽性菌中，雙組分系統(tǒng) WalRK 對(duì)于維持肽聚糖穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要，能調(diào)節(jié)細(xì)胞壁相關(guān)應(yīng)激（Wayne et al. 2012）。這些發(fā)現(xiàn)表明 TCS 在細(xì)胞膜和細(xì)胞激反應(yīng)中起重要作用。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)菌耐藥性監(jiān)測工作高度布局 禁抗在提速——《全國遏制動(dòng)物源細(xì)菌耐藥行動(dòng)計(jì)劃（2017-2020年）》全文及解讀[J].   飼料與畜牧. 2018(01)

博士論文
[1]氧濃度和益生菌對(duì)高海拔地區(qū)肉雞的影響及益生菌緩解仔雞沙門氏菌性腸炎的研究[D]. 王利紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]免疫活性乳酸菌的篩選及其抗肉雞沙門氏菌感染的研究[D]. 馮軍廠.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016

碩士論文
[1]雞源乳酸菌的分離篩選及其對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響[D]. 王利紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3523569