牛的傳染性海綿狀腦病（即瘋牛病，BSE）是一種人畜共患的神經退行性疾病，該病能從牛傳染給人且致死率100%，具有極高的潛在危害性。除了嚴格控制各類牛源性飼料、食品、血液制品、醫(yī)療器械等阻斷傳播途徑外，篩選具有強抗病性的動物作為抗病的重要手段，是目前生物技術發(fā)展并在實際育種中應用的一項前沿技術。目前的研究證明朊蛋白基因家族（the prion gene family）成員PRNP的基因多態(tài)性對BSE抗性有重要影響，而朊蛋白基因家族的另外兩個成員PRND和SPRN也因為可能影響牛的抗病力而逐漸受到人們的關注和研究。PRNP基因多態(tài)性位點作為重要的候選基因被廣泛研究，證明其啟動子區(qū)的23bp和內含子1區(qū)的12bp序列的插入/缺失多態(tài)性對BSE易感性/抗性有重要影響，二者通過與轉錄調控因子的結合或分離來調控朊蛋白的表達水平，從而影響牛對BSE抗性。其次PRNP編碼區(qū)中還有一個高度保守的八肽重復區(qū)（即24bp序列多態(tài)性），其重復數目越多對于BSE的易感性越高，八肽重復數一般為6少數個體為5。本研究選擇從未發(fā)現(xiàn)BSE病例的水牛為研究材料，并以荷斯坦奶牛及部分報道材料中BSE患病牛做為對照，通過PC... 

【文章來源】：中國計量大學浙江省

【文章頁數】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PRNP、PRND和SPRN基因示意圖

圖 1.2 PrPC、Doppel 和 Shadoo 蛋白示意圖[20]Figure1.2 The sketch map of PrPC, Doppel and Shadoo1.3 朊蛋白基因家族多態(tài)性對BSE的影響及其研究進展在對朊蛋白疾病的研究中，通過對 PRNP 多態(tài)性和發(fā)病個體數的關聯(lián)性分析，證實了綿羊 PRNP 多態(tài)性與易感性有著高度相關，此后開始了牛羊等多種動物的 PRNP 多態(tài)性及疾病易感性研究。迄今為止，在牛羊等以及人類中發(fā)現(xiàn)了與朊蛋白疾病相關的許多 PRNP 基因多態(tài)性位點，但不同物種影響抗病性的位點以及影響大小也有所不同，如在羊 PRNP 的 136、154 和 171 位氨基酸對瘙癢病抗性影響最大，但目前沒有發(fā)現(xiàn)這些位點能對牛 BSE 產生影響。而牛 PRNP與抗病性的研究起步較晚，不過現(xiàn)階段對牛 PRNP 的研究已經深入到朊蛋白基因家族的另外兩個成員。牛朊蛋白基因家族在哺乳動物中高度保守，其中 PRNP的疏水區(qū)最為保守，八肽重復區(qū)也極為保守，一般八肽重復的氨基酸序列為P(Q/H)GGGWGQ[32]。

圖 1.3 PRNP 基因及其編碼蛋白示意圖Figure1.3 The sketch map of PRNP and prion protein1.3.1.2 牛 PRNP 編碼區(qū)多態(tài)性研究進展除了 PRNP 啟動子區(qū) 23bp 和內含子 1 中 12bp 的插入/缺失多態(tài)性，目前研究較多的還有編碼區(qū)外顯子 3 中 24bp 八肽重復的插入/缺失多態(tài)性(多為 6 個還有 4 個、5 個或 7 個八肽重復)以及 ORF 中的 SNPs（單核苷酸多態(tài)性）位點。有研究發(fā)現(xiàn)人的 PRNP 八肽重復的長度與患病年齡和病程成負相關[47]，即八肽重復數目越多，人的患病年齡越低、患病病程越短。還發(fā)現(xiàn)表達 10 個八肽重復（24bp）的轉基因小鼠出現(xiàn)慢性神經疾病、共濟失調等，且與只表達 6 個八肽重復的小鼠相比有更短的潛伏期[48]。其原因可能是近 N-端的八肽重復區(qū)與二價陽離子有結合能力，而二者的結合可能會影響蛋白的結構和功能。目前，檢測到的牛 PRNP 八肽重復的數目大多為 6 個（PRNP6 平均頻率為 0.894），少數為5 個（頻率 0.106），極少數為 7 個[32]。雖然目前還沒有確切的證據表明八肽重

【參考文獻】：
期刊論文
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