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豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬博卡病毒多重PCR檢測方法的建立

發(fā)布時間:2021-11-23 04:59
  豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea, PED)是由豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)引起的一種高度接觸性腸道傳染病。感染后,主要引起豬的嘔吐、腹瀉、食欲下降和脫水,各種年齡的豬均易感染。豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis, TGE)是由豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine, TGEV)引起的一種導(dǎo)致豬嘔吐、水樣腹瀉和脫水等主要癥狀的急性、高度接觸性傳染病。豬博卡病毒(Porcine bocavirus, PBoV)是2009年新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)小病毒,屬于細(xì)小病毒科博卡病毒屬。目前已經(jīng)證實(shí),多種博卡病毒都能夠感染并且導(dǎo)致宿主發(fā)生急性腹瀉。目前的數(shù)據(jù)表明,PBoV與目前豬的腹瀉疫情具有一定的相關(guān)性,但是不能證明PBoV是原發(fā)性病原或者對其他豬腹瀉病毒的爆發(fā)起到協(xié)同作用。由于TGEV、PEDV這兩種病毒臨床上呈現(xiàn)出相似的癥狀,經(jīng)常會發(fā)生混合感染,而PBoV又與腹瀉疫情相關(guān)。因此,為了評估PBoV... 

【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
目錄
摘要
ABSTRACT
縮略語及符號
前言
第一章 豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬博卡病毒檢測方法的研究進(jìn)展
    1 豬流行性腹瀉病毒
        1.1 概述
        1.2 病原學(xué)
        1.3 臨床癥狀及病理變化
        1.4 PEDV檢測方法研究進(jìn)展
    2 豬傳染性胃腸炎病毒
        2.1 概述
        2.2 基因組結(jié)構(gòu)
        2.3 TGEV的變異性
        2.4 臨床癥狀及病理變化
        2.5 TGEV檢測方法研究進(jìn)展
    3 豬博卡病毒
        3.1 概述
        3.2 豬博卡病毒的分型
        3.3 豬博卡病毒的基因組特征分析
        3.4 豬博卡病毒的流行情況
        3.5 PBoV檢測方法研究進(jìn)展
第二章 豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬博卡病毒單一PCR檢測方法的建立
    1 材料
        1.1 細(xì)胞、菌株與毒株
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 主要溶液配方
    2 方法
        2.1 PCR引物的設(shè)計(jì)
        2.2 樣品及模板制備
        2.3 PCR反應(yīng)
    3 結(jié)果
        3.1 PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
        3.2 單一PCR體系及反應(yīng)程序的確立
        3.3 質(zhì)粒測序結(jié)果
        3.5 PCR反應(yīng)的特異性
        3.6 單一PCR反應(yīng)的重復(fù)性
    4 討論
第三章 豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬博卡病毒多重PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用
    1 材料
        1.1 細(xì)胞、菌株與毒株
        1.2 待檢組織或病料
        1.3 主要試劑
        1.4 多重PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
        1.5 樣品檢測
    2 結(jié)果
        2.1 PEDV+TGEV、PEDV+PBoV和TGEV+PBoV雙重PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
        2.2 PEDV、TGEV和PBoV三重PCR方法的建立
    3 樣品檢測結(jié)果
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士學(xué)習(xí)期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒RT-PCR檢測方法建立及初步應(yīng)用研究[J]. 吳學(xué)敏,陳如敬,王隆柏,車勇良,劉玉濤,莊向生,嚴(yán)山,周倫江.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2012(26)
[2]豬細(xì)小病毒、豬偽狂犬病病毒和豬圓環(huán)病毒2型多重PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 王娟萍,姚敬明,趙喜有,吳忻,孟帆,劉文俊,樊振華,米瑞娟.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(08)
[3]豬博卡病毒PCR檢測方法的建立及其初步流行病學(xué)調(diào)查[J]. 胡軍勇,張倩,王丹丹,涂志勤,胡睿銘,湯細(xì)彪,吳斌.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(08)
[4]豬博卡病毒環(huán)狀附加體的發(fā)現(xiàn)與鑒定[J]. 楊晚竹,黃燦平,段招軍.  病毒學(xué)報(bào). 2012(04)
[5]上海市豬博卡病毒感染情況調(diào)查[J]. 鄧波,劉佩紅,周錦萍,王建,劉健,鞠厚斌,葛菲菲,崔立,華修國.  中國動物傳染病學(xué)報(bào). 2012(03)
[6]豬流行性腹瀉病毒FJ-11A株的分離與ORF3基因序列分析[J]. 陳如敬,吳學(xué)敏,車勇良,王隆柏,魏宏,莊向生,嚴(yán)山,周倫江.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(06)
[7]豬傳染性胃腸炎病毒S基因的SYBR Green Ⅰ熒光定量RT-PCR檢測[J]. 張?jiān)?王亞賓,陳麗穎,張紅英,侯貝貝,崔保安,胡慧.  湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(05)
[8]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒三重PCR檢測方法的建立[J]. 鄭新添,楊小燕,戴愛玲,李曉華,陳星星.  龍巖學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(05)
[9]國外應(yīng)用LAMP技術(shù)檢測動物病毒的研究進(jìn)展(英文)[J]. 朱海霞,張強(qiáng),吳國華,顏新敏,李健,趙志荀.  Agricultural Science & Technology. 2011(07)
[10]豬博卡病毒NP1基因的克隆與原核表達(dá)[J]. 李彬,毛立,何孔旺,溫立斌,茅愛華,張雪寒,倪艷秀,郭容利,馬俊杰,周俊明,呂立新,俞正玉.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(03)

碩士論文
[1]間接競爭ELISA檢測TGEV方法的建立[D]. 鐘濤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3513179

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