發(fā)布時間：2021-11-21 16:03

　　豬瘟（Classical Swine Fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的豬的高度接觸性、致死性傳染性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大威脅和經(jīng)濟(jì)損失。本研究建立了CSFV QuantiGene ViewRNA原位雜交檢測方法；并采用建立的CSFV QuantiGene ViewRNA原位雜交方法初步應(yīng)用于CSFV RNA在體外感染細(xì)胞中的增殖動態(tài)研究和體內(nèi)感染組織的CSFVRNA檢測。為了高效檢測和準(zhǔn)確定位CSFV并探究CSFV RNA在體外感染細(xì)胞中的復(fù)制動態(tài)和分布規(guī)律，本研究分別設(shè)計并合成了CSFV RNA和豬內(nèi)參基因β-actin的多條特異性探針，對培養(yǎng)于PK15細(xì)胞系中的CSFV中等致病力毒株HeBHH1/95（TCID-.550為104/200μL）進(jìn)行研究。并采用正交試驗方法優(yōu)化反應(yīng)條件，根據(jù)檢測結(jié)果、熒光強(qiáng)度、重復(fù)性等因素，確定CSFV QuantiGeneViewRNA原位雜交反應(yīng)的關(guān)鍵要素，蛋白酶K最優(yōu)濃度為1:1000，甲醛最優(yōu)固定時間為30min。在熒光共聚焦顯微鏡下，陽性樣本可檢測到明亮的紅色熒光。通過... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所北京市

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CSFV基因結(jié)構(gòu)模式圖（圖片引自MartinBetal.2007）

QuantiGeneViewRNA技術(shù)工作原理圖解

CSFVQuantiGeneViewRNA原位雜交方法建立結(jié)果圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]CSFV SM株感染對豬外周血白細(xì)胞的影響以及在豬體內(nèi)的分布[D]. 周遠(yuǎn)成.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
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本文編號：3509808