本研究從BHK-21細(xì)胞培養(yǎng)的狂犬病病毒SRV9株病毒液中提取病毒總RNA，通過反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcript PCR，RT-PCR）技術(shù)進(jìn)行狂犬病病毒結(jié)構(gòu)基因的擴(kuò)增，得到1352bp的N基因（核蛋白基因，nucleoprotein gene，N），893bp的P基因（磷酸化蛋白基因，phosphoprotein gene，P），608bp的M基因（基質(zhì)基因，matrix protein gene，M），1574bp的G基因（糖蛋白基因，glycoprotein gene，G），3372bp的L1基因（大轉(zhuǎn)錄蛋白1，large protein gene1，L1）以及3012bp L2基因（大轉(zhuǎn)錄蛋白2，large protein gene2，L2），并將其分別連接于pMD19-T載體，進(jìn)行測(cè)序并與SAD B19株比對(duì)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：N基因、P基因、M基因、G基因、L1基因以及L2基因的核苷酸序列與SAD B19株的核苷酸同源性分別為100%、99.66%、99.67%、99.04%、100%及98.70%，氨基酸序列的同源性分別為100%、98.99%、100%、9... 

【文章來源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RV形態(tài)和結(jié)構(gòu)(引自Jackson，2003)

圖1.2 RV基因組結(jié)構(gòu)圖Fig.1.2 Genome structure of rabies virusN蛋白即核蛋白(nucleoprotein)，其編碼基因高度保守，不同的狂犬病病毒株間的同源性高達(dá)98%~99.6%。N蛋白有3個(gè)主要抗原位點(diǎn)且具有高度一致性。N蛋白在病毒復(fù)制過程中與核酸緊密結(jié)合，形成核糖核蛋白，可以保護(hù)核酸不被核酸酶降解。有研究表明，N蛋白可作為病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的模板，還可維持核衣殼轉(zhuǎn)錄所需的螺旋對(duì)稱結(jié)構(gòu)[10]，因此，N蛋白是轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程中的關(guān)鍵性因子。P蛋白即磷酸化蛋白(phosphoprotein)，具有廣泛的疏水區(qū)。狂犬病病毒不同毒株之間磷酸化蛋白基因的同源性在92%~98%之間。P蛋白可與L蛋白形成具有轉(zhuǎn)錄酶活性的復(fù)合物[11]，約950個(gè)P蛋白分子、150個(gè)L蛋白分子與N蛋白組成具有轉(zhuǎn)錄和復(fù)制活性的核衣殼，該結(jié)構(gòu)可獨(dú)立完成RNA的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程[12]。M蛋白即基質(zhì)蛋白(matrix protein)，連接核衣殼和病毒膜。該蛋白1~72位氨基酸間存在一個(gè)抗原決定簇，可誘導(dǎo)病毒的免疫反應(yīng)；第89~107位氨基酸具有疏水性，起錨定作

圖1.3 CDV形態(tài)及結(jié)構(gòu)Fig.1.3 Shape and construction of canine distemper virus組由一條單股負(fù)鏈 RNA 組成，全長約 15kb~16kb，從磷酸化蛋白 P、基質(zhì)蛋白 M、融合蛋白 F、吸附蛋白3’端和 5’端存在著由 50 個(gè)非編碼核苷酸組成的引導(dǎo)序制和轉(zhuǎn)錄調(diào)控[43-44](見圖 1.4)。圖1.4 CDV基因組結(jié)構(gòu)圖Fig.1.4 Genome structure of canine distemper virus衣殼蛋白(nucleoprotein)，由 523 個(gè)氨基酸組成，包錄和復(fù)制時(shí)充當(dāng)模板。N 蛋白具有一個(gè)完整的開放性轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、裝配中起重要作用[45]，是 CDV 中相當(dāng)

【參考文獻(xiàn)】：
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