本試驗(yàn)針對(duì)副豬嗜血桿菌的16S rRNA基因設(shè)計(jì)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）引物,建立副豬嗜血桿菌LAMP方法,并進(jìn)行特異性和靈敏度試驗(yàn)。結(jié)果顯示,建立的LAMP檢測(cè)方法特異性良好,與其它5種細(xì)菌無(wú)交叉反應(yīng),靈敏度為10^-4ng/μL。分別使用LAMP和PCR方法對(duì)30份臨床采集樣品進(jìn)行檢測(cè),陽(yáng)性檢出率均為40%,符合率100%。本試驗(yàn)建立的LAMP檢測(cè)方法不需要特殊的儀器設(shè)備,可用于副豬嗜血桿菌的鑒定。 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,52(10)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

不同擴(kuò)增引物下的濁度曲線

以H21基因組DNA為模板，以表1中LAMP序列作為引物，分別在60～67℃進(jìn)行反應(yīng)，根據(jù)濁度儀實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的濁度結(jié)果繪制濁度曲線(圖2)。當(dāng)反應(yīng)溫度為64、65、66℃時(shí)，最先發(fā)生擴(kuò)增反應(yīng)。由于64℃時(shí)的擴(kuò)增效率比較高，因此設(shè)定64℃為最佳反應(yīng)溫度。2.3 LAMP方法的特異性檢測(cè)

LAMP特異性試驗(yàn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]副豬嗜血桿菌環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)方法的建立[D]. 魏曉媛.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3505082