廣東部分地區(qū)犬流感血清流行病學(xué)調(diào)查及病毒的分離鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-11-17 12:20
犬流感是由犬流感病毒(Canine influenza virus, CIV)引起的一種高度接觸性、傳染性呼吸道疾病。已經(jīng)證實(shí)有馬源H3N8和禽源H3N2亞型流感病毒可以造成犬的感染,并引起犬的種內(nèi)傳播。犬與人類接觸密切,目前尚不清楚流感病毒是否可以通過犬傳染給人。因此,對(duì)犬流感的流行病學(xué)調(diào)查和病毒的監(jiān)測(cè)具有重要公共衛(wèi)生意義。研究利用血凝抑制試驗(yàn)對(duì)來源于廣東省的309份犬血清樣本進(jìn)行H3亞型流感病毒抗體檢測(cè),總體陽性率為26.21%。對(duì)不同類型、不同區(qū)域的犬抗體陽性率進(jìn)行比較,結(jié)果顯示寵物犬、農(nóng)家犬及流浪犬的抗體陽性率分別為34.02%、9.09%和25.93%,個(gè)別地區(qū)的陽性率超過50%。說明H3亞型犬流感已在犬群中流行,并且與近年的調(diào)查結(jié)果相比呈上升趨勢(shì)。采集廣東地區(qū)29份有呼吸道癥狀犬的鼻拭子,接種雞胚分離病毒,并進(jìn)行亞型鑒定和序列分析。分離獲得2株H3N2亞型犬流感病毒,分別命名為A/canine/Guangdong/12/2012(H3N2)及A/canine/Guangdong/23/2012(H3N2).根據(jù)參考毒株的基因序列設(shè)計(jì)特異性引物,用RT-PCR的方法分別擴(kuò)增兩...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
目錄
摘要
ABSTRACT
縮略語及符號(hào)
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 流感病毒的病原學(xué)特征
1.1 流感病毒的結(jié)構(gòu)與理化特性
1.2 病毒的分類
1.3 增殖特性
1.4 血凝特性
1.5 分子特征
2 犬流感流行病學(xué)研究進(jìn)展
2.1 H3N8亞型犬流感
2.2 H5N1亞型犬流感
2.3 H1N1亞型犬流感
2.4 H3N2亞型犬流感
2.5 其他亞型犬流感
3 犬流感檢測(cè)方法研究進(jìn)展
3.1 血清學(xué)檢測(cè)
3.2 病原學(xué)檢測(cè)
4 犬流感的危害與公共衛(wèi)生意義
參考文獻(xiàn)
第二章 H3亞型犬流感的血清流行病學(xué)調(diào)查
摘要
1 材料與方法
1.1 犬血清樣本的收集
1.2 菌株與血清
1.3 材料
1.4 血清處理
1.5 血凝與血凝抑制試驗(yàn)
2 結(jié)果
2.1 樣品來源與總陽性率
2.2 寵物犬、農(nóng)家犬、流浪犬H3亞型抗體陽性率比較
2.3 不同區(qū)域?qū)櫸锶瓾3亞型CIV抗體檢測(cè)
2.4 不同區(qū)域農(nóng)家散養(yǎng)犬H3亞型CIV抗體檢測(cè)
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
第三章 犬流感病毒的分離鑒定與遺傳演化分析
摘要
1 材料與方法
1.1 樣品與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑與儀器
1.3 引物設(shè)計(jì)與合成
1.4 CIV的分離與鑒定
1.5 全基因序列測(cè)定及遺傳演化關(guān)系分析
2 結(jié)果
2.1 病毒分離與初步鑒定
2.2 病毒RT-PCR鑒定
2.3 基因核苷酸序列分析
2.4 氨基酸序列比對(duì)
2.5 遺傳演化分析
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
第四章 H3N2亞型犬流感病毒NP蛋白的表達(dá)與純化
摘要
1 材料與方法
1.1 病毒株、血清、菌株及載體
1.2 主要試劑
1.3 引物設(shè)計(jì)
1.4 病毒RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
1.5 重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
1.6 NP蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)與純化
2 結(jié)果
2.1 NP基因的擴(kuò)增
2.2 重組質(zhì)粒的酶切鑒定
2.3 重組NP蛋白的SDS-PAGE分析
2.4 Western-blot分析結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
全文總結(jié)
致謝
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]犬流感(H3N2亞型)血清學(xué)調(diào)查[J]. 粟碩,李華濤,陳濟(jì)鐺,黃震,趙付榮,張桂紅,李守軍. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(02)
[2]H3N2亞型犬流感病毒重組HA1蛋白間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 黃柏槐,張敦偉,遠(yuǎn)立國,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(09)
[3]H5N1亞型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[J]. 賀貞,林東子,李觀強(qiáng),馬衛(wèi)列,丁航,張志珍. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(16)
[4]錦州地區(qū)犬流感的血清學(xué)調(diào)查[J]. 楊新艷,于迪,夏冬華,周鐵忠. 畜牧與獸醫(yī). 2012(02)
[5]H3N2亞型犬流感病毒的分離鑒定[J]. 佘利旋,熊永忠,遠(yuǎn)立國,袁天梅,賈坤,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(01)
[6]H5亞型禽流感病毒感染犬、貓的流行病學(xué)調(diào)查[J]. 張端秀,溫清萍,張險(xiǎn)朋,王健青,林偉杰,朱燕秋. 中國畜牧獸醫(yī). 2010(10)
[7]利用真核表達(dá)的豬流感病毒NP蛋白制備其特異性的單克隆抗體[J]. 郭利敏,喬傳玲,陳艷,楊煥良,張健,辛?xí)怨?陳化蘭. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(06)
[8]犬流感病毒RT-LAMP快速檢測(cè)方法的建立[J]. 高曉宇,曹榮峰,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(01)
[9]禽流感病毒神經(jīng)氨酸酶的結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能[J]. 王全英,喬傳玲,申之義. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2005(12)
[10]H5N1和H9N2亞型禽流感病毒型特異性抗原捕捉ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 宋建領(lǐng),張富強(qiáng),胡媛媛,王金萍. 中國獸醫(yī)科技. 2005(11)
本文編號(hào):3500900
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
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摘要
ABSTRACT
縮略語及符號(hào)
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 流感病毒的病原學(xué)特征
1.1 流感病毒的結(jié)構(gòu)與理化特性
1.2 病毒的分類
1.3 增殖特性
1.4 血凝特性
1.5 分子特征
2 犬流感流行病學(xué)研究進(jìn)展
2.1 H3N8亞型犬流感
2.2 H5N1亞型犬流感
2.3 H1N1亞型犬流感
2.4 H3N2亞型犬流感
2.5 其他亞型犬流感
3 犬流感檢測(cè)方法研究進(jìn)展
3.1 血清學(xué)檢測(cè)
3.2 病原學(xué)檢測(cè)
4 犬流感的危害與公共衛(wèi)生意義
參考文獻(xiàn)
第二章 H3亞型犬流感的血清流行病學(xué)調(diào)查
摘要
1 材料與方法
1.1 犬血清樣本的收集
1.2 菌株與血清
1.3 材料
1.4 血清處理
1.5 血凝與血凝抑制試驗(yàn)
2 結(jié)果
2.1 樣品來源與總陽性率
2.2 寵物犬、農(nóng)家犬、流浪犬H3亞型抗體陽性率比較
2.3 不同區(qū)域?qū)櫸锶瓾3亞型CIV抗體檢測(cè)
2.4 不同區(qū)域農(nóng)家散養(yǎng)犬H3亞型CIV抗體檢測(cè)
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
第三章 犬流感病毒的分離鑒定與遺傳演化分析
摘要
1 材料與方法
1.1 樣品與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑與儀器
1.3 引物設(shè)計(jì)與合成
1.4 CIV的分離與鑒定
1.5 全基因序列測(cè)定及遺傳演化關(guān)系分析
2 結(jié)果
2.1 病毒分離與初步鑒定
2.2 病毒RT-PCR鑒定
2.3 基因核苷酸序列分析
2.4 氨基酸序列比對(duì)
2.5 遺傳演化分析
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
第四章 H3N2亞型犬流感病毒NP蛋白的表達(dá)與純化
摘要
1 材料與方法
1.1 病毒株、血清、菌株及載體
1.2 主要試劑
1.3 引物設(shè)計(jì)
1.4 病毒RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
1.5 重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
1.6 NP蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)與純化
2 結(jié)果
2.1 NP基因的擴(kuò)增
2.2 重組質(zhì)粒的酶切鑒定
2.3 重組NP蛋白的SDS-PAGE分析
2.4 Western-blot分析結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
全文總結(jié)
致謝
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]犬流感(H3N2亞型)血清學(xué)調(diào)查[J]. 粟碩,李華濤,陳濟(jì)鐺,黃震,趙付榮,張桂紅,李守軍. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(02)
[2]H3N2亞型犬流感病毒重組HA1蛋白間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 黃柏槐,張敦偉,遠(yuǎn)立國,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(09)
[3]H5N1亞型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[J]. 賀貞,林東子,李觀強(qiáng),馬衛(wèi)列,丁航,張志珍. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(16)
[4]錦州地區(qū)犬流感的血清學(xué)調(diào)查[J]. 楊新艷,于迪,夏冬華,周鐵忠. 畜牧與獸醫(yī). 2012(02)
[5]H3N2亞型犬流感病毒的分離鑒定[J]. 佘利旋,熊永忠,遠(yuǎn)立國,袁天梅,賈坤,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(01)
[6]H5亞型禽流感病毒感染犬、貓的流行病學(xué)調(diào)查[J]. 張端秀,溫清萍,張險(xiǎn)朋,王健青,林偉杰,朱燕秋. 中國畜牧獸醫(yī). 2010(10)
[7]利用真核表達(dá)的豬流感病毒NP蛋白制備其特異性的單克隆抗體[J]. 郭利敏,喬傳玲,陳艷,楊煥良,張健,辛?xí)怨?陳化蘭. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(06)
[8]犬流感病毒RT-LAMP快速檢測(cè)方法的建立[J]. 高曉宇,曹榮峰,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(01)
[9]禽流感病毒神經(jīng)氨酸酶的結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能[J]. 王全英,喬傳玲,申之義. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2005(12)
[10]H5N1和H9N2亞型禽流感病毒型特異性抗原捕捉ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 宋建領(lǐng),張富強(qiáng),胡媛媛,王金萍. 中國獸醫(yī)科技. 2005(11)
本文編號(hào):3500900
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