鴨疫里氏桿菌病是由鴨疫里氏桿菌（Riemerella anatipestifer, RA）引起的目前嚴重危害養(yǎng)鴨業(yè)的重要接觸性傳染病之一,特征是敗血性滲出,臨床剖檢癥狀主要表現(xiàn)為全身漿膜炎性滲出。該病呈世界范圍分布,給世界各國的養(yǎng)鴨業(yè)造成了重大的經(jīng)濟損失。目前把RA分為21個血清型,因為血清型眾多,而各個血清型之間缺乏有效的交叉保護,使用疫苗免疫預防該病困難重重,一旦感染此病,將給鴨場帶來難以估量的損失,因此我們迫切需要安全有效的疫苗來防治此病。使用分子生物學手段,研究鴨疫里氏桿菌的致病和免疫機制,對預防該病具有重大意義。本研究以血清1型鴨疫里氏桿菌云夢株（RA-YM）為親本株,通過構(gòu)建重組自殺性質(zhì)粒,采用結(jié)合轉(zhuǎn)移方法構(gòu)建了RA-YM株的aroA基因缺失株,為后續(xù)研究鴨疫里氏桿菌aroA基因的功能奠定基礎(chǔ)。同時,對本實驗室已構(gòu)建的鴨疫里氏桿菌DPPⅣ缺失株的生物學特性進行了研究。取得的主要研究結(jié)果如下：1鴨疫里氏桿菌DPP Ⅳ缺失株的生物學特性研究經(jīng)生化鑒定,鴨疫里氏桿菌DPP Ⅳ缺失株和親本株的生化特性并無變化。將鴨疫里氏桿菌DPP Ⅳ缺失株和親本株在TSB培養(yǎng)基中培養(yǎng),測定其生長曲... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻綜述
    1 RA病原學研究進展
        1.1 分類地位
        1.2 生物學特性及血清型
        1.3 分子生物學研究進展
    2 RA流行病學研究進展
    3 RA臨床癥狀及診斷方法
        3.1 臨床癥狀
        3.2 診斷方法
    4 RA的防治研究進展
        4.1 藥物防治
        4.2 疫苗防治
    5 細菌突變株構(gòu)建方法的研究進展
        5.1 自然突變
        5.2 人工誘導
        5.3 分子生物學方法
第二章 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ缺失株生物學特性的研究
    1 目的和意義
    2 材料
        2.1 菌株與細胞
        2.2 主要試劑
        2.3 實驗動物
        2.4 主要溶液的配制
        2.5 主要儀器
    3 生物學特性的研究
        3.1 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株生化特性鑒定
        3.2 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株生長曲線的測定
        3.3 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株LD_(50)的測定
        3.4 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株的粘附入侵試驗
    4 結(jié)果分析
        4.1 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株的生化鑒定
        4.2 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株生長曲線的測定
        4.3 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株LD_(50)的測定
        4.4 鴨疫里氏桿菌DPPⅣ基因缺失株的粘附入侵試驗
    5 討論
第三章 鴨疫里氏桿菌aroA基因缺失突變株的構(gòu)建
    1 目的和意義
    2 材料
        2.1 菌株和質(zhì)粒
        2.2 主要分子生物學及生化試劑
        2.3 主要溶液的配制
        2.4 主要儀器設(shè)備
    3 實驗方法
        3.1 RA-YM aroA基因左右臂的克隆與鑒定
        3.2 壯觀霉素抗性基因(Spc)的擴增
        3.3 重組自殺性質(zhì)粒pRE112-LSR的構(gòu)建
        3.4 RA-YM aroA基因缺失菌株的構(gòu)建及其篩選鑒定
        3.5 RA-YM aroA基因缺失株生化特性鑒定
        3.6 RA-YM aroA基因缺失株生長曲線的測定
    4 結(jié)果與分析
        4.1 RA-YM aroA基因左右臂的克隆
        4.2 壯觀霉素抗性基因(Spc)的擴增
        4.3 構(gòu)建重組自殺性質(zhì)粒pRE112-LSR
        4.4 RA-YM aroA基因缺失菌株的篩選和鑒定
        4.5 RA-YM aroA基因缺失株的生化鑒定
        4.6 RA-YM aroA基因缺失株生長曲線的測定
    5 討論
結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鴨疫里默氏菌的gyrA基因的檢測與變異位點的分析[J]. 劉穎,蘇敬良,劉文華.  中國獸醫(yī)雜志. 2007(01)
[2]鴨疫里默氏菌一個可能新型的鑒定[J]. 張大丙,鄭獻進,曲豐發(fā).  中國預防獸醫(yī)學報. 2006(01)
[3]鴨疫里默氏菌16SrDNA基因的PCR-RFLP分析[J]. 曲豐發(fā),張大丙,鄭獻進,郭玉璞.  中國獸醫(yī)雜志. 2005(10)
[4]間接免疫組化法檢測鴨疫里默氏桿菌感染和抗原定位[J]. 劉維平,程安春,汪銘書,陳孝躍,周毅,朱德康,劉菲,孟瓊?cè)A,黃誠,宋涌.  中國獸醫(yī)學報. 2005(04)
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[6]鴨疫里默氏菌的藥物敏感性檢測[J]. 劉穎,蘇敬良,劉文華,李云格.  中國獸醫(yī)雜志. 2005(05)
[7]三肽囊素Bursin對鴨疫里氏桿菌病滅活苗免疫效果的影響[J]. 毛婭卿,翁崇鵬,劉烈發(fā),章振華,諶南輝.  江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2005(02)
[8]鴨疫里默氏菌鋁膠佐劑與鋁膠復合佐劑4價滅活疫苗的比較[J]. 程安春,汪銘書,郭宇飛,方鵬飛,劉兆宇,陳孝躍,周毅.  中國獸醫(yī)學報. 2005(02)
[9]血清10型鴨疫里默氏菌4個亞型的分析[J]. 張大丙.  畜牧獸醫(yī)學報. 2005(02)
[10]鴨疫里默氏桿菌大腸桿菌二聯(lián)蜂膠苗的研制[J]. 呂敏娜,黃承鋒,張毓金.  中國獸醫(yī)雜志. 2005(01)

博士論文
[1]鴨疫里氏桿菌免疫診斷方法及在感染鴨肝臟差異表達基因的研究[D]. 周祖濤.華中農(nóng)業(yè)大學 2009

碩士論文
[1]鴨疫里氏桿菌野生型質(zhì)粒的分離、序列分析和DPP Ⅳ缺失株的構(gòu)建[D]. 彭曉婭.華中農(nóng)業(yè)大學 2011
[2]鴨疫里默氏桿菌特異性單克隆抗體的研制以及生物被膜和OmpA缺失株的研究[D]. 周小進.揚州大學 2010
[3]利用SCOTS技術(shù)篩選鴨疫里氏桿菌體內(nèi)外差異表達的基因[D]. 鄭娟.華中農(nóng)業(yè)大學 2008



本文編號：3499650