食品和飼料中沙門氏菌及動(dòng)物皮毛中炭疽桿菌快速鑒定方法的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-15 15:55
傳統(tǒng)的細(xì)菌系統(tǒng)分類的主要依據(jù)是形態(tài)特征和生理生化性狀,采取的主要方法是對(duì)細(xì)菌進(jìn)行純培養(yǎng),然后從形態(tài)學(xué)、生理生化反應(yīng)特征以及血清學(xué)特性等方面加以鑒定。但在實(shí)踐中,細(xì)菌的分離過程往往出現(xiàn)假陽性的結(jié)果,直到最后的鑒定(生化和血清學(xué)鑒定),而且對(duì)于目前已經(jīng)開發(fā)成熟的鑒定系統(tǒng),如VITEK、BIOLOG,、脂肪酸分析系統(tǒng)等仍然存在無法對(duì)相似菌進(jìn)行鑒定的情況。在沙門氏菌的日常檢測(cè)過程中,經(jīng)常在選擇性培養(yǎng)基中分離到類似于沙門氏菌的細(xì)菌。這些細(xì)菌的分離給后續(xù)確定帶來很大的干擾,不僅造成人力和物力的浪費(fèi),還大大推遲了得到確診結(jié)果的時(shí)間。對(duì)于分離到的可疑沙門氏菌,通常會(huì)進(jìn)行系統(tǒng)的生化鑒定以及血清學(xué)鑒定。生化鑒定可以通過商品化的微生物鑒定系統(tǒng),如VITEK2、BIOLOG和PHOENIX-100,血清學(xué)鑒定則需要昂貴的分型血清逐一進(jìn)行。細(xì)菌的生化鑒定成本高、檢測(cè)周期長(zhǎng)、特異性低。同時(shí)血清型分析在臨床檢測(cè)中存在假陽性的缺點(diǎn),而且也是個(gè)耗時(shí)、費(fèi)力的工作。因此,迫切需要改良并開發(fā)新的方法來彌補(bǔ)傳統(tǒng)鑒定方法的不足。在炭疽桿菌的檢測(cè)過程中,假陽性的反應(yīng)經(jīng)常出現(xiàn),一些常見的芽胞桿菌是引起假陽性的真正原因。這些細(xì)菌包括蘇...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
單聚體Ig分子和源自抗體的生物活性物質(zhì)
Colony numbers43 16 0 0圖3-1 梯度(4%~20%)SDS-PAGE檢測(cè)多克隆抗體的純度Fig.3-1 Purity inspection by gradient (4%-20%) SDS-PAGE for polyclonal antibody32
3.2.4 銅綠假單胞菌抗體的體外特異性抑菌試驗(yàn)用SEM分析銅綠假單胞菌抗體與銅綠假單胞菌共同孵育后的培養(yǎng)物,結(jié)果見圖3-2。在共同孵育10min后,抗體開始攻擊菌體。同時(shí),該抗體對(duì)其他銅綠假單胞菌也有抑制作用。交叉反應(yīng)顯示,制備的銅綠假單胞菌多克隆抗體對(duì)陰溝腸桿菌無抑制作用,見圖3-3。圖3-2 銅綠假單胞菌抗體在體外特異性抑菌作用A.無抗體加入的營養(yǎng)肉湯中的銅綠假單胞菌;B.抗體作用后5min的銅綠假單胞菌;C.抗體作用后10min的銅綠假單胞菌,此時(shí)菌體開始膨脹,有的已經(jīng)開始裂解;D、E和F: 抗體作用后20min、40min、80min的銅綠假單胞菌,菌體全部裂解并形成明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。Fig.3-2 The antimicrobial effect of the antibody against P.aeruginosa as evaluated by SEMA. P.aeruginosa incubated with 0.85% NaCl without antibody added for 2h at 37℃.B. P.aeruginosa treated with antibody for 5 min at 37℃.C. P.aeruginosa treated with antibody for 10 min at 37℃. The cells indicated by the arrow becameswollen and were destroyed.D, E and F. P.aeruginosa treated with antibody for 20, 40, and 80 min
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于PCR技術(shù)的番鴨細(xì)小病毒和沙門氏菌混合感染診斷[J]. 米朝勇,水超,陳彬. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(03)
[2]加環(huán)引物L(fēng)AMP法快速檢測(cè)沙門氏菌方法的研究[J]. 李雪,唐善虎,郝小倩,岑璐伽. 西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(01)
[3]動(dòng)物飼料中沙門氏菌環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)快速診斷方法的建立[J]. 孫園園,趙鵬. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[4]不同沙門氏菌及干擾菌的分離鑒定[J]. 王志偉. 食品研究與開發(fā). 2012(01)
[5]LAMP技術(shù)快速檢測(cè)沙門氏菌方法的建立及其應(yīng)用[J]. 田楨干,閻俊,陸曄,王婷,章琪,張勝萍,王傳貴. 中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2011(05)
[6]飼料中沙門氏菌的分離鑒定與Dot-ELISA檢測(cè)[J]. 韓志輝,張紅見. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(26)
[7]檢測(cè)雞蛋中沙門氏菌的LAMP方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 唐夢(mèng)君,周生,張小燕,顧榮,蒲俊華,葛慶聯(lián),高玉時(shí). 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[8]銅綠假單胞菌抗體制備及抑菌作用[J]. 陳煜,楊燕凌,謝小芳,肖西志. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(08)
[9]原位熒光LAMP技術(shù)檢測(cè)食源性沙門氏菌[J]. 葉宇鑫,李琳,山崎伸二,石磊. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2009(03)
[10]沙門氏菌PCR快速檢測(cè)技術(shù)研究[J]. 陳曉玲,周玲艷,溫仕杰,謝振文. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(03)
本文編號(hào):3497084
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
單聚體Ig分子和源自抗體的生物活性物質(zhì)
Colony numbers43 16 0 0圖3-1 梯度(4%~20%)SDS-PAGE檢測(cè)多克隆抗體的純度Fig.3-1 Purity inspection by gradient (4%-20%) SDS-PAGE for polyclonal antibody32
3.2.4 銅綠假單胞菌抗體的體外特異性抑菌試驗(yàn)用SEM分析銅綠假單胞菌抗體與銅綠假單胞菌共同孵育后的培養(yǎng)物,結(jié)果見圖3-2。在共同孵育10min后,抗體開始攻擊菌體。同時(shí),該抗體對(duì)其他銅綠假單胞菌也有抑制作用。交叉反應(yīng)顯示,制備的銅綠假單胞菌多克隆抗體對(duì)陰溝腸桿菌無抑制作用,見圖3-3。圖3-2 銅綠假單胞菌抗體在體外特異性抑菌作用A.無抗體加入的營養(yǎng)肉湯中的銅綠假單胞菌;B.抗體作用后5min的銅綠假單胞菌;C.抗體作用后10min的銅綠假單胞菌,此時(shí)菌體開始膨脹,有的已經(jīng)開始裂解;D、E和F: 抗體作用后20min、40min、80min的銅綠假單胞菌,菌體全部裂解并形成明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。Fig.3-2 The antimicrobial effect of the antibody against P.aeruginosa as evaluated by SEMA. P.aeruginosa incubated with 0.85% NaCl without antibody added for 2h at 37℃.B. P.aeruginosa treated with antibody for 5 min at 37℃.C. P.aeruginosa treated with antibody for 10 min at 37℃. The cells indicated by the arrow becameswollen and were destroyed.D, E and F. P.aeruginosa treated with antibody for 20, 40, and 80 min
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于PCR技術(shù)的番鴨細(xì)小病毒和沙門氏菌混合感染診斷[J]. 米朝勇,水超,陳彬. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(03)
[2]加環(huán)引物L(fēng)AMP法快速檢測(cè)沙門氏菌方法的研究[J]. 李雪,唐善虎,郝小倩,岑璐伽. 西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(01)
[3]動(dòng)物飼料中沙門氏菌環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)快速診斷方法的建立[J]. 孫園園,趙鵬. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[4]不同沙門氏菌及干擾菌的分離鑒定[J]. 王志偉. 食品研究與開發(fā). 2012(01)
[5]LAMP技術(shù)快速檢測(cè)沙門氏菌方法的建立及其應(yīng)用[J]. 田楨干,閻俊,陸曄,王婷,章琪,張勝萍,王傳貴. 中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2011(05)
[6]飼料中沙門氏菌的分離鑒定與Dot-ELISA檢測(cè)[J]. 韓志輝,張紅見. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(26)
[7]檢測(cè)雞蛋中沙門氏菌的LAMP方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 唐夢(mèng)君,周生,張小燕,顧榮,蒲俊華,葛慶聯(lián),高玉時(shí). 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[8]銅綠假單胞菌抗體制備及抑菌作用[J]. 陳煜,楊燕凌,謝小芳,肖西志. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(08)
[9]原位熒光LAMP技術(shù)檢測(cè)食源性沙門氏菌[J]. 葉宇鑫,李琳,山崎伸二,石磊. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2009(03)
[10]沙門氏菌PCR快速檢測(cè)技術(shù)研究[J]. 陳曉玲,周玲艷,溫仕杰,謝振文. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(03)
本文編號(hào):3497084
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