抑制素在牛體外有腔卵泡中的表達(dá)規(guī)律及其對牛卵泡顆粒細(xì)胞增殖的影響
發(fā)布時間:2021-11-14 12:07
抑制素A能通過垂體-性腺軸負(fù)反饋調(diào)節(jié)垂體合成和分泌的促卵泡素(Follicle-stimulating Hormone,FSH),進(jìn)而調(diào)節(jié)卵泡的發(fā)育。因此,抑制素在調(diào)控卵泡發(fā)育、生殖激素合成與分泌以及調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖等方面具有重要調(diào)控作用。以往關(guān)于抑制素的研究主要集中在抑制素對FSH分泌的調(diào)節(jié)作用,但是外源FSH處理對牛卵巢抑制素合成和分泌的影響尚不清楚。因此,本試驗一通過牛體外有腔卵泡培養(yǎng)模型,研究不同直徑卵泡中抑制素基因的表達(dá)規(guī)律以及不同濃度梯度FSH處理對牛卵巢抑制素合成和分泌的影響。此外,曾有研究報道,抑制素在調(diào)節(jié)豬卵泡顆粒細(xì)胞增殖方面也發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,但是抑制素對牛卵泡顆粒細(xì)胞增殖的作用尚不清楚。因此,試驗二通過不同濃度梯度抑制素A體外處理牛卵泡顆粒細(xì)胞,研究其對顆粒細(xì)胞增殖的影響。試驗研究內(nèi)容和結(jié)果如下:試驗按照卵泡直徑分離獲得屠宰場卵巢的大中。9-11、5-8、≤4 mm)有腔卵泡,體外采集其顆粒細(xì)胞和卵泡液,分別通過熒光定量PCR和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測了不同直徑卵泡顆粒細(xì)胞中抑制素基因的表達(dá)水平和卵泡液中促性腺激素(FSH和LH)的濃度。熒光定量PCR...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
抑制素的分子結(jié)構(gòu)
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論2圖1-1抑制素的分子結(jié)構(gòu)Fig.1-1Subunitsofinhibin1.2.2抑制素與雌性動物生殖生理1.2.2.1抑制素與激素分泌(1)對Activin的影響ACT、INH和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bonemorphogeneticprotein,BMP)(TAKEDAetal.,2007)均屬于TGF-β超家族,其中ACT和INH共用同結(jié)構(gòu)的β亞基。研究發(fā)現(xiàn),ACT的合成與分泌受INH等多種內(nèi)源性抑制劑的調(diào)節(jié)(DEKRETSERetal.,2002),INH可競爭性結(jié)合β亞基,從而調(diào)節(jié)ACT的合成與分泌(WIJAYARATHNAandKRETSER,2016)。(2)對FSH合成的影響FSH合成與分泌的主要調(diào)節(jié)方式包括兩種:一是通過下丘腦促性腺激素釋放激素(GnRH),進(jìn)而引起腺垂體促性腺激素的節(jié)律性釋放。二是性腺激素的調(diào)節(jié),性腺除了產(chǎn)生雄激素、雌激素和孕激素等類固醇激素參與生殖功能的調(diào)節(jié)外,還發(fā)現(xiàn)了INH、卵泡抑素(Follistatin)、ACT等激素。(EZRAandWYLIE,2003;BERNARDetal.,2001)。抑制素是由卵巢顆粒細(xì)胞產(chǎn)生的信號分子,通過垂體-性腺軸負(fù)反饋調(diào)節(jié)FSH的分泌(圖1-2)。抑制素通過與ACT競爭性結(jié)合ACTII型受體(ACTRII)減弱ACT的作用效果,從而降低ACT對垂體FSH合成與分泌的正反饋調(diào)節(jié)的影響(Mathews,1994;FRANCESCAetal.,2018),達(dá)到負(fù)向調(diào)節(jié)FSH分泌的效果。此外,F(xiàn)SH也能結(jié)合ACT,通過阻止ACT與ACTRII的結(jié)合而使ACT失活,從而間接抑制FSH的合成和分泌(YANetal.,2015)。圖1-2下丘腦-垂體-性腺軸的抑制素調(diào)節(jié)Fig.1-2Inhibinregulationofthehypothalamo-pituitary-gonadalaxis
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論31.2.2.2抑制素與卵泡發(fā)育大多數(shù)動物(包括人類)在胎兒時期的一定時間內(nèi)就已經(jīng)完成卵原細(xì)胞增殖和原始卵泡的儲備。出生后,每頭牛的卵巢共含原始卵泡大約150000枚,形成原始卵泡庫。每枚原始卵泡均由一枚初級卵母細(xì)胞和一層扁平的顆粒細(xì)胞組成(圖1-3)。在雌性家畜的生殖(繁殖)時期,卵泡生長動態(tài)的特征是一群原始卵泡從原始卵泡庫中被募集進(jìn)入生長卵泡庫,然后生長發(fā)育,最終得以成熟排卵或閉鎖退化。圖1-3卵巢卵泡池及其封閉的卵母細(xì)胞對熱應(yīng)激的抵抗力/敏感度隨階段變化(引自ROTH,2017)Fig.1-3Astage-dependentpatternofresistance/sensitivityoftheovarianpooloffolliclesandtheirenclosedoocytestoheatstress牛卵巢上原始卵泡發(fā)育到排卵卵泡需要大約180天的時間。原始卵泡發(fā)育到排卵前階段大概經(jīng)歷三個階段(ORISAKAetal.,2009;CAMPBELL,2009)。第一階段,即卵泡的募集階段。該階段為非促性腺激素依賴性階段(KIM,2012;NILSSONandSKINNER,2009)。第二階段,隨著原始卵泡的募集和發(fā)育,卵泡直徑從200μm增長到1mm,并開始形成初級卵泡,初級卵泡包含的卵母細(xì)胞直徑約80μm。在此階段大量增殖的卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞也表達(dá)FSH受體(FSHR)和黃體生成素(LH)受體(LHR)。第三階段,優(yōu)勢化階段。卵泡繼續(xù)發(fā)育,卵泡腔繼續(xù)增大并充滿卵泡液,卵泡直徑達(dá)1.5-2mm,卵母細(xì)胞也生長至直徑80-110μm(ORISAKAetal.,2009;CORTVRINDTandSMIZ,2001)。在此階段,顆粒細(xì)胞分化形成壁層和竇層顆粒層,卵丘細(xì)胞包圍卵母細(xì)胞。研究表明,卵泡內(nèi)INHA的濃度只占INHB總量的一小部分,并且在卵泡選擇后才開始上升(圖1-5)。抑制素A由發(fā)育中的卵泡分泌,其濃度通常反映卵泡的發(fā)育能力,特別是在?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]單側(cè)隱睪對患兒血清抗苗勒管激素及抑制素B水平的影響研究[J]. 曹順順,單小鷗,胡楊楊. 中華男科學(xué)雜志. 2016(09)
[2]抑制素基因的研究進(jìn)展[J]. 薛昱,儲明星,周忠孝. 遺傳. 2004(05)
碩士論文
[1]抑制素被動免疫對羊生殖激素及卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響[D]. 陳守云.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3494609
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
抑制素的分子結(jié)構(gòu)
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論2圖1-1抑制素的分子結(jié)構(gòu)Fig.1-1Subunitsofinhibin1.2.2抑制素與雌性動物生殖生理1.2.2.1抑制素與激素分泌(1)對Activin的影響ACT、INH和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bonemorphogeneticprotein,BMP)(TAKEDAetal.,2007)均屬于TGF-β超家族,其中ACT和INH共用同結(jié)構(gòu)的β亞基。研究發(fā)現(xiàn),ACT的合成與分泌受INH等多種內(nèi)源性抑制劑的調(diào)節(jié)(DEKRETSERetal.,2002),INH可競爭性結(jié)合β亞基,從而調(diào)節(jié)ACT的合成與分泌(WIJAYARATHNAandKRETSER,2016)。(2)對FSH合成的影響FSH合成與分泌的主要調(diào)節(jié)方式包括兩種:一是通過下丘腦促性腺激素釋放激素(GnRH),進(jìn)而引起腺垂體促性腺激素的節(jié)律性釋放。二是性腺激素的調(diào)節(jié),性腺除了產(chǎn)生雄激素、雌激素和孕激素等類固醇激素參與生殖功能的調(diào)節(jié)外,還發(fā)現(xiàn)了INH、卵泡抑素(Follistatin)、ACT等激素。(EZRAandWYLIE,2003;BERNARDetal.,2001)。抑制素是由卵巢顆粒細(xì)胞產(chǎn)生的信號分子,通過垂體-性腺軸負(fù)反饋調(diào)節(jié)FSH的分泌(圖1-2)。抑制素通過與ACT競爭性結(jié)合ACTII型受體(ACTRII)減弱ACT的作用效果,從而降低ACT對垂體FSH合成與分泌的正反饋調(diào)節(jié)的影響(Mathews,1994;FRANCESCAetal.,2018),達(dá)到負(fù)向調(diào)節(jié)FSH分泌的效果。此外,F(xiàn)SH也能結(jié)合ACT,通過阻止ACT與ACTRII的結(jié)合而使ACT失活,從而間接抑制FSH的合成和分泌(YANetal.,2015)。圖1-2下丘腦-垂體-性腺軸的抑制素調(diào)節(jié)Fig.1-2Inhibinregulationofthehypothalamo-pituitary-gonadalaxis
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論31.2.2.2抑制素與卵泡發(fā)育大多數(shù)動物(包括人類)在胎兒時期的一定時間內(nèi)就已經(jīng)完成卵原細(xì)胞增殖和原始卵泡的儲備。出生后,每頭牛的卵巢共含原始卵泡大約150000枚,形成原始卵泡庫。每枚原始卵泡均由一枚初級卵母細(xì)胞和一層扁平的顆粒細(xì)胞組成(圖1-3)。在雌性家畜的生殖(繁殖)時期,卵泡生長動態(tài)的特征是一群原始卵泡從原始卵泡庫中被募集進(jìn)入生長卵泡庫,然后生長發(fā)育,最終得以成熟排卵或閉鎖退化。圖1-3卵巢卵泡池及其封閉的卵母細(xì)胞對熱應(yīng)激的抵抗力/敏感度隨階段變化(引自ROTH,2017)Fig.1-3Astage-dependentpatternofresistance/sensitivityoftheovarianpooloffolliclesandtheirenclosedoocytestoheatstress牛卵巢上原始卵泡發(fā)育到排卵卵泡需要大約180天的時間。原始卵泡發(fā)育到排卵前階段大概經(jīng)歷三個階段(ORISAKAetal.,2009;CAMPBELL,2009)。第一階段,即卵泡的募集階段。該階段為非促性腺激素依賴性階段(KIM,2012;NILSSONandSKINNER,2009)。第二階段,隨著原始卵泡的募集和發(fā)育,卵泡直徑從200μm增長到1mm,并開始形成初級卵泡,初級卵泡包含的卵母細(xì)胞直徑約80μm。在此階段大量增殖的卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞也表達(dá)FSH受體(FSHR)和黃體生成素(LH)受體(LHR)。第三階段,優(yōu)勢化階段。卵泡繼續(xù)發(fā)育,卵泡腔繼續(xù)增大并充滿卵泡液,卵泡直徑達(dá)1.5-2mm,卵母細(xì)胞也生長至直徑80-110μm(ORISAKAetal.,2009;CORTVRINDTandSMIZ,2001)。在此階段,顆粒細(xì)胞分化形成壁層和竇層顆粒層,卵丘細(xì)胞包圍卵母細(xì)胞。研究表明,卵泡內(nèi)INHA的濃度只占INHB總量的一小部分,并且在卵泡選擇后才開始上升(圖1-5)。抑制素A由發(fā)育中的卵泡分泌,其濃度通常反映卵泡的發(fā)育能力,特別是在?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]單側(cè)隱睪對患兒血清抗苗勒管激素及抑制素B水平的影響研究[J]. 曹順順,單小鷗,胡楊楊. 中華男科學(xué)雜志. 2016(09)
[2]抑制素基因的研究進(jìn)展[J]. 薛昱,儲明星,周忠孝. 遺傳. 2004(05)
碩士論文
[1]抑制素被動免疫對羊生殖激素及卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響[D]. 陳守云.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3494609
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