為研究納米氧化鋅（nano-ZnO）對奶牛小腸上皮細(xì)胞（BIECs）增殖及凋亡的影響,本實(shí)驗(yàn)選取初生犢牛P3代十二指腸上皮細(xì)胞為試驗(yàn)對象,向培養(yǎng)基中添加0（對照）、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8μg/mL不同濃度的nano-ZnO培養(yǎng)12 h后,通過倒置顯微鏡、CCK-8法檢測細(xì)胞的生長狀態(tài)和增殖活性;微量法檢測LDH漏出量;DAPI熒光染色結(jié)合Image J圖像測定分析nano-ZnO對BIECs凋亡的影響;實(shí)時(shí)熒光定量PCR對細(xì)胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA的表達(dá)進(jìn)行測定。結(jié)果顯示,與對照組相比,nano-ZnO低劑量各組（0.2、0.4、0.8μg/m L）細(xì)胞生長狀態(tài)良好,核型正常,增殖活性增加,凋亡率無明顯差異（P>0.05）,LDH漏出量無差異（P>0.05）;高劑量各組（1.6、3.2、6.4、12.8μg/m L）細(xì)胞皺縮變圓,密度減小,細(xì)胞核致密濃染、裂解,細(xì)胞增殖活性降低（P<0.05）,凋亡率明顯升高（P<0.05）,LDH漏出量明顯增加（P<... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

nano-ZnO各組細(xì)胞的增殖率和凋亡率

中國獸醫(yī)科學(xué)第50卷圖3DAPI染色檢測不同劑量nano-ZnO對BIECs細(xì)胞核形態(tài)的影響Figure3DAPIstainingtodetecttheeffectofdifferentdosesofnano-ZnOonnuclearmorphologyofBIECscellsa：0g/mL；b：0.2g/mL；c：0.4g/mL；d：0.8g/mL；e：1.6g/mL；f：3.2g/mL；g：6.4g/mL；h：12.8g/mL.圖2不同濃度nano-ZnO對BIECs生長形態(tài)的影響Figure2Effectsofdifferentdosesofnano-ZnOonthegrowthmorphologyofBIECsa：0g/mL；b：0.2g/mL；c：0.4g/mL；d：0.8g/mL；e：1.6g/mL；f：3.2g/mL；g：6.4g/mL；h：12.8g/mL.圖1原代奶牛小腸上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)Figure1IsolationandcultureofprimarysmallintestinalepithelialcellsinBovine2.3nano-ZnO對小腸上皮細(xì)胞核形態(tài)的影響如圖3所示，nano-ZnO濃度小于0.8g/mL各組細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)沒有明顯變化，且細(xì)胞核呈均勻淡染，形狀規(guī)則，細(xì)胞密度較大；nano-ZnO濃度在1.6g/mL組的細(xì)胞出現(xiàn)染色質(zhì)凝聚和凋亡小體等現(xiàn)象；nano-ZnO濃度大于3.2g/mL的各組細(xì)胞出現(xiàn)大量凋亡小體和不規(guī)則形態(tài)核碎片，且細(xì)胞密度明顯減少。800

中國獸醫(yī)科學(xué)第50卷圖3DAPI染色檢測不同劑量nano-ZnO對BIECs細(xì)胞核形態(tài)的影響Figure3DAPIstainingtodetecttheeffectofdifferentdosesofnano-ZnOonnuclearmorphologyofBIECscellsa：0g/mL；b：0.2g/mL；c：0.4g/mL；d：0.8g/mL；e：1.6g/mL；f：3.2g/mL；g：6.4g/mL；h：12.8g/mL.圖2不同濃度nano-ZnO對BIECs生長形態(tài)的影響Figure2Effectsofdifferentdosesofnano-ZnOonthegrowthmorphologyofBIECsa：0g/mL；b：0.2g/mL；c：0.4g/mL；d：0.8g/mL；e：1.6g/mL；f：3.2g/mL；g：6.4g/mL；h：12.8g/mL.圖1原代奶牛小腸上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)Figure1IsolationandcultureofprimarysmallintestinalepithelialcellsinBovine2.3nano-ZnO對小腸上皮細(xì)胞核形態(tài)的影響如圖3所示，nano-ZnO濃度小于0.8g/mL各組細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)沒有明顯變化，且細(xì)胞核呈均勻淡染，形狀規(guī)則，細(xì)胞密度較大；nano-ZnO濃度在1.6g/mL組的細(xì)胞出現(xiàn)染色質(zhì)凝聚和凋亡小體等現(xiàn)象；nano-ZnO濃度大于3.2g/mL的各組細(xì)胞出現(xiàn)大量凋亡小體和不規(guī)則形態(tài)核碎片，且細(xì)胞密度明顯減少。800

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腸黏膜屏障與腸道菌群的相互關(guān)系[J]. 黃艷芬,劉湘紅,伍浩,徐美華.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2019(12)
[2]納米氧化鋅對小膠質(zhì)瘤BV2細(xì)胞炎癥因子及p38MAPK蛋白磷酸化的影響[J]. 梁曉瑜,張小強(qiáng),張妍,劉靜,王旭.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2018(05)
[3]鉤藤總生物堿對HepG2細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機(jī)制研究[J]. 黃寶媛,曾常青,曾宇,楊再剛.  中藥材. 2017(03)
[4]腸道隱窩-絨毛軸上皮細(xì)胞更新及調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 鄒立軍,熊霞,王小城,楊煥勝,李建中,黃鵬飛,印遇龍.  中國科學(xué):生命科學(xué). 2017(02)
[5]納米氧化鋅對HEK293細(xì)胞的毒性作用研究[J]. 陳玉瑩,韓宏巖.  生物學(xué)雜志. 2016(01)
[6]動物腸道營養(yǎng)物質(zhì)吸收的研究方法進(jìn)展[J]. 劉飛飛,秦貴信,孫澤威,王濤,于文雅,張琳,孫喆,袁志杰.  中國畜牧雜志. 2015(09)
[7]納米氧化鋅對斷奶仔豬生長、腹瀉、腸道微生物和通透性的影響[J]. 游兆彤,胡彩虹,宋娟,欒兆雙.  中國畜牧雜志. 2012(21)
[8]納米氧化鋅對人正常肝細(xì)胞DNA及染色體的損傷作用[J]. 關(guān)榮發(fā),陳瀟婷,芮昶,蔣家新,劉明啟,劉光富.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2012(02)
[9]線粒體損傷在阿維菌素致體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 崔雅莉,王敏,黃蔚,關(guān)麗萍,李術(shù).  中國獸醫(yī)科學(xué). 2007(11)
[10]鎘對小鼠生精細(xì)胞凋亡及bax和bcl-2基因表達(dá)的影響[J]. 張明,袁慧.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2007(03)

碩士論文
[1]納米氧化鋅對小鼠腸上皮細(xì)胞能量蛋白代謝的影響及氧化損傷的保護(hù)作用[D]. 艾大偉.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]納米氧化鋅對小鼠十二指腸和空腸上皮細(xì)胞生長和抗氧化功能的影響[D]. 馮夢.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3494539