牛分子標(biāo)記輔助育種的前提是找到對(duì)生長(zhǎng)性狀有顯著影響的基因或分子標(biāo)記。翼螺旋轉(zhuǎn)錄因子FOXA2是調(diào)節(jié)組織發(fā)育、胰腺分泌、糖脂代謝及脂肪分化的重要轉(zhuǎn)錄因子。目前，尚未見該基因在牛上的研究報(bào)道。因此，本試驗(yàn)利用熒光定量PCR首先在mRNA水平上考察了不同發(fā)育階段的秦川牛和不同營(yíng)養(yǎng)水平肥育的中國(guó)荷斯坦牛FOXA2基因的組織表達(dá)規(guī)律，探索FOXA2基因?qū)εＩL(zhǎng)發(fā)育的影響，再利用DNA池測(cè)序和PCR-RFLP等方法在群體水平上研究了FOXA2基因在秦川牛、南陽牛、郟縣紅牛、德南牛和夏郟牛中的遺傳變異，并分析了該基因4個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的遺傳多樣性及其與5個(gè)黃牛群體的生長(zhǎng)性狀之間的關(guān)聯(lián)性，以期發(fā)現(xiàn)對(duì)黃牛生長(zhǎng)發(fā)育影響顯著的分子標(biāo)記，為今后黃牛分子標(biāo)記輔助選擇、培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的新品系提供科學(xué)依據(jù)。本研究獲得以下結(jié)果：（1）秦川牛FOXA2基因在不同發(fā)育階段的組織表達(dá)譜分析FOXA2基因在秦川牛3個(gè)發(fā)育階段（胎牛、新生犢牛、成年牛）9個(gè)組織中的相對(duì)定量結(jié)果顯示，F(xiàn)OXA2的表達(dá)受組織特異性和時(shí)間特異性的影響。FOXA2基因在同一時(shí)期各組織間差異表達(dá)，在三個(gè)時(shí)期的肝臟中其表達(dá)量均很高，在胎牛和犢牛的肺臟中表達(dá)豐度最高... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

組織總RNA瓊脂糖電泳圖

圖 2-1 組織總 RNA 瓊脂糖電泳圖Fig. 2-1 The electrophoresis result of total RNA in tissues注：M 代表 marker 2000，1,2,3 代表 RNA 泳道。Note: M represents marker 2000, 1,2,3 represents RNA lanes.2.2.2 cDNA 質(zhì)量及 qRT-PCR 引物特異性檢測(cè)結(jié)果以反轉(zhuǎn)錄所得 cDNA 為模板，以跨外顯子的引物擴(kuò)增持家基因 GAPDH，經(jīng) 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果如圖 2-2a，僅出現(xiàn)一條 145 bp 的目的片段，與預(yù)期結(jié)果一致，說明 cDNA 沒有受到基因組 DNA 的污染；經(jīng) qRT-PCR 結(jié)果顯示的溶解曲線峰圖 2-2b顯示，目的基因 FOXA2 和內(nèi)參基因 GAPDH 的溶解曲線各均只出現(xiàn)了一個(gè)單峰，表明引物特異性好，可進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

2.2.3 FOXA2 基因在秦川牛中的組織表達(dá)譜2.2.3.1 秦川牛 FOXA2 基因在胎牛時(shí)期的組織表達(dá)譜秦川牛胎牛時(shí)期的 8 個(gè)不同組織中 FOXA2 基因的相對(duì)表達(dá)量結(jié)果如圖 2-3 所示，在所檢測(cè)的組織中，肺臟的 FOXA2 基因表達(dá)豐度最高（P<0.01），且肝臟和肺臟兩個(gè)組織的 FOXA2 基因表達(dá)量均極顯著高于其他組織（P<0.01），胃和小腸中也表達(dá)，脾臟、腎臟和肌肉低量表達(dá)或不表達(dá)，提示 FOXA2 基因可能在秦川牛胚胎時(shí)期與肺臟和肝臟發(fā)育緊密相關(guān)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3492543