森林革蜱（Dermacentor silvarum）是一種重要的體外寄生蟲，廣泛分布于中國(guó)北方、俄羅斯和蒙古國(guó)等地，種群數(shù)量大且傳播森林腦炎和馬巴貝蟲等疾病，并能經(jīng)卵傳遞森林腦炎病毒。4D8最早是在肩突硬蜱（Ixodes scapularis）中發(fā)現(xiàn)的，是一個(gè)蜱保護(hù)性抗原，之后從6個(gè)屬的10種硬蜱中克隆得到，它們的核酸和氨基酸序列在這些蜱種中保守，分別有65–98和60–98%的一致性。4D8基因通過RNAi技術(shù)沉默后，通過重組蜱4D8的免疫實(shí)驗(yàn)證明它能通過降低蜱類的存活率和繁殖率來保護(hù)宿主免受蜱的侵?jǐn)_。這些研究結(jié)果又在微小扇頭蜱（Boophilus microplus）、美洲花蜱（Amblyomma americanum）、血紅扇頭蜱（Rhinpicephalus sanguineus）、變異革蜱（Dermacentor variabilis）等多個(gè)物種中得以證實(shí)。因此，4D8是一種理想的疫苗候選抗原，可用于防治多種蜱類并能作用于該基因的同源直系基因產(chǎn)物。本研究以森林革蜱為研究對(duì)象。首先通過液氮研磨法提取森林革蜱饑餓雌性成蜱總RNA，將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA，根據(jù)GenBank中的蜱4D... 

【文章來源】：河北師范大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 蜱類簡(jiǎn)介
    1.2 森林革蜱生物學(xué)特性
        1.2.1 森林革蜱分布
        1.2.2 森林革蜱的危害
        1.2.3 森林革蜱生活史
    1.3 蜱的免疫學(xué)研究進(jìn)展
        1.3.1 宿主對(duì)蜱自然感染的免疫反應(yīng)
        1.3.2 蜱類主要防治方法
        1.3.3 微小扇頭蜱保護(hù)性抗原 Bm86 研究進(jìn)展
        1.3.4 其他保護(hù)性抗原研究進(jìn)展
    1.4 4D8 研究進(jìn)展
        1.4.1 4D8 基因的發(fā)現(xiàn)
        1.4.2 4D8 的命名
        1.4.3 節(jié)肢動(dòng)物 subolesin/akirin 進(jìn)化和功能
        1.4.4 在節(jié)肢動(dòng)物載體侵染和病原體傳播中 subolesin/akirin 的免疫效果
        1.4.5 蜱中 4D8 的定位及其作用
    1.5 展望
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 蜱種、菌種和載體
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 儀器與設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 森林革蜱 4D8 基因的引物設(shè)計(jì)
        2.2.2 4D8 cDNA 序列的獲得及克隆的構(gòu)建
        2.2.3 表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定
        2.2.4 重組質(zhì)粒的誘導(dǎo)表達(dá)
        2.2.5 表達(dá)產(chǎn)物的純化
        2.2.6 表達(dá)產(chǎn)物的 Western blot 分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 目的基因 4D8 的獲得
    3.2 重組克隆的 PCR 鑒定
    3.3 重組質(zhì)粒的測(cè)序鑒定及序列分析
        3.3.1 森林革蜱 4D8 基因的核苷酸序列及其推導(dǎo)的氨基酸序列
        3.3.2 不同蜱種間 4D8 蛋白序列比對(duì)
        3.3.3 不同蜱種間 4D8 序列的系統(tǒng)發(fā)育和進(jìn)化關(guān)系
    3.4 目的基因 4D8 的擴(kuò)增
    3.5 重組克隆的 PCR 鑒定
    3.6 4D8 重組蛋白的原核表達(dá)
    3.7 4D8 表達(dá)產(chǎn)物的 Western blot 檢測(cè)
4 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果清單


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宿主對(duì)蜱免疫的研究進(jìn)展[J]. 薄新文,汪明.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 1998(10)
[2]我國(guó)異扇蜱屬一新種（蜱螨目:硬蜱科）[J]. 鄧國(guó)藩,黃重安.  昆蟲學(xué)報(bào). 1981(01)

博士論文
[1]森林革蜱種群生態(tài)及希伯來花蜱卵蠟層抑菌分子研究[D]. 于志軍.河北師范大學(xué) 2011

碩士論文
[1]青海血蜱生活史及不同發(fā)育階段蛋白分析[D]. 袁改玲.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號(hào)：3489285