山羊傳染性胸膜肺炎（Contagious caprine pleuropneumoniae,CCPP）是山羊支原體山羊肺炎亞種（Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp）引起的一種纖維素性肺炎,發(fā)病率為22%³0%,有的高達(dá)60%⁸0%,死亡率為15%³0%,給山羊養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了極大的威脅。目前有關(guān)該病研究主要集中在病原的分離鑒定和流行病學(xué)調(diào)查,其免疫致病機(jī)制研究較少。本試驗(yàn)采集臨床疑似CCPP病羊的鼻拭子,經(jīng)PCR確診后,對(duì)病原進(jìn)行分離培養(yǎng)、分子生物學(xué)方法鑒定、動(dòng)物回歸試驗(yàn);用分離鑒定的CCPP病原,通過氣管內(nèi)接種構(gòu)建CCPP模型,檢測(cè)PBMCs、肺臟中IL-17及其相關(guān)細(xì)胞因子、免疫細(xì)胞的變化;通過Mccp菌體全蛋白體外刺激PBMCs和肺來(lái)源細(xì)胞,在mRNA水平檢測(cè)IL-17及其相關(guān)細(xì)胞因子的變化;通過rIL-17刺激山羊肺上皮細(xì)胞,在mRNA水平檢測(cè)趨化因子的變化。研究獲得如下結(jié)果:1.分離純化菌株在固體平板上,呈現(xiàn)中心臍、邊緣光滑、油煎蛋狀樣;生化試驗(yàn)均符合山... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 山羊傳染性胸膜肺炎的研究進(jìn)展
        1.1.1 山羊傳染性胸膜肺炎病原學(xué)研究
        1.1.2 流行病學(xué)與臨床癥狀
        1.1.3 病理變化和致病機(jī)理
        1.1.4 分離鑒定
        1.1.5 防治措施
    1.2 IL-17 和肺部炎癥的研究進(jìn)展
        1.2.1 IL-17 來(lái)源
        1.2.2 IL-17 家族和IL-17 受體家族
        1.2.3 IL-17 受體信號(hào)
        1.2.4 IL-17 與肺部免疫防御研究
        1.2.5 IL-17 與肺部損傷的研究
        1.2.6 IL-17 與支原體感染研究
    1.3 支原體的致病機(jī)制研究
        1.3.1 直接損傷
        1.3.2 免疫損傷
第二章 山羊支原體山羊肺炎亞種地方毒株的分離鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 病料
        2.1.2 菌株
        2.1.3 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要儀器
        2.1.6 主要溶液配置
    2.2 方法
        2.2.1 PCR檢測(cè)
        2.2.2 分離培養(yǎng)
        2.2.3 形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.4 生化特性鑒定
        2.2.5 分子生物學(xué)鑒定
        2.2.6 動(dòng)物回歸試驗(yàn)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 樣品PCR檢測(cè)結(jié)果
        2.3.2 分離培養(yǎng)與染色鏡檢
        2.3.3 生化特性鑒定
        2.3.4 PCR鑒定
        2.3.5 16sRNA基因分析
        2.3.6 動(dòng)物回歸試驗(yàn)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 介導(dǎo)山羊傳染性胸膜肺炎的細(xì)胞亞群及相關(guān)細(xì)胞因子研究
    3.1 材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器與分析軟件
        3.1.5 主要溶液配方及配制
    3.2 方法
        3.2.1 CCPP山羊模型的建立與鑒定
        3.2.2 PCR檢測(cè)
        3.2.3 血液樣品采集及處理
        3.2.4 肺組織樣品及處理
        3.2.5 總RNA提取和cDNA的合成
        3.2.6 PBMCs和肺組織細(xì)胞因子相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定
        3.2.7 肺部組織切片的制備與觀察
        3.2.8 肺組織免疫熒光染色
        3.2.9 NO、MDA、SOD檢測(cè)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 山羊感染 CCPP 后的臨床及病理變化結(jié)果
        3.3.2 血常規(guī)分析
        3.3.3 血液中IL-17 及其相關(guān)細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化結(jié)果
        3.3.4 肺組織中IL-17 及其相關(guān)細(xì)胞因子變化結(jié)果
        3.3.5 肺組織免疫熒光染色
        3.3.6 NO、MDA、T-SOD測(cè)定
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 山羊傳染性胸膜肺炎肺組織損傷的機(jī)理研究
    4.1 材料
        4.1.1 菌株
        4.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 主要儀器
        4.1.5 主要溶液配方與配制
    4.2 方法
        4.2.1 Mccp全蛋白制備
        4.2.2 山羊肺細(xì)胞及肺上皮細(xì)胞的制備
        4.2.3 Mccp全蛋白刺激PBMCs細(xì)胞因子測(cè)定
        4.2.4 Mccp全蛋白刺激肺細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定
        4.2.5 rIL-17 對(duì)山羊肺上皮細(xì)胞趨化因子表達(dá)的影響
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 山羊肺細(xì)胞及肺上皮細(xì)胞的制備
        4.3.2 Mccp全蛋白刺激濃度確定結(jié)果
        4.3.3 Mccp刺激PBMCs細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果
        4.3.4 Mccp全蛋白刺激肺細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果
        4.3.5 rIL-17 蛋白對(duì)山羊肺上皮細(xì)胞趨化因子表達(dá)測(cè)定結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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