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噬菌體及其裂解酶對奶牛乳腺炎的治療效果研究

發(fā)布時間:2021-11-08 19:24
  奶牛乳腺炎是現(xiàn)今奶牛養(yǎng)殖業(yè)中極易爆發(fā)的一種多發(fā)性疾病,嚴(yán)重影響產(chǎn)奶量和牛奶的品質(zhì),給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,為了尋找更加快速有效的治療辦法,本研究通過利用多株噬菌體制成的混合制劑來治療牛乳腺炎,對治療方法做了如下的嘗試:1、采樣,收集未處理過的環(huán)境污水樣本,以從患病奶牛取得的奶樣中分離的細(xì)菌作為指示菌,分離出多株噬菌體,其中兩株裂解性噬菌體IME-SA1、IME-SA2能裂解多株金黃色葡萄球菌,屬于比較廣譜的噬菌體,存在著潛在的應(yīng)用價值。2、鑒定,利用酶切片段并克隆測序后,在NCBI進(jìn)行BLAST進(jìn)行噬菌體種屬鑒定;針對生物學(xué)特性的研究顯示:噬菌體IME-SA1、IME-SA2的最佳感染復(fù)數(shù)均為0.01;噬菌體的侵染過程中,裂解期為30min,進(jìn)入平穩(wěn)期后滴度沒有明顯的變化。3、分析,將已分離的金黃色葡萄球菌噬菌體IME-SA1、IME-SA2進(jìn)行Ion Torrent高通量測序,序列拼接,并進(jìn)行了注釋。在對IME-SA2的序列分析中,發(fā)現(xiàn)反向序列有3個高頻序列,推測金黃色葡萄球菌噬菌體IME-SA2的末端特點(diǎn):一端固定,另一端隨機(jī),且有一定冗余。4、擴(kuò)增,利用原核表達(dá)載體pCol... 

【文章來源】:沈陽大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:82 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

噬菌體及其裂解酶對奶牛乳腺炎的治療效果研究


IonTorrent測序流程圖

噬菌體及其裂解酶對奶牛乳腺炎的治療效果研究


6SrDNA鑒定大腸桿菌PCR產(chǎn)物Fig3.1TheelectrophoresisresultofPCRsamplebasedon16SrDNAgene

噬菌體及其裂解酶對奶牛乳腺炎的治療效果研究


拼接序列在NCBI進(jìn)行BLAST結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]大腸埃希菌臨床感染分布特征及耐藥性分析[J]. 曹弟勇,徐彬,陳大斌.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2010(02)
[3]食品中金黃色葡萄球菌污染狀況研究[J]. 索玉娟,于宏偉,凌巍,賈英民.  中國食品學(xué)報(bào). 2008(03)
[4]結(jié)核桿菌D29噬菌體幾丁質(zhì)酶基因的表達(dá)及功能研究[J]. 朱成鋼,丁志山.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(08)
[5]炭疽桿菌噬菌體裂解酶基因在大腸桿菌中的表達(dá)及鑒定[J]. 李曉靜,張豪,付學(xué)奇,李彥英,陳璟,李玉玲,方宏清,陳惠鵬.  生物工程學(xué)報(bào). 2005(02)



本文編號:3484066

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