豬繁殖與呼吸綜合征是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）引起的一類傳染性疾病,以母豬流產(chǎn)、仔豬死亡及呼吸系統(tǒng)紊亂為臨床特征。自1987年首次發(fā)現(xiàn)以來(lái),PRRSV一直對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重危害。1996年我國(guó)首次分離到北美洲型的PRRSV毒株,2006年國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)暴發(fā)的重大疫情為高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HP-PRRSV）感染所致,同經(jīng)典毒株相比HP-PRRSV產(chǎn)生了新的進(jìn)化分支,致病性更強(qiáng)。本課題初步研究了中原地區(qū)近期PRRSV的變異情況。對(duì)2011～2012年間從河南及周邊省份發(fā)病豬場(chǎng)分離的8株P(guān)RRSV毒株Nsp2基因變異區(qū)進(jìn)行了RT-PCR擴(kuò)增,同時(shí)對(duì)主要結(jié)構(gòu)蛋白GP5基因進(jìn)行克隆測(cè)序并與GenBank中登錄的我國(guó)歷年來(lái)流行的PRRSV代表毒株的GP5蛋白序列進(jìn)行了遺傳進(jìn)化分析,對(duì)主要氨基酸基序進(jìn)行了比對(duì)分析。結(jié)果表明,2011～2012年在中原地區(qū)分離的8株P(guān)RRSV分離株均為Nsp2缺失變異株,GP5基因與2006年我國(guó)高致病PRRSV代表毒株JXA1同源性較高。將實(shí)驗(yàn)室... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1 豬繁殖與呼吸綜合征病毒流行過(guò)程中的分子進(jìn)化
        1.1 豬繁殖與呼吸綜合癥病毒的發(fā)現(xiàn)
        1.2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒簡(jiǎn)介
        1.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒在中國(guó)的進(jìn)化
    2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
        2.1 病原學(xué)檢測(cè)方法
        2.2 血清學(xué)檢測(cè)方法
        2.3 分子生物學(xué)檢測(cè)方法
    3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒單克隆抗體的研究進(jìn)展
        3.1 單克隆抗體技術(shù)
        3.2 PRRSV單克隆抗體研究進(jìn)展
    4 本研究的目的和意義
第二章 8株P(guān)RRSV毒株分離鑒定及分子流行病學(xué)研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 PRRSV毒株的分離鑒定結(jié)果
        2.2 PRRSV總RNA提取結(jié)果
        2.3 PRRSV分離毒株Nsp2基因缺失鑒定結(jié)果
        2.4 ORF5基因擴(kuò)增結(jié)果
        2.5 重組質(zhì)粒雙酶切鑒定結(jié)果
        2.6 ORF5基因序列對(duì)比
        2.7 GP5氨基酸序列比對(duì)
    3 討論
第三章 PRRSV HN07-1株的培養(yǎng)與純化
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 PRRSV HN07-1株感染Marc-145細(xì)胞情況
        2.2 TCID_(50)測(cè)定結(jié)果
    3 討論
第四章 PRRSV單克隆抗體的制備
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 病毒蛋白含量測(cè)定結(jié)果
            2.2 ELISA篩選方法的建立
            2.3 雜交瘤細(xì)胞株的篩選結(jié)果
            2.4 間接免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
學(xué)習(xí)經(jīng)歷
科研經(jīng)歷
所獲獎(jiǎng)勵(lì)
碩士在讀期間撰寫和已發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3482793