發(fā)布時間：2021-11-02 00:20

　　黃曲霉毒素（Aflatoxin，AF）是一種由寄生曲霉、黃曲霉、赭曲霉等真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，具有高致癌、高致畸和高致突變性，1993年被世界衛(wèi)生組織劃定為I類致癌物質(zhì)。其中黃曲霉毒素M1（Aflatoxin，AFM1）主要存在于動物的肉、蛋、奶中。目前控制黃曲霉毒素M1的方法只是通過控制它的前體物質(zhì)黃曲霉毒素B1在飼料中的含量，減少轉(zhuǎn)化來防止黃曲霉毒素M1對奶制品的污染，而當奶制品中已經(jīng)出現(xiàn)了黃曲霉毒素M1時卻沒有有效的辦法來去除。近年來生物降解的方法越來越受到人們的關(guān)注，它具有高效，副作用少，對食品營養(yǎng)損失小甚至可以增加食品營養(yǎng)成分等優(yōu)點。本試驗則秉承這一理念篩選出一株能夠降解黃曲霉毒素M1的細菌菌株，并優(yōu)化了菌株的發(fā)酵條件，研究了菌株降解黃曲霉毒素的機理，對起降解作用的活性物質(zhì)進行了初步分離提取，主要研究結(jié)果如下：（1）降解黃曲霉毒素AFM1菌株的篩選：實驗共采集38種動物糞便樣本，1個污水處理廠活性污泥樣本；3種花生地土壤樣本，以香豆素為唯一的碳源和能源進行目的菌株的初步篩選，共篩選出50株菌。然后以菌株對黃曲霉毒素M1的降解率作為篩選指標，篩選出10株降解率在60%以上的菌... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學河北省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 黃曲霉毒素理化性質(zhì)
        1.1.2 黃曲霉毒素生物合成途徑
        1.1.3 影響黃曲霉毒素產(chǎn)生的因素
        1.1.4 黃曲霉毒素危害
        1.1.5 黃曲霉毒素 M1 檢測方法
        1.1.6 黃曲霉毒素去毒方法
    1.2 本研究的目的及意義
    1.3 本研究的主要內(nèi)容
        1.3.1 降解黃曲霉毒素 M1 菌株的篩選
        1.3.2 降解黃曲霉毒素 M1 菌株的鑒定
        1.3.3 對菌株降解黃曲霉毒素 M1 條件進行優(yōu)化
        1.3.4 對菌株降解黃曲霉毒素的機理進行研究
第二章 降解黃曲霉毒素 M1 菌株的篩選
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗樣品
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 主要化學試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 樣本采集
        2.2.2 菌株篩選流程
        2.2.3 菌株初篩
        2.2.4 菌株復(fù)篩
        2.2.5 AFM1 提取與測定
        2.2.6 AFM1 標準曲線繪制
        2.2.7 菌株生長曲線測定
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 標準曲線繪制結(jié)果
        2.3.2 初篩結(jié)果
        2.3.3 復(fù)篩結(jié)果
        2.3.4 生長曲線測定
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第三章 降解黃曲霉毒素 M1 菌株的鑒定
    3.1 試驗材料
        3.1.1 試驗菌株
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
        3.1.4 主要化學試劑
    3.2 試驗方法
        3.2.1 菌落形態(tài)觀察
        3.2.2 菌體形態(tài)觀察
        3.2.3 Biolog 細菌鑒定
        3.2.4 16SrDNA 分子鑒定及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 菌落及菌體形態(tài)
        3.3.2 Biolog 生理生化鑒定結(jié)果
        3.3.3 16SrDNA 分子鑒定及發(fā)育樹構(gòu)建結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第四章 芽孢桿菌 E-1-1-1 降解黃曲霉毒素 M1 條件優(yōu)化
    4.1 試驗材料和方法
        4.1.1 試驗菌株
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 試驗儀器
        4.1.4 試驗試劑
        4.1.5 菌株培養(yǎng)
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 營養(yǎng)條件單因素
        4.2.2 培養(yǎng)條件單因素
        4.2.3 正交試驗結(jié)果
    4.3 結(jié)論
第五章 芽孢桿菌 E-1-1-1 降解黃曲霉毒素 M1 機理研究
    5.1 試驗材料
        5.1.1 試驗菌株
        5.1.2 培養(yǎng)基
        5.1.3 試驗儀器
        5.1.4 試驗試劑
    5.2 試驗方法
        5.2.1 菌株降解曲線測定
        5.2.2 細菌去除 AFM1 機理為降解或吸附的區(qū)分
        5.2.3 活性物質(zhì)屬胞內(nèi)胞外物質(zhì)的確定
        5.2.4 硫酸銨分級沉淀法提取純化活性物質(zhì)
        5.2.5 超濾法分離提取活性物質(zhì)
        5.2.6 AFM1 提取與測定
    5.3 試驗結(jié)果
        5.3.1 菌株 E-1-1-1 降解 AFM1 曲線
        5.3.2 菌株去毒方式確定
        5.3.3 菌株 E-1-1-1 降解 AFM1 活性物質(zhì)位置確定
        5.3.4 硫酸銨分級沉淀法提取純化活性物質(zhì)[79]
        5.3.5 超濾所得組分降解率測定
    5.4 討論
    5.5 結(jié)論
第六章 結(jié)論
    6.1 本試驗主要結(jié)論
    6.2 本研究創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
在讀期間發(fā)表的學術(shù)論文
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]黃曲霉毒素B1降解酶的分離純化及其酶學特性[J]. 楊文華,李海星,劉曉華,曹郁生.  食品科學. 2014(19)
[2]國外對真菌毒素的研究進展[J]. 何健,馮民,朱臻怡,王小晉,李恒業(yè),魏云計.  農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全. 2013(01)
[3]黃曲霉毒素生物降解的研究進展[J]. 孫玲玉,柴同杰.  山東農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2012(04)
[4]黃曲霉毒素B1降解菌的分離鑒定及其降解特性[J]. 李超波,李文明,楊文華,李海星,劉曉華,曹郁生.  微生物學報. 2012(09)
[5]乳與乳制品中黃曲霉毒素檢測的研究[J]. 吳雙明,張海華.  中國乳業(yè). 2012(06)
[6]黃曲霉毒素及其危害[J]. 朱輝.  品牌與標準化. 2012(12)
[7]微生物細胞壁結(jié)構(gòu)及結(jié)合真菌毒素的研究進展[J]. 韓鵬飛,賀稚非,李洪軍,鄒忠義,唐偲雨.  食品科學. 2012(11)
[8]降解黃曲霉毒素微生物篩選中降解與吸附結(jié)合作用的區(qū)分[J]. 李超波,李文明,楊文華,楊小龍,曹郁生.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2012(05)
[9]降解黃曲霉毒素枯草芽孢桿菌的解毒性、抗菌性及抗逆性研究[J]. 雷元培,趙麗紅,馬秋剛,鄭文革,高欣,計成.  飼料工業(yè). 2011(24)
[10]黃曲霉毒素生物防治的研究進展[J]. 郝瑩,宮小明,董靜,孫軍.  糧食與飼料工業(yè). 2011(11)

碩士論文
[1]黃曲霉毒素降解酶對飼喂含AFB1日糧肉仔雞生長性能及健康的影響[D]. 王勇.河北農(nóng)業(yè)大學 2010



本文編號：3470968