AI-2/LuxS系統(tǒng)對腸炎沙門氏菌耐藥和生物學(xué)特性影響的研究
發(fā)布時間：2021-10-29 06:32
腸炎沙門氏菌（Salmonella enterica Serovar Enteritidis,SE）,是引起食源性沙門氏菌病最常見的病原菌,可引起人和禽類腸道或全身性疾病。AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)廣泛存在于革蘭氏陰性和陽性菌中,通過調(diào)控病原菌的毒力基因表達(dá)、生物被膜形成和藥物敏感性等來實(shí)現(xiàn)對病原菌的調(diào)控。盡管沙門氏菌中已鑒定出AI-2/LuxS系統(tǒng),但其對SE生物學(xué)特性的影響還不清楚。因此,本論文通過構(gòu)建AI-2/LuxS系統(tǒng)關(guān)鍵基因luxS缺失株,研究了該系統(tǒng)對SE生長特性、生物被膜形成能力、黏附侵襲能力及藥物敏感性等的影響,初步探究了AI-2/LuxS系統(tǒng)對SE生物學(xué)特性的影響。本研究利用Red同源重組系統(tǒng)成功構(gòu)建luxS缺失株。隨后將包含luxS-ORF及其可能的啟動子區(qū)域基因片段,克隆至pWKS30,電轉(zhuǎn)入luxS突變株,成功獲得互補(bǔ)株C-SM32ΔluxS。為了研究LuxS系統(tǒng)對SE生物學(xué)特性的影響,分析了ΔluxS基因的穩(wěn)定性,并比較了親本株和luxS突變株的體外生長速率、生物被膜形成能力及藥物敏感性等。缺失株在無抗性平板上連續(xù)傳代25代,缺失基因未發(fā)生回復(fù),表明lu...
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：50 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
同源重組陽性克隆的獲得Fig.1-2Obtaininghomologousrecombinationpositiveclones
圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，時，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加過相同時間培養(yǎng)后缺失株形成生物被膜能力明顯更強(qiáng)具膜形成能力測定焦結(jié)果顯示,在 24 h 后 SM32ΔluxS 生物被膜形成能力高，綠色代表活菌，野生菌的生物被膜比較疏松，不能聚集S 基因缺失株的生物被膜形成更多聚集體，聚集成團(tuán)且結(jié)物被膜形成能力明顯強(qiáng)于親本株，表明 luxS 基因參與調(diào)。
圖 2-1 SM32 和 SM32 luxS 生長曲線Fig.2-1The growth curves of SM32 and SM32 luxS定生物被膜圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞肉源沙門氏菌血清型、藥敏性及部分耐藥基因研究[J]. 王嘉煒,肖英平,楊華,曹晨陽,楊保偉. 食品科學(xué). 2017(15)
[2]沙門氏菌的研究進(jìn)展[J]. 石永瓊. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2016(25)
[3]沙門氏菌的檢測技術(shù)和方法的研究進(jìn)展[J]. 張萍,馮芳. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2015(05)
[4]腸炎沙門氏菌tu-fA基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[J]. 司微,于申業(yè),陳利蘋,劉思國,李廣興. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(05)
[5]明斯特沙門氏菌耐藥性產(chǎn)生對其毒力影響的研究[J]. 方艷紅,姚明,王元蘭,魏建忠,孫裴,殷宗俊,王桂軍,李郁. 中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2013(06)
[6]群體感應(yīng)及其在動物病原菌致病中的作用[J]. 吳清平,吳葵,葉應(yīng)旺,董曉暉,張菊梅. 微生物學(xué)報(bào). 2009(07)
[7]4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮對聚氯乙烯上細(xì)菌生物膜的影響[J]. 許賡,黃云超,葉聯(lián)華,李振龍. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2008(01)
[8]山東省286起沙門菌食物中毒分析[J]. 馬呈珠,薛良輝,張紅,王曉紅. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2005(01)
[9]畜產(chǎn)品中沙門氏菌污染的檢測與控制[J]. 曾曉芳. 四川畜牧獸醫(yī). 2003(04)
碩士論文
[1]雞源沙門氏菌耐藥性、致病性與毒力基因相關(guān)性分析[D]. 王德寧.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]F18大腸桿菌群體感應(yīng)基因luxS功能研究[D]. 羊揚(yáng).揚(yáng)州大學(xué) 2011
本文編號：3464149
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：50 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
同源重組陽性克隆的獲得Fig.1-2Obtaininghomologousrecombinationpositiveclones
圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，時，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加過相同時間培養(yǎng)后缺失株形成生物被膜能力明顯更強(qiáng)具膜形成能力測定焦結(jié)果顯示,在 24 h 后 SM32ΔluxS 生物被膜形成能力高，綠色代表活菌，野生菌的生物被膜比較疏松，不能聚集S 基因缺失株的生物被膜形成更多聚集體，聚集成團(tuán)且結(jié)物被膜形成能力明顯強(qiáng)于親本株，表明 luxS 基因參與調(diào)。
圖 2-1 SM32 和 SM32 luxS 生長曲線Fig.2-1The growth curves of SM32 and SM32 luxS定生物被膜圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞肉源沙門氏菌血清型、藥敏性及部分耐藥基因研究[J]. 王嘉煒,肖英平,楊華,曹晨陽,楊保偉. 食品科學(xué). 2017(15)
[2]沙門氏菌的研究進(jìn)展[J]. 石永瓊. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2016(25)
[3]沙門氏菌的檢測技術(shù)和方法的研究進(jìn)展[J]. 張萍,馮芳. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2015(05)
[4]腸炎沙門氏菌tu-fA基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[J]. 司微,于申業(yè),陳利蘋,劉思國,李廣興. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(05)
[5]明斯特沙門氏菌耐藥性產(chǎn)生對其毒力影響的研究[J]. 方艷紅,姚明,王元蘭,魏建忠,孫裴,殷宗俊,王桂軍,李郁. 中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2013(06)
[6]群體感應(yīng)及其在動物病原菌致病中的作用[J]. 吳清平,吳葵,葉應(yīng)旺,董曉暉,張菊梅. 微生物學(xué)報(bào). 2009(07)
[7]4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮對聚氯乙烯上細(xì)菌生物膜的影響[J]. 許賡,黃云超,葉聯(lián)華,李振龍. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2008(01)
[8]山東省286起沙門菌食物中毒分析[J]. 馬呈珠,薛良輝,張紅,王曉紅. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2005(01)
[9]畜產(chǎn)品中沙門氏菌污染的檢測與控制[J]. 曾曉芳. 四川畜牧獸醫(yī). 2003(04)
碩士論文
[1]雞源沙門氏菌耐藥性、致病性與毒力基因相關(guān)性分析[D]. 王德寧.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]F18大腸桿菌群體感應(yīng)基因luxS功能研究[D]. 羊揚(yáng).揚(yáng)州大學(xué) 2011
本文編號：3464149
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