腸炎沙門氏菌（Salmonella enterica Serovar Enteritidis,SE）,是引起食源性沙門氏菌病最常見的病原菌,可引起人和禽類腸道或全身性疾病。AI-2/LuxS群體感應系統廣泛存在于革蘭氏陰性和陽性菌中,通過調控病原菌的毒力基因表達、生物被膜形成和藥物敏感性等來實現對病原菌的調控。盡管沙門氏菌中已鑒定出AI-2/LuxS系統,但其對SE生物學特性的影響還不清楚。因此,本論文通過構建AI-2/LuxS系統關鍵基因luxS缺失株,研究了該系統對SE生長特性、生物被膜形成能力、黏附侵襲能力及藥物敏感性等的影響,初步探究了AI-2/LuxS系統對SE生物學特性的影響。本研究利用Red同源重組系統成功構建luxS缺失株。隨后將包含luxS-ORF及其可能的啟動子區(qū)域基因片段,克隆至pWKS30,電轉入luxS突變株,成功獲得互補株C-SM32ΔluxS。為了研究LuxS系統對SE生物學特性的影響,分析了ΔluxS基因的穩(wěn)定性,并比較了親本株和luxS突變株的體外生長速率、生物被膜形成能力及藥物敏感性等。缺失株在無抗性平板上連續(xù)傳代25代,缺失基因未發(fā)生回復,表明lu... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

同源重組陽性克隆的獲得Fig.1-2Obtaininghomologousrecombinationpositiveclones

圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，時，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加過相同時間培養(yǎng)后缺失株形成生物被膜能力明顯更強具膜形成能力測定焦結果顯示,在 24 h 后 SM32ΔluxS 生物被膜形成能力高，綠色代表活菌，野生菌的生物被膜比較疏松，不能聚集S 基因缺失株的生物被膜形成更多聚集體，聚集成團且結物被膜形成能力明顯強于親本株，表明 luxS 基因參與調。

圖 2-1 SM32 和 SM32 luxS 生長曲線Fig.2-1The growth curves of SM32 and SM32 luxS定生物被膜圖 2-2 SM32 和 SM32 luxS 在 24 h、48 h、72 h 時的生物被膜Fig.2-2 The growth curves of SM32 and SM32 luxS色定量測定腸炎沙門氏菌生物被膜，與陰性對照相比，，親本株及缺失株形成生物被膜的能力隨著時間增加

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3464149