目的:羊傳染性膿皰（CE）是由山羊或綿羊感染羊口瘡病毒（ORFV）而引起的一種急性、高度接觸性傳染病,同時該病毒可感染人類,引起高傳染性的人畜共患病。ORFV是痘病毒科脊椎動物痘病毒亞科副痘病毒屬的主要成員。大多數(shù)的痘病毒為保證自身在宿主細胞中的正常復制,針對NF-κB信號通路進化出了獨特的調節(jié)宿主免疫應答的能力。由多拷貝的錨蛋白重復（ANK）基序組成的錨蛋白,作為痘病毒蛋白中最大的家族,在病毒逃避宿主免疫應答中發(fā)揮重要作用。目前關于痘病毒錨蛋白調節(jié)宿主NF-κB信號通路的研究已有很多,但有關副痘病毒屬錨蛋白與NF-κB信號通路互作關系的研究卻較少。本研究為系統(tǒng)探討副痘病毒屬ORFV編碼的五種錨蛋白ORF008、ORF123、ORF126、ORF128、ORF129對NF-κB信號通路的調節(jié)作用機制,首先驗證ORFV編碼的五種錨蛋白是否可在293T細胞中正確表達,并探討錨蛋白對宿主細胞核因子κB（NF-κB）信號通路的調節(jié)作用;其次研究ORFV編碼的錨蛋白ORF128蛋白調節(jié)宿主NF-κB信號通路的作用機制;同時,初步構建ORFV-?ORF123重組病毒,為進一步深入研究ORFV編碼錨... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

ORFV錨蛋白重組質粒在293T細胞中的表達

圖 3-1 ORF128 生物信息學分析A：基于 ORF128 基因序列構建的系統(tǒng)進化樹；B：ORF128 一級結構預測示意圖2 ORF128 蛋白影響 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 從細胞質進入細胞核是 NF-κB 信號通路激活的重要標志。RF128 下調 NF-κB 信號通路活性的機制，通過 Western-blot 分別檢測細胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表達量。結果顯示，TNF-α 刺激 60min 后，F(xiàn)128 蛋白的細胞與對照組相比，其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相對減少在細胞質中 NF-κB-p65 的量多于對照組（圖 3-2）。

圖 3-1 ORF128 生物信息學分析A：基于 ORF128 基因序列構建的系統(tǒng)進化樹；B：ORF128 一級結構預測示意圖3.3.2 ORF128 蛋白影響 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 從細胞質進入細胞核是 NF-κB 信號通路激活的重要標志。為探討 ORF128 下調 NF-κB 信號通路活性的機制，通過 Western-blot 分別檢測細胞質和細胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表達量。結果顯示，TNF-α 刺激 60min 后，表達ORF128 蛋白的細胞與對照組相比，其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相對減少，而滯留在細胞質中 NF-κB-p65 的量多于對照組（圖 3-2）。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3459958