發(fā)布時(shí)間：2021-10-26 18:04

　　目的:羊傳染性膿皰（CE）是由山羊或綿羊感染羊口瘡病毒（ORFV）而引起的一種急性、高度接觸性傳染病,同時(shí)該病毒可感染人類,引起高傳染性的人畜共患病。ORFV是痘病毒科脊椎動(dòng)物痘病毒亞科副痘病毒屬的主要成員。大多數(shù)的痘病毒為保證自身在宿主細(xì)胞中的正常復(fù)制,針對(duì)NF-κB信號(hào)通路進(jìn)化出了獨(dú)特的調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答的能力。由多拷貝的錨蛋白重復(fù)（ANK）基序組成的錨蛋白,作為痘病毒蛋白中最大的家族,在病毒逃避宿主免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。目前關(guān)于痘病毒錨蛋白調(diào)節(jié)宿主NF-κB信號(hào)通路的研究已有很多,但有關(guān)副痘病毒屬錨蛋白與NF-κB信號(hào)通路互作關(guān)系的研究卻較少。本研究為系統(tǒng)探討副痘病毒屬ORFV編碼的五種錨蛋白ORF008、ORF123、ORF126、ORF128、ORF129對(duì)NF-κB信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用機(jī)制,首先驗(yàn)證ORFV編碼的五種錨蛋白是否可在293T細(xì)胞中正確表達(dá),并探討錨蛋白對(duì)宿主細(xì)胞核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用;其次研究ORFV編碼的錨蛋白ORF128蛋白調(diào)節(jié)宿主NF-κB信號(hào)通路的作用機(jī)制;同時(shí),初步構(gòu)建ORFV-?ORF123重組病毒,為進(jìn)一步深入研究ORFV編碼錨... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ORFV錨蛋白重組質(zhì)粒在293T細(xì)胞中的表達(dá)

圖 3-1 ORF128 生物信息學(xué)分析A：基于 ORF128 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹；B：ORF128 一級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測示意圖2 ORF128 蛋白影響 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核是 NF-κB 信號(hào)通路激活的重要標(biāo)志。RF128 下調(diào) NF-κB 信號(hào)通路活性的機(jī)制，通過 Western-blot 分別檢測細(xì)胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表達(dá)量。結(jié)果顯示，TNF-α 刺激 60min 后，F(xiàn)128 蛋白的細(xì)胞與對(duì)照組相比，其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相對(duì)減少在細(xì)胞質(zhì)中 NF-κB-p65 的量多于對(duì)照組（圖 3-2）。

圖 3-1 ORF128 生物信息學(xué)分析A：基于 ORF128 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹；B：ORF128 一級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測示意圖3.3.2 ORF128 蛋白影響 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核是 NF-κB 信號(hào)通路激活的重要標(biāo)志。為探討 ORF128 下調(diào) NF-κB 信號(hào)通路活性的機(jī)制，通過 Western-blot 分別檢測細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表達(dá)量。結(jié)果顯示，TNF-α 刺激 60min 后，表達(dá)ORF128 蛋白的細(xì)胞與對(duì)照組相比，其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相對(duì)減少，而滯留在細(xì)胞質(zhì)中 NF-κB-p65 的量多于對(duì)照組（圖 3-2）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]羊口瘡病的流行與綜合防治分析[J]. 涂莉莉,陳書啟.  現(xiàn)代畜牧科技. 2018(10)
[2]羊口瘡病的診斷要點(diǎn)及防治[J]. 王淑娟.  河南畜牧獸醫(yī)(綜合版). 2017 (09)
[3]痘病毒ANK/F-box蛋白的生物學(xué)特性及泛素化相關(guān)功能[J]. 陳軼霞,龍玲,王明明.  病毒學(xué)報(bào). 2017(04)
[4]同源重組介導(dǎo)的重組病毒研究進(jìn)展[J]. 趙銀龍,李健,朱海霞,顏新敏,趙志荀,吳健,張強(qiáng),穆曉峰,吳國華.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(11)
[5]口瘡病毒B4R錨蛋白抑制細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的研究[J]. 馮園,賈懷杰,何小兵,成溫玉,陳國華,王春燕,何玉林,景志忠.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2016(11)
[6]羊口瘡病的診斷及防治技術(shù)[J]. 徐文福,彭彰,周莉,陳毓剛.  草業(yè)與畜牧. 2016(05)
[7]甘肅東部地區(qū)羊口瘡病毒PCR檢測調(diào)查[J]. 常亮,郭海龍,黨巖.  中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2016(04)
[8]羊口瘡研究進(jìn)展[J]. 劉其昌,宋德榮,彭華,周大榮,張瓊娣,羅耀,郭振剛,馬金萍.  當(dāng)代畜牧. 2015(18)
[9]羊口瘡病毒分子生物學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 閆豐超,邵佳,竇永喜.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2013(01)
[10]NF-κB信號(hào)通路在病毒感染中的作用[J]. 王平忠,于海濤,白雪帆,張穎.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(08)

碩士論文
[1]山羊痘病毒N1L基因缺失重組毒株的構(gòu)建及其生物特性研究[D]. 曹慧慧.廣西大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3459958