仔豬在斷奶等因素影響下產(chǎn)生免疫應(yīng)激,引發(fā)腸道炎癥發(fā)生,從而導(dǎo)致出現(xiàn)腹瀉等一系列健康問題,植物源生物活性物質(zhì)可通過調(diào)節(jié)免疫信號(hào)通路來改善畜禽腸道健康。沒食子酸（Gallic acid,GA）作為一種植物源生物活性物質(zhì)的多酚類化合物具有抑菌、抗氧化和抗炎等多種生物功能。目前對(duì)沒食子酸調(diào)控?cái)嗄套胸i腸道免疫功能的作用及其具體機(jī)制知之甚少。本研究擬通過體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)、體外細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)相結(jié)合來探究沒食子酸對(duì)仔豬腸道黏膜炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。本研究主要包括以下4個(gè)部分:（1）研究日糧中不同水平?jīng)]食子酸添加量對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響。挑選96頭初始體重相近的杜?長(zhǎng)?大三元雜交斷奶仔豬,隨機(jī)分為4個(gè)處理:對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧）、GA 100組（基礎(chǔ)日糧+100 mg/kg GA）、GA 200組（基礎(chǔ)日糧+200mg/kg GA）、GA 400組（基礎(chǔ)日糧+400 mg/kg GA）。每個(gè)處理設(shè)6個(gè)重復(fù)（欄）,每個(gè)欄放置4頭仔豬。試驗(yàn)周期為21天。（2）研究日糧中不同水平?jīng)]食子酸添加量對(duì)攻毒斷奶仔豬抗氧化和免疫功能的影響。在動(dòng)物試驗(yàn)第21天,每欄各選取1頭體重中等的仔豬,腹腔注射脂多糖（LP... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

沒食子酸的分子結(jié)構(gòu)

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第四章外源添加沒食子酸對(duì)IPEC-J2細(xì)胞氧化還原及炎癥反應(yīng)的影響274.2.7細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)測(cè)定將培養(yǎng)孔中培養(yǎng)基吸凈，用預(yù)冷PBS洗滌2-3次，然后每孔加入1mL的TRIzol并反復(fù)吹打幾次，然后在冰上靜置反應(yīng)3-5min。其他步驟參照章節(jié)3.2.7。4.2.8統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SEM）表示，運(yùn)用SAS9.2軟件的One-wayANOVA進(jìn)行顯著性分析，并用Tukey方法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。4.3結(jié)果4.3.1外源添加沒食子酸對(duì)IPEC-J2細(xì)胞活性的影響細(xì)胞活性測(cè)定結(jié)果（圖4-1）顯示，當(dāng)用沒食子酸孵育IPEC-J2細(xì)胞6h時(shí)，濃度低于400μg/L對(duì)細(xì)胞活力沒有明顯影響（P>0.05）。當(dāng)用沒食子酸孵育24h時(shí)，與對(duì)照組相比，濃度高于200μg/L時(shí)，IPEC-J2的活力顯著降低（P<0.05）。綜合考慮孵育時(shí)間和沒食子酸濃度的相互作用，在后續(xù)的試驗(yàn)中將沒食子酸的工作濃度設(shè)為100μg/L。圖4-1沒食子酸對(duì)IPEC-J2細(xì)胞活性的影響Fig.4-1EffectofgallicacidontheviabilityofIPEC-J2cells4.3.2外源添加沒食子酸對(duì)損傷IPEC-J2細(xì)胞中抗氧化酶含量的影響過氧化氫刺激后，IPEC-J2細(xì)胞中過氧化氫酶活性顯著下降（P<0.05），而用沒食子酸預(yù)培養(yǎng)則有一定的緩解趨勢(shì)但差異不顯著（P>0.05）（圖4-2a）；過氧化氫和沒食子酸處理對(duì)細(xì)胞內(nèi)超氧化物氧化酶及谷胱甘肽過氧化物酶活性無顯著影響（P>0.05）。

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第四章外源添加沒食子酸對(duì)IPEC-J2細(xì)胞氧化還原及炎癥反應(yīng)的影響28圖4-2沒食子酸對(duì)H2O2誘導(dǎo)的抗氧化酶分泌的影響Fig.4-2EffectofgallicacidonH2O2-inducedantioxidantenzymesecretion4.3.3外源添加沒食子酸對(duì)損傷IPEC-J2細(xì)胞中抗氧化酶基因表達(dá)的影響如圖4-3所示，與單獨(dú)用過氧化氫處理組的細(xì)胞相比，同時(shí)使用沒食子酸處理組的細(xì)胞具有增加CAT相對(duì)基因表達(dá)的趨勢(shì)（P>0.05）。此外，各組細(xì)胞之間SOD和GPX1基因的相對(duì)表達(dá)無顯著差異（P>0.05），這與上述細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性水平結(jié)果基本一致。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]頭花蓼有效組分中沒食子酸、原兒茶酸在模式生物斑馬魚中的代謝研究[J]. 孫慧園,覃小麗,梅朝葉,李勇軍,鄭林,黃勇.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2017(03)
[2]內(nèi)毒素對(duì)豬的危害及其控制[J]. 汪志,董國(guó)忠,吳劍波.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(02)
[3]沒食子酸和原兒茶酸在大鼠腸道菌群中的代謝研究[J]. 羅媛,楊武,孫慧園,孫佳,董莉,陳思穎,黃勇.  沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[4]沒食子酸通過拮抗脂多糖誘導(dǎo)的TLR4/NF-κB活化抑制RAW264.7巨噬細(xì)胞炎性反應(yīng)[J]. 黃麗華,侯林,薛海南,王純潔.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(12)
[5]沒食子酸的藥理作用及其藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J]. 高雅,李驊,王四旺,謝艷華,楊倩,張邦樂.  西北藥學(xué)雜志. 2014(04)
[6]葡萄籽原花青素及維生素E對(duì)氧化應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)性能、血清氧化還原狀態(tài)和肝臟氧化損傷的影響[J]. 趙嬌,周招洪,梁小芳,毛湘冰,陳代文,余冰.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(19)
[7]五倍子沒食子酸研究進(jìn)展[J]. 張雅麗,李建科,劉柳,于振,馬倩倩,李夢(mèng)穎.  食品工業(yè)科技. 2013(10)
[8]自由基清除劑對(duì)仔豬生長(zhǎng)及血液氧化代謝相關(guān)指標(biāo)的影響[J]. 韓國(guó)清,朱曉彤,束剛,王松波,王麗娜,高萍,江青艷.  畜牧與獸醫(yī). 2012(S1)
[9]沒食子酸的研究進(jìn)展[J]. 柯發(fā)敏,張開蓮.  瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(04)
[10]沒食子酸體外抗氧化作用研究[J]. 謝曉艷,劉洪濤,張吉,李秀英,李文明,于超.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(03)

博士論文
[1]日糧纖維對(duì)仔豬腸道屏障功能的影響及調(diào)控機(jī)制的研究[D]. 張莉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[2]沒食子酸和縮合單寧對(duì)體外瘤胃發(fā)酵及肉牛營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化、甲烷產(chǎn)量和氮代謝影響的研究[D]. 魏晨.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]五倍子沒食子酸的制備、抑菌作用及機(jī)理研究[D]. 張雅麗.陜西師范大學(xué) 2013
[2]五倍子沒食子酸的提取、純化及抑菌效果研究[D]. 王廣娟.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3458168