背景鼠傳疾病是一類由鼠或鼠體寄生蟲傳播引起的危害人畜健康的重要傳染病。鼠類能給人畜傳播多種細(xì)菌、病毒、病原蟲和立克次體等病原體,造成巨大的經(jīng)濟損失和安全隱患。及時準(zhǔn)確地檢測、鑒定病原體是鼠傳疾病疫情防治的關(guān)鍵。傳統(tǒng)檢測方法如分離培養(yǎng)法、血清學(xué)檢測法等檢測通量小,靈敏度低,而以實時熒光定量PCR法（Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR）和基因芯片法為代表的核酸分子檢測技術(shù)雖然提高了檢測靈敏度,實現(xiàn)了多重病原檢測,但qPCR法因報告基因光譜重疊限制了被檢病原種類數(shù);基因芯片法價格昂貴,操作復(fù)雜,不利于推廣使用。因此,急需建立一種靈敏、簡便、高通量的鼠傳病原體檢測方法。目的本研究旨在建立一種基于QIAxcel毛細(xì)管電泳系統(tǒng)的鼠傳疾病病原體多重PCR檢測方法,將實現(xiàn)在單管中同時檢測恙蟲病東方體（Orientia tsutsugamushi,Ot）、嗜吞噬細(xì)胞無形體（Anaplasma phagocytophilum,Ap）、莫氏立克次體（Rickettsia typhi,Rt）、土拉弗朗西斯菌（Francisella tularensis,F... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 文獻綜述 鼠傳疾病檢測技術(shù)研究現(xiàn)狀
    1. 鼠傳疾病流行概況
    2. 實驗室檢測技術(shù)
        2.1. 分離培養(yǎng)法
        2.2. 血清學(xué)檢測法
        2.3. 核酸分子檢測技術(shù)
第二章 多重PCR檢測體系的建立與優(yōu)化
    1. 引言
        1.1. 研究目的與意義
        1.2. 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
    2. 實驗材料
        2.1. 質(zhì)粒與菌株核酸
        2.2. 實驗引物
        2.3. 實驗試劑
        2.4. 實驗軟件
        2.5. 實驗儀器
    3. 實驗方法
        3.1. 篩選特異基因
        3.2. 引物設(shè)計與驗證
        3.3. 單重PCR檢測體系的建立
        3.4. 多重PCR檢測體系的建立與優(yōu)化
        3.5. 多重PCR檢測體系特異性檢測
        3.6. 多重PCR檢測體系靈敏度檢測
    4. 結(jié)果
        4.1. 特異基因篩選
        4.2. 引物設(shè)計與驗證
        4.3. 多重PCR檢測體系的建立與優(yōu)化
        4.4. 多重PCR檢測體系特異性檢測
        4.5. 多重PCR檢測體系靈敏度檢測
    5. 討論
第三章 多重PCR檢測體系的初步應(yīng)用
    1. 引言
    2. 模擬樣品的檢測
        2.1. 實驗材料
        2.2. 實驗方法
        2.3. 結(jié)果
    3. 野外鼠脾樣品的檢測
        3.1. 實驗材料
        3.2. 實驗方法
        3.3. 結(jié)果
    4. 討論
總結(jié)
附錄1
附錄2
參考文獻
致謝
學(xué)位論文評閱及答辯情況表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]廣西地區(qū)部分口岸鼠傳疾病病原體調(diào)查[J]. 葉海波,萬道正,許佳,云小云,張曉龍,覃鳳葵,陳健超,方勇,姚李四.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2017(04)
[2]安徽地區(qū)家畜嗜吞噬細(xì)胞無形體16S rRNA基因檢測和序列分析[J]. 史永林,王誓聞,胡萬富,張永根,劉紅,曹明華,張麗娟.  安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2013(05)
[3]9種蜱媒病原體xMAP懸浮芯片高通量檢測方法的建立[J]. 王旺,楊宇,王靜,趙婷婷,孫肖紅,劉麗娟.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2013(05)
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[10]鼠傳播疾病及鼠類的防制概述[J]. 趙玉強,程鵬,公茂慶,侯博文.  中國病原生物學(xué)雜志. 2010(05)

碩士論文
[1]七種立克次體甄別檢測基因芯片的研制[D]. 李靈云.河南中醫(yī)學(xué)院 2015



本文編號：3457677