背景鼠傳疾病是一類由鼠或鼠體寄生蟲傳播引起的危害人畜健康的重要傳染病。鼠類能給人畜傳播多種細(xì)菌、病毒、病原蟲和立克次體等病原體,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失和安全隱患。及時(shí)準(zhǔn)確地檢測(cè)、鑒定病原體是鼠傳疾病疫情防治的關(guān)鍵。傳統(tǒng)檢測(cè)方法如分離培養(yǎng)法、血清學(xué)檢測(cè)法等檢測(cè)通量小,靈敏度低,而以實(shí)時(shí)熒光定量PCR法（Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR）和基因芯片法為代表的核酸分子檢測(cè)技術(shù)雖然提高了檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)了多重病原檢測(cè),但qPCR法因報(bào)告基因光譜重疊限制了被檢病原種類數(shù);基因芯片法價(jià)格昂貴,操作復(fù)雜,不利于推廣使用。因此,急需建立一種靈敏、簡(jiǎn)便、高通量的鼠傳病原體檢測(cè)方法。目的本研究旨在建立一種基于QIAxcel毛細(xì)管電泳系統(tǒng)的鼠傳疾病病原體多重PCR檢測(cè)方法,將實(shí)現(xiàn)在單管中同時(shí)檢測(cè)恙蟲病東方體（Orientia tsutsugamushi,Ot）、嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體（Anaplasma phagocytophilum,Ap）、莫氏立克次體（Rickettsia typhi,Rt）、土拉弗朗西斯菌（Francisella tularensis,F... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
第一章 文獻(xiàn)綜述 鼠傳疾病檢測(cè)技術(shù)研究現(xiàn)狀
    1. 鼠傳疾病流行概況
    2. 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)
        2.1. 分離培養(yǎng)法
        2.2. 血清學(xué)檢測(cè)法
        2.3. 核酸分子檢測(cè)技術(shù)
第二章 多重PCR檢測(cè)體系的建立與優(yōu)化
    1. 引言
        1.1. 研究目的與意義
        1.2. 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
    2. 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1. 質(zhì)粒與菌株核酸
        2.2. 實(shí)驗(yàn)引物
        2.3. 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.4. 實(shí)驗(yàn)軟件
        2.5. 實(shí)驗(yàn)儀器
    3. 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1. 篩選特異基因
        3.2. 引物設(shè)計(jì)與驗(yàn)證
        3.3. 單重PCR檢測(cè)體系的建立
        3.4. 多重PCR檢測(cè)體系的建立與優(yōu)化
        3.5. 多重PCR檢測(cè)體系特異性檢測(cè)
        3.6. 多重PCR檢測(cè)體系靈敏度檢測(cè)
    4. 結(jié)果
        4.1. 特異基因篩選
        4.2. 引物設(shè)計(jì)與驗(yàn)證
        4.3. 多重PCR檢測(cè)體系的建立與優(yōu)化
        4.4. 多重PCR檢測(cè)體系特異性檢測(cè)
        4.5. 多重PCR檢測(cè)體系靈敏度檢測(cè)
    5. 討論
第三章 多重PCR檢測(cè)體系的初步應(yīng)用
    1. 引言
    2. 模擬樣品的檢測(cè)
        2.1. 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3. 結(jié)果
    3. 野外鼠脾樣品的檢測(cè)
        3.1. 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2. 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3. 結(jié)果
    4. 討論
總結(jié)
附錄1
附錄2
參考文獻(xiàn)
致謝
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]廣西地區(qū)部分口岸鼠傳疾病病原體調(diào)查[J]. 葉海波,萬(wàn)道正,許佳,云小云,張曉龍,覃鳳葵,陳健超,方勇,姚李四.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2017(04)
[2]安徽地區(qū)家畜嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體16S rRNA基因檢測(cè)和序列分析[J]. 史永林,王誓聞,胡萬(wàn)富,張永根,劉紅,曹明華,張麗娟.  安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2013(05)
[3]9種蜱媒病原體xMAP懸浮芯片高通量檢測(cè)方法的建立[J]. 王旺,楊宇,王靜,趙婷婷,孫肖紅,劉麗娟.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2013(05)
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[6]Q熱貝納柯克斯體SYBR GreenⅠ熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 賈廣樂,王曉楠,廖娟紅,林祥梅.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2013(07)
[7]北京市門頭溝區(qū)小型獸類群落構(gòu)成及鼠疫監(jiān)測(cè)[J]. 李龍建,曹殿起,劉英,褚民尉,劉喜房,徐艷廣.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2013(03)
[8]新型液相芯片復(fù)合檢測(cè)5種鼠傳病原體方法的建立[J]. 王旺,楊宇,王靜,趙婷婷.  中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志. 2013(02)
[9]TaqMan-MGB探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)恙蟲病東方體方法的建立[J]. 付秀萍,賀金榮,張景山,王景泉.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2012(02)
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碩士論文
[1]七種立克次體甄別檢測(cè)基因芯片的研制[D]. 李靈云.河南中醫(yī)學(xué)院 2015



本文編號(hào)：3457677