干擾素誘導(dǎo)的GBPs又稱p65GTPase,屬于干擾素誘導(dǎo)的GTPase超家族,是一種重要的干擾素刺激基因（ISGs）。GBPs最早發(fā)現(xiàn)于1979年,Gupta發(fā)現(xiàn)經(jīng)IFN-y刺激后,人的成纖維細(xì)胞可以產(chǎn)生一種67kDa的蛋白。GBP蛋白與Mx蛋白同屬GTPase家族。自1979年被發(fā)現(xiàn)以后,后續(xù)的研究中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族在調(diào)控細(xì)胞增殖和抵抗病原體感染方面具有重要作用。目前對干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族的研究主要集中在人和小鼠上,大量實驗證實了干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族具有抵抗病毒感染的作用,但具體機制尚不明晰。目前對豬源GBPs生物學(xué)功能的研究并不多,僅有豬源GBPs可以顯著抑制鼠傷寒沙門氏桿菌增殖的報道,豬源GBPs是否有抑制病毒增殖的作用目前尚無報道。PRRSV和PRV引發(fā)的疾病給世界養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失。本研究以豬源干擾素誘導(dǎo)的鳥苷酸結(jié)合蛋白家族中GBP1和GBP2兩個成員為研究對象,研究豬GBPs對PRRSV和PRV增殖的影響,以及PRRSV和PRV感染對GBPs表達的影響,主要研究內(nèi)容如下：1.豬GBP1和GBP2基因的擴增和序列分析從PK-15細(xì)胞中克隆了豬GB... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮咯語表(Abbreviation)
1 文獻綜述
    1.1 抗病毒天然免疫
    1.2 干擾素的抗病毒作用
    1.3 干擾素誘導(dǎo)的鳥苷酸結(jié)合蛋白家族(GBPs)簡介
        1.3.1 干擾素誘導(dǎo)的GTPase家族
        1.3.2 干擾素誘導(dǎo)的鳥苷酸結(jié)合蛋白家族(GBPs)研究現(xiàn)狀
    1.4 PRRSV簡介
    1.5 PRV簡介
2 研究目的與意義
3 材料與方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 菌株、細(xì)胞、毒株、載體
        3.1.2 主要試劑及試劑盒
        3.1.3 其他試劑的配制方法
        3.1.4 分子生物學(xué)分析軟件
    3.2 實驗方法
        3.2.1 PRRSV和PRV的增殖
        3.2.2 目的基因的克隆和載體構(gòu)建
        3.2.3 瞬時轉(zhuǎn)染傳代細(xì)胞
        3.2.4 Western Blot檢測目的蛋白在真核細(xì)胞中的表達
        3.2.5 IFA檢測目的蛋白的表達及細(xì)胞定位
        3.2.6 病毒空斑實驗
        3.2.7 熒光定量
        3.2.8 統(tǒng)計學(xué)方法
4 結(jié)果和分析
    4.1 豬GBP1和GBP2基因克隆,鑒定及序列分析
        4.1.1 豬GBP1和GBP2基因RT-PCR擴增與克隆
        4.1.2 豬GBP1和GBP2基因序列分析
    4.2 豬GBP1和GBP2基因的真核表達及Western Blot鑒定分析
    4.3 豬GBP1和GBP2蛋白的亞細(xì)胞定位
    4.4 豬GBP1和GBP2蛋白與PRRSV的相互作用
    4.5 豬GBP1和GBP2蛋白與PRV的相互作用
5 討論與結(jié)論
    5.1 討論
    5.2 結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）的分子生物學(xué)研究進展[J]. 呂春花,馬曉艷,美熱木古麗.  新疆畜牧業(yè). 2009(05)
[2]DNA的識別分子及其識別模式[J]. 張偉娟,徐潔杰,徐薇,熊思東.  自然科學(xué)進展. 2008(06)
[3]豬繁殖與呼吸綜合癥病毒生物學(xué)特性[J]. 韓銀濤,蘇柏光.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2008(01)
[4]我國偽狂犬病流行現(xiàn)狀及新特點[J]. 鄧仕偉,汪勇,薛春芳.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2006(09)
[5]天然免疫與獲得性免疫的進化關(guān)系[J]. 劉燕明.  免疫學(xué)雜志. 2001(S1)
[6]豬繁殖與呼吸綜合征病毒形態(tài)學(xué)特征[J]. 李成,李六金,谷守林,蔡虹,姜煥宏,趙世君,張海,李秦.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2001(06)
[7]豬繁殖與呼吸綜合征及其在我國的現(xiàn)狀與對策[J]. 蔡雪暉,柴文君,翁長江,劉光清,郭寶清.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2000(S1)
[8]PRRS免疫防制面臨的困惑與未來[J]. 仇華吉,童光志.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2000(01)
[9]偽狂犬病流行現(xiàn)狀及我國應(yīng)采取的防制措施[J]. 童光志,陳煥春.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 1999(01)
[10]從疑似PRRS流產(chǎn)胎兒分離PRRSV的研究[J]. 郭寶清,陳章水,劉文興,崔益洙.  中國畜禽傳染病. 1996(02)

博士論文
[1]偽狂犬病毒和豬傳染性胃腸炎病毒誘導(dǎo)β干擾素產(chǎn)生的分子機制研究[D]. 謝立蘭.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]MITA介導(dǎo)的細(xì)胞抗病毒反應(yīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及其調(diào)節(jié)機制[D]. 鐘波.武漢大學(xué) 2010
[3]偽狂犬病毒IE180和EP0基因的表達調(diào)控[D]. 郭洪.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]豬干擾素刺激基因ISG20的克隆、真核表達及其對PRRSV增殖的影響[D]. 李燕.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



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