為了研究苜蓿皂苷粗提物對蛋雞膽固醇代謝相關(guān)基因的影響,并初步探討其分子機理。本文通過測定不同水平的苜蓿皂苷粗提物對產(chǎn)蛋雞膽固醇代謝相關(guān)基因mRNA表達的影響,觀察基因表達的變化與規(guī)律,并通過凝膠阻滯實驗研究苜蓿皂苷粗提物對相關(guān)基因表達的調(diào)控,探討苜蓿皂苷降低膽固醇的作用機理。結(jié)果如下：試驗一：苜蓿皂苷粗提物對產(chǎn)蛋雞膽固醇代謝基因mRNA表達的影響。選取150只190日齡海藍褐殼蛋雞,隨機分為5個處理,每個處理5個重復(fù),每個重復(fù)6只雞,試驗期77d。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,處理A、B、C、D組在基礎(chǔ)日糧中分別添加60mg/kg、120mg/kg、 240mg/kg、480mg/kg的苜蓿皂苷粗提物。結(jié)果表明：（1）苜蓿皂苷粗提物可以呈二次效應(yīng)降低蛋雞卵巢VLDLR mRNA表達量,各處理組VLDLR mRNA表達量極顯著低于對照組。（2）苜蓿皂苷粗提物呈極顯著二次效應(yīng)促進蛋雞肝臟CYP7A1mRNA的表達（P）<0.01),處理A、B、C組的CYP7A1 mRNA表達量極顯著高于對照組和處理D組（P<0.01）。（3）苜蓿皂苷粗提物對蛋雞膽固醇代謝基因apoVLDL-Ⅱ、SREB... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
1 文獻綜述
    1.1 苜蓿皂苷的應(yīng)用
        1.1.1 苜蓿皂苷定義
        1.1.2 苜蓿皂苷應(yīng)用
    1.2 蛋雞雞蛋的膽固醇沉積原理
        1.2.1 蛋黃前體的合成
        1.2.2 蛋黃膽固醇的沉積
        1.2.3 蛋黃膽固醇代謝的調(diào)控
    1.3 苜蓿皂苷降低膽固醇以及對膽固醇代謝基因表達的影響
        1.3.1 膽固醇代謝關(guān)鍵基因及關(guān)鍵蛋白
        1.3.2 逆轉(zhuǎn)運與非受體途徑
        1.3.3 基因表達調(diào)控
    1.4 展望
2 引言
3 試驗一 苜蓿皂苷對蛋雞膽固醇代謝相關(guān)基因表達的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料與試驗設(shè)計
        3.1.2 試驗主要儀器與試劑配制
    3.2 試驗方法
        3.2.1 引物設(shè)計
        3.2.2 肝臟總RNA的提取過程
        3.2.3 RNA質(zhì)量鑒定與濃度鑒定
        3.2.4 RNA提取中注意要點
        3.2.5 RNA反轉(zhuǎn)錄過程
        3.2.6 PCR擴增反應(yīng)
        3.2.7 PCR產(chǎn)物的切膠回收與連接轉(zhuǎn)化
        3.2.8 熒光定量PCR
        3.2.9 統(tǒng)計分析
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 苜蓿皂苷粗提物對肝臟LDLR基因mRNA表達的影響
        3.3.2 苜蓿皂苷粗提物對卵巢VLDLR基因mRNA表達的影響
        3.3.3 苜蓿皂苷粗提物對肝臟SREBP-2基因mRNA表達的影響
        3.3.4 苜蓿皂苷粗提物對肝臟ApoB100基因mRNA表達的影響
        3.3.5 苜蓿皂苷粗提物對卵巢Apo-VLDL-Ⅱ基因mRNA表達的影響
        3.3.6 苜蓿皂苷粗提物對肝臟CYP7A1基因mRNA表達的影響
        3.3.7 苜蓿皂苷粗提物對肝臟HMGCR基因mRNA表達的影響
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 試驗二 苜蓿皂苷粗提物對蛋雞肝臟膽固醇代謝基因表達調(diào)控的試驗方法探索
    4.1 材料方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試驗主要儀器設(shè)備與試劑配制
    4.2 試驗方法
        4.2.1 蛋雞肝臟DNA的提取
        4.2.2 核蛋白的提取
        4.2.3 探針準備及標(biāo)記
        4.2.4 探針標(biāo)記效率檢測
        4.2.5 凝膠阻滯實驗蛋白與探針孵育階段
        4.2.6 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
        4.2.7 電轉(zhuǎn)移印記
        4.2.8 化學(xué)熒光信號檢測
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 基因克隆-引物片段化分析
        4.3.2 標(biāo)記效率檢測
        4.3.3 核蛋白提取
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
英文摘要


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3453833