胰蛋白酶在臨床上主要用于抗炎消腫以及改善炎癥部位在內(nèi)的全身性血液循環(huán),有益于緩解藥物的吸收。糜蛋白酶可將炎癥部位纖維蛋白的凝結(jié)物分解,從而加快傷口愈合。胰蛋白酶和糜蛋白酶都有分解蛋白質(zhì)功能,兩者同時(shí)作用可將蛋白質(zhì)分解為小分子的多肽以及氨基酸。同時(shí)胰蛋白酶和糜蛋白酶組成的混合酶對(duì)引起奶牛乳房炎的主要革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌等都有比較明顯的抑菌效果,這兩種酶均可用于奶牛乳房炎的治療。因此,有必要在血清和牛奶中建立胰蛋白酶和糜蛋白酶的檢測(cè)方法,以便于臨床藥代動(dòng)力學(xué)的研究。胰蛋白酶和糜蛋白酶可將底物分解為對(duì)硝基苯胺（p-NA）,p-NA在405 nm波長(zhǎng)下有吸收,因此通過檢測(cè)檢測(cè)底物的消光值,計(jì)算得出酶活。為了提高復(fù)合酶在血清和牛奶中檢出的敏感性和準(zhǔn)確性,本試驗(yàn)在現(xiàn)有胰蛋白酶在奶牛血清和牛奶中活性檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改良。經(jīng)過改良的檢測(cè)方法結(jié)果顯示,在0～0.4 nmol/μL范圍內(nèi),胰蛋白酶的吸光度值與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,回歸方程Y=0.023X-0.0038,R²= 0.9996;以信噪比S/N = 3為標(biāo)準(zhǔn),在血清中最低檢測(cè)限濃度為15 ng/mL,平均回收... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略符號(hào)
上篇 文獻(xiàn)綜述
    引言
    第一章 胰蛋白酶、糜蛋白酶及復(fù)合酶制劑研究進(jìn)展
        1 胰蛋白酶的研究進(jìn)展
            1.1 胰蛋白酶的化學(xué)組成與性質(zhì)
            1.2 胰蛋白酶的生產(chǎn)工藝
                1.2.1 浸取
                1.2.2 分級(jí)鹽析、結(jié)晶
                1.2.3 溶解、分級(jí)鹽析
                1.2.4 活化
                1.2.5 除鈣、鹽析、透析、凍干
            1.3 胰蛋白酶的藥理作用
            1.4 胰蛋白酶的毒性
            1.5 胰蛋白酶的臨床應(yīng)用
        2 糜蛋白酶的研究進(jìn)展
            2.1 糜蛋白酶的化學(xué)組成與性質(zhì)
            2.2 糜蛋白酶的生產(chǎn)工藝
                2.2.1 絞碎、提取
                2.2.2 分級(jí)鹽析、結(jié)晶
                2.2.3 活化、鹽析、結(jié)晶
                2.2.4 透析、滅菌、干燥
            2.3 糜蛋白酶的藥理作用
            2.4 糜蛋白酶的毒性
            2.5 糜蛋白酶的臨床應(yīng)用
        3 其它酶制劑在畜牧生產(chǎn)中的研究進(jìn)展
            3.1 酶制劑在飼料中的作用
                3.1.1 直接分解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),提高飼料的利用率
                3.1.2 補(bǔ)充內(nèi)源酶不足,激活分泌消化功能
                3.1.3 消除抗?fàn)I養(yǎng)因子,改善消化機(jī)能
                3.1.4 提高植酸磷的利用率
                3.1.5 消化道成分位點(diǎn)轉(zhuǎn)移
            3.2 酶制劑在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
                3.2.1 在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
                3.2.2 在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
                3.2.3 在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用效果
                3.2.4 在肥育豬生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
                3.2.5 在奶牛中的應(yīng)用效果
                3.2.6 在肉牛生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
                3.2.7 在養(yǎng)羊生產(chǎn)中的應(yīng)用效果
            3.3 酶的研究目的及其意義
        4 胰蛋白酶和糜蛋白酶的檢測(cè)方法
            4.1 胰蛋白酶的檢測(cè)方法
            4.2 糜蛋白酶的檢測(cè)方法
    參考文獻(xiàn)
下篇 檢測(cè)方法研究
    第二章 奶牛血清和牛奶中胰蛋白酶檢測(cè)方法改良
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑
            1.2 主要儀器設(shè)備
            1.3 胰蛋白酶活性檢測(cè)主要溶液配制
                1.3.1 p-NA標(biāo)準(zhǔn)液的配制
                1.3.2 待測(cè)樣品的制備
                1.3.3 反應(yīng)(底物)混合體系制備
                1.3.4 鹽酸(pH3)的配制
        2 結(jié)果
            2.1 胰蛋白酶試劑盒檢測(cè)方法
            2.2 方法學(xué)建立
                2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                2.2.2 樣品檢測(cè)濃度的確定
                2.2.3 樣品的處理
                2.2.4 特異性
                2.2.5 定量限和檢測(cè)限
                2.2.6 添加回收率
                2.2.7 精密度
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第三章 奶牛血清和牛奶中糜蛋白酶檢測(cè)方法改良
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑
            1.2 主要儀器設(shè)備
            1.3 糜蛋白酶活性檢測(cè)主要溶液配制
                1.3.1 糜蛋白酶在血清中標(biāo)準(zhǔn)液的制備
                1.3.2 糜蛋白酶在牛奶中標(biāo)準(zhǔn)液的制備
                1.3.3 鹽酸溶液(pH3)的制備
        2 結(jié)果
            2.1 糜蛋白酶檢測(cè)方法
                2.1.1 檢測(cè)原理
                2.1.2 檢測(cè)過程
                2.1.3 計(jì)算公式
            2.2 方法學(xué)建立
                2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                2.2.2 樣品檢測(cè)濃度的確定
                2.2.3 樣品的處理
                2.2.4 特異性
                2.2.5 定量限和檢測(cè)限
                2.2.6 添加回收率實(shí)驗(yàn)
                2.2.7 精密度
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝



本文編號(hào)：3452003