近年來,關(guān)于大熊貓細(xì)菌性疾病的報(bào)道逐漸增多,大熊貓細(xì)菌性疾病治療手段主要為抗生素,在抗生素使用過程中細(xì)菌可能產(chǎn)生耐藥性,細(xì)菌耐藥性將對大熊貓細(xì)菌疾病治療帶來影響。因此本研究將大腸桿菌常作為耐藥性的指示菌株來調(diào)查大熊貓?jiān)醇?xì)菌的耐藥性,研究大熊貓細(xì)菌耐藥現(xiàn)狀,為臨床合理用藥提供指導(dǎo)。1.大熊貓?jiān)创竽c桿菌的分離鑒定及O血清型鑒定從四川地區(qū)采集大熊貓糞便、生殖道拭子和呼吸道拭子,分離鑒定出149株大腸桿菌；并使用玻板凝集試驗(yàn)對分離鑒定的大腸桿菌進(jìn)行了血清鑒定。結(jié)果顯示,149株大腸桿菌中有144株（144/149,96.64%）血清型得以鑒定,共覆蓋了57種血清型,優(yōu)勢血清型為O18、O60、O54、O130、O17、O99、O101、O107所占比例分別是6.71%、6.04%、4.7%、4.7%、3.36%、3.36%、3.36%、3.36%,共54株,優(yōu)勢血清型占定型菌株的37.5%。同一地域血清型種類繁多,不同地域血清型差異較大,不同地域優(yōu)勢血清型存在差異；不同年齡階段大腸桿菌血清型分布情況也不同。2.大熊貓大腸桿菌耐藥情況采用肉湯微量稀釋法,對分離鑒定的149株大腸桿菌進(jìn)行了18種抗... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 大腸埃希氏菌病概述
        1.1 大腸桿菌病原學(xué)
        1.2 大熊貓大腸桿菌病
        1.3 大熊貓大腸桿菌血清型的流行情況
    2 大熊貓大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀
    3 大腸桿菌細(xì)菌耐藥機(jī)理
        3.1 生物化學(xué)機(jī)制
            3.1.1 滅活酶或鈍化酶的產(chǎn)生
            3.1.2 細(xì)菌主動外排機(jī)制
            3.1.3 抗生素作用靶位的改變
            3.1.4 改變細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性
            3.1.5 細(xì)菌生物被膜的形成
            3.1.6 代謝途徑或代謝狀態(tài)改變
        3.2 細(xì)菌耐藥產(chǎn)生的遺傳學(xué)機(jī)制
            3.2.1 基因突變
            3.2.2 細(xì)菌間耐藥基因轉(zhuǎn)移
    4 大腸桿菌耐藥基因流行情況
    5 研究目的和意義
第二章 大熊貓?jiān)创竽c桿菌分離鑒定、血清型鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 樣本
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要溶液和試劑配制
            1.1.4 主要儀器
        1.2 方法
            1.2.1 大腸桿菌分離培養(yǎng)
            1.2.2 大腸桿菌生化鑒定
            1.2.3 大腸桿菌血清型鑒定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 大腸桿菌分離鑒定
        2.2 大熊貓?jiān)创竽c桿菌血清型鑒定
            2.2.1 149株大熊貓?jiān)创竽c桿菌血清型鑒定
            2.2.2 不同地域大熊貓大腸桿菌O血清型分布
            2.2.3 不同年齡階段和不同樣品類型大腸桿菌O血清型分布
    3 討論
        3.1 大熊貓?jiān)创竽c桿菌的分離鑒定
        3.2 大熊貓?jiān)创竽c桿菌血清型鑒定
        3.3 不同地域大熊貓大腸桿菌O血清型分布
第三章 大熊貓?jiān)创竽c桿菌的耐藥性檢測
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株
            1.1.2 抗菌藥物與試劑
            1.1.3 溶液配制
            1.1.4 主要耗材
            1.1.5 主要儀器
        1.2 方法
            1.2.1 抗菌藥液的配制及稀釋
            1.2.2 菌種接種及稀釋
            1.2.3 大腸桿菌藥物敏感試驗(yàn)
            1.2.4 結(jié)果判斷
            1.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 大熊貓大腸桿菌對18種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)
        2.2 149株大熊貓大腸桿菌對18種抗菌藥物的耐藥性
        2.3 不同年齡階段大熊貓大腸桿菌對18種抗菌藥物的耐藥分析
        2.4 不同地域大熊貓大腸桿菌對18種抗菌藥物的耐藥分析
        2.5 大熊貓?jiān)创竽c桿菌對18種抗菌藥物的多重耐藥性分析
    3 討論
第四章 大熊貓?jiān)创竽c桿菌中質(zhì)粒介導(dǎo)四環(huán)素和β-內(nèi)酰胺類相關(guān)耐藥基因檢測
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)菌株
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 培養(yǎng)基和緩沖液配制
            1.1.4 主要儀器
        1.2 方法
            1.2.1 引物設(shè)計(jì)與合成
            1.2.2 大腸桿菌質(zhì)粒提取
            1.2.3 PCR擴(kuò)增耐藥基因
            1.2.4 耐藥基因PCR產(chǎn)物T克隆
            1.2.5 目的片段測定和序列分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 質(zhì)粒圖譜
        2.2 耐藥基因的PCR檢測及測序結(jié)果
        2.3 不同地域分離菌株耐藥基因檢測
        2.4 不同年齡階段分離菌株耐藥基因檢測
        2.5 大腸桿菌O血清型與耐藥表型、耐藥基因型的相關(guān)性
    3 討論
第五章 大腸桿菌耐藥基因水平傳播機(jī)制的初步研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株
            1.1.2 培養(yǎng)基及溶液配制
            1.1.3 主要儀器
        1.2 方法
            1.2.1 質(zhì)粒結(jié)合試驗(yàn)
            1.2.2 結(jié)合轉(zhuǎn)移子的PCR鑒定及MIC測定
    2 結(jié)果
    3 討論
結(jié)論與創(chuàng)新
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]亞抑菌濃度頭孢西丁體外誘導(dǎo)大腸埃希菌耐藥轉(zhuǎn)移[J]. 韓珍,林日文,李靜.  醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐. 2012(23)
[2]2011年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]. 胡付品,朱德妹,汪復(fù),蔣曉飛,楊青,徐英春,張小江,孫自鏞,陳中舉,王傳清,王愛敏,倪語星,孫景勇,俞云松,林潔,單斌,杜艷,徐元宏,沈繼錄,張泓,孔菁,卓超,蘇丹虹,張朝霞,季萍,胡云建,艾效曼,黃文祥,賈蓓,魏蓮花,吳玲.  中國感染與化療雜志. 2012(05)
[3]大熊貓腸道大腸桿菌的分離、鑒定及其耐藥性分析[J]. 李蓓,李旭林,郭麗娟,龍梅,郭放,何雪梅,羅燕,鄒立扣.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(03)
[4]發(fā)情期大熊貓陰道分泌物細(xì)菌分析[J]. 劉燕,丁楠,李林海,趙京,夏茂華,原蕾,張成林,劉學(xué)峰.  野生動物. 2012(01)
[5]規(guī)模化豬場大腸桿菌β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性檢測及其超廣譜β-內(nèi)酰胺酶調(diào)查[J]. 田國寶,王紅寧,張安云,張毅,楊鑫,徐昌文.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(10)
[6]2010年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]. 朱德妹,汪復(fù),胡付品,蔣曉飛,倪語星,孫景勇,徐英春,張小江,胡云健,艾效曼,俞云松,楊青,孫自鏞,陳中舉,賈蓓,黃文祥,卓超,蘇丹虹,魏蓮花,吳玲,張朝霞,季萍,王傳清,王愛敏,張泓,孔菁,徐元宏,沈繼錄,單斌,杜艷.  中國感染與化療雜志. 2011(05)
[7]亞抑菌濃度三代頭孢菌素對耐藥質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移的影響[J]. 方曄,李向陽,楊錦紅,李方去.  中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2011(09)
[8]800株不同動物源大腸桿菌的耐藥性監(jiān)測[J]. 賴婧,劉洋,汪宇,秦上尚,李巖,吳聰明.  中國獸醫(yī)雜志. 2011(04)
[9]98株鴨源致病性大腸桿菌氨基糖苷類耐藥基因型與耐藥表型的比較[J]. 于學(xué)輝,黃蘭,楊曉農(nóng),劉群.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(12)
[10]寵物源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥基因流行性檢測[J]. 朱恒乾,廖曉萍,陳朝喜,王秀梅,孫堅(jiān),孫迎,李亮,張美君,劉雅紅.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(16)



本文編號：3450572