為研究近年來禽致病性大腸桿菌（APEC）的耐藥性,本研究室于2018年～2019年對江蘇北部及周邊地區(qū)228份水禽組織病料樣品（鴨頭、鴨肝樣品;鵝頭、鵝肝樣品）進行了細菌分離培養(yǎng)和APEC的PCR鑒定。對分離到的APEC菌株采用K-B紙片法進行藥敏試驗;同時對其碳青霉烯類、β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、磺胺類、粘菌素類、喹諾酮類、四環(huán)素類7大類共計16種耐藥基因進行了PCR檢測。結(jié)果顯示,在分離到的細菌中,共鑒定出50株APEC菌株。藥敏試驗結(jié)果顯示,APEC分離菌株對四環(huán)素、氨芐西林、氟苯尼考耐藥性較強,耐藥菌株分別占100%、96%、86%;對頭孢噻肟、恩諾沙星、鏈霉素、氧氟沙星中等耐藥,耐藥菌株分別占76%、70%、58%、36%;對美羅培南、呋喃妥因、丁胺卡那霉素的耐藥性較低,耐藥菌株僅分別占4%、4%、6%。其中多重耐藥性較嚴重,耐4、5、6、7種抗生素的現(xiàn)象較普遍。在對其β-內(nèi)酰胺類的耐藥基因檢測中,CTX-M、TEM、SHV的檢出率分別為60%、58%、20%;氨基糖苷類:ant（3’’）-I a、aac（3’）-I b的檢出率分別為0,50%（25/50）;磺胺類sul I... 

【文章來源】：中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2020,42(05)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

圖1 分離菌株的革蘭氏染色結(jié)果（1 000×)

對分離菌株的耐藥基因進行PCR檢測，結(jié)果顯示，碳青霉烯類耐藥基因NDM的檢出率為4%(2/50），未檢出KPC、GES、SME、IMI基因；β-內(nèi)酰胺類：TEM的檢出率為58%(29/50),CTX-M的檢出率為60%(30/50),SHV的檢出率為20%(10/50）；氨基糖苷類：ant(3"")-Ia）的檢出率為0,aac(3")-Ib的檢出率為50%(25/50）；磺胺類：sul I的檢出率為82%(41/50）；粘菌素類：mcr-1的檢出率為6%(3/50）；喹諾酮類：qnrB的檢出率為68%(34/50),parC的檢出率為98%(49/50）；四環(huán)素類：tetA的檢出率為66%(33/50),tetB的檢出率為10%(5/50）。表明分離的APEC對parC、sul I、qnrB、CTX-M的耐藥基因檢出率較高，且其對美羅培南、頭孢噻肟、四環(huán)素的耐藥表型與其耐藥基因均存在相關(guān)性。2.4 分離APEC的改良Hoge試驗結(jié)果

在2.2的藥敏試驗中發(fā)現(xiàn)了2株對碳青霉烯類抗生素美羅培南耐藥的APEC，且該兩株APEC均攜帶碳青霉烯類耐藥基因NDM，將其命名為EC162、EC171。經(jīng)改良Hoge試驗結(jié)果顯示，平板中的抑菌圈出現(xiàn)了類似蘋果蒂樣的形狀，是由于EC162和EC171產(chǎn)生的碳青霉烯酶擴散到了美羅培南產(chǎn)生的抑菌圈區(qū)域中水解了該抗生素，使得該該區(qū)域中沒有足夠的美羅培南抑制大腸桿菌ATCC25922，使ATCC25922出現(xiàn)了類似蘋果蒂樣形狀的增強性生長（圖3）。確認2株菌均產(chǎn)碳青霉烯酶，可以水解碳青霉烯類抗生素，所以其對碳青霉烯類抗生素菌耐藥。3 討論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]致蛋雞卵黃性腹膜炎大腸桿菌分子分群、耐藥表型及耐藥基因型檢測與分析[J]. 張召興,李佩國,李蘊玉,賈青輝,張香齋,吳同壘,張志強.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2019(09)
[2]大腸埃希菌PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 趙鳳菊,顧貴波,李井春,王竹.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2016(08)

博士論文
[1]畜禽源碳青霉烯耐藥菌新型金屬β-內(nèi)酰胺酶變異體耐藥機制研究[D]. 劉志海.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018

碩士論文
[1]革蘭陰性桿菌耐碳青霉烯藥物機制研究[D]. 代志峰.鄭州大學(xué) 2015



本文編號：3449612