發(fā)布時間：2021-10-21 00:46

　　口蹄疫（FMD）是由FMD病毒（FMDV）引起的牛、豬、羊等偶蹄動物發(fā)生的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，國際獸醫(yī)局將其列為“A類烈性傳染病”之首，一旦爆發(fā)，必須捕殺感染及接觸感染的動物，不僅造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且嚴(yán)重危害畜牧業(yè)的發(fā)展。目前，大多數(shù)流行FMD的國家以疫苗免疫為主的措施預(yù)防FMD。然而，F(xiàn)MDV具有7個血清型且變異快，不同血清型疫苗之間沒有交叉免疫保護(hù)反應(yīng)，故通過疫苗單一手段很難控制和根除FMD，因此科學(xué)家們在注重疫苗研發(fā)的同時，開始關(guān)注病毒和宿主之間的關(guān)系，尤其是病毒受體在病毒感染過程中的作用，期望通過敲除或沉默病毒的關(guān)鍵受體阻斷病毒的感染，進(jìn)而達(dá)到控制和根除FMD的目的。研究表明，整聯(lián)蛋白（Integrin） αvβ6是FMDV感染并致病的最重要的病毒受體，它可與所有血清型的FMDV結(jié)合。敲除整聯(lián)蛋白通用亞基αv基因的轉(zhuǎn)基因小鼠死胎率高、生長發(fā)育異常且易發(fā)生腫瘤，因此，αv基因不是抗FMD研究的理想受體基因；β6是啟動FMDV強(qiáng)毒感染的決定性受體亞基，敲除整聯(lián)蛋白β6亞基基因的轉(zhuǎn)基因小鼠生長發(fā)育正常。因此，敲除整聯(lián)蛋白β6亞基是阻斷病毒感染的關(guān)鍵途徑，為研制控制和... 

【文章來源】：山東師范大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ZFN結(jié)構(gòu)及結(jié)合靶位點(diǎn)示意圖

圖 2：ZFN 介導(dǎo)的定點(diǎn)修飾2.3.1 鋅指核酸酶介導(dǎo)的定點(diǎn)敲除非同源末端連接是一種DNA自發(fā)修復(fù)損傷的方式。DNA發(fā)生DSB時，通過修復(fù)，細(xì)胞將兩個DNA末端連接起來，可能造成小片段DNA的添加或缺失，進(jìn)

細(xì)胞鋪培養(yǎng)皿第二天，細(xì)胞長至 50%左右，細(xì)胞呈梭形、多角形等典型的纖維細(xì)胞形態(tài)（圖 1-1），第三天細(xì)胞長至 80%-90%，此時細(xì)胞幾乎鋪滿單層細(xì)胞呈放射狀、旋渦狀等的走行形式（圖 1-2）。傳至 25 代左右，細(xì)胞生長緩慢變大，很難長滿單層。共凍存 F0及 F1代原代培養(yǎng)細(xì)胞 89 管，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用


本文編號：3447914