自噬是一種細(xì)胞內(nèi)保守的蛋白及廢物降解機(jī)制，同時(shí)也在細(xì)胞清除病原的過程中發(fā)揮重要作用。在不同病毒的感染過程中，自噬扮演了不同的角色。至今未見IBDV與自噬關(guān)系的研究。本研究中，我們以DF-1細(xì)胞為模型研究了IBDV與細(xì)胞自噬的關(guān)系。為了解IBDV感染DF-1細(xì)胞后自噬的變化情況，檢測了IBDV感染細(xì)胞后內(nèi)源性LC3以及GFP-LC3的變化情況。IBDV感染DF-1和293T細(xì)胞后，LC3-II在0-2小時(shí)表現(xiàn)為顯著的上調(diào)，而在4-6小時(shí)下降。同樣的， IBDV感染GFP-LC3轉(zhuǎn)化的DF-1和293T細(xì)胞中，GFP-LC3在2小時(shí)呈現(xiàn)大量的點(diǎn)狀分布，而在感染后4小時(shí)這些點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)消失。P62在IBDV感染過程中出現(xiàn)了同步變化。這些數(shù)據(jù)證明在病毒感染早期DF-1和293T細(xì)胞的自噬被強(qiáng)烈誘導(dǎo)，在病毒感染4小時(shí)后，自噬水平被抑制。綜上所述，IBDV感染在早期誘導(dǎo)了細(xì)胞的自噬，而后抑制了細(xì)胞自噬。何種因素導(dǎo)致了細(xì)胞在感染2小時(shí)內(nèi)發(fā)生了自噬，為了解釋這一現(xiàn)象，我們對病毒編碼的蛋白影響自噬的情況進(jìn)行了分析，證明僅VP2蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。然而VP2蛋白通過何種途徑誘導(dǎo)自噬？在研究中，我們發(fā)現(xiàn)病毒蛋白V... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

IBDV病毒粒子模式圖

12a，自噬直接包裹HSV-1，并運(yùn)送至溶酶體進(jìn)行降解。b，自噬可以參VSV的免疫響應(yīng)的信號調(diào)節(jié)作用中。自噬系統(tǒng)把VSV的RNA復(fù)制細(xì)胞質(zhì)中轉(zhuǎn)移到包含TLR7的內(nèi)涵體腔里，促進(jìn)I型干擾素的產(chǎn)生噬也可以通過對MEF中的RIG-1,IPS-1活性的抑制和減少因在初級胞中線粒體的機(jī)能缺陷而產(chǎn)生的ROS來阻抑RLR的信號I型干擾素圖 1-2：細(xì)胞自噬與病毒的作用關(guān)系。（引自：Kim, H. JSemin Immunopathol，2010， 32:323–341）Fig1-2: Autophagy and virus

23照、IBDV 感染（IBDV）和滅活病毒感染（HE-IBDV）對 DF影響. 活 IBDV ( A 圖), 熱滅活 IBDV(B 圖) ，對照感染 0-8 小3-II 型和 P62 的變化情況. (F-E) 對上述 WB 結(jié)果進(jìn)行灰度和 Affection of mock, IBDV infection and HE-IBDV on autophagf live IBDV (A) ， HE-IBDV (B) or mock infection (C) on chang1 cells. (F-E) Stastic analysis of WB results from (A-C).hpi(MOI=0 1 2 4 6 80

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]傳染性法氏囊病毒的抗原及分子特征(英文)[J]. 周繼勇,葉菊秀,葉偉成,陳慶新,鄭肖娟,郭軍慶.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(01)



本文編號：3445441