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miR-27a在白色和棕色絨山羊皮膚中的差異表達(dá)及其靶基因鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-10-18 15:56
  我國是羊絨產(chǎn)量大國,且品種資源豐富,其中遼寧絨山羊是東北地區(qū)的一個(gè)本土品種,該品種遺傳性狀穩(wěn)定,不僅產(chǎn)絨量高而且品質(zhì)好,有“軟黃金”的美譽(yù)。其羊絨產(chǎn)量最高記錄分別為成年雄性1800克和成年雌性845克。羊絨是重要的紡織原料,但顏色相對單一,不能滿足人們的生活需求。生產(chǎn)中,白羊毛因其可被染成不同的顏色而在紡織行業(yè)中具有較高的價(jià)值,然而,化學(xué)染料的應(yīng)用不僅損害身體健康,還會(huì)造成環(huán)境污染。因此通過基因調(diào)控技術(shù)改變動(dòng)物毛色,培育出更多自然色的產(chǎn)毛動(dòng)物品種成為當(dāng)前迫切需要解決的問題。MicroRNAs(MiRNAs)是一種單鏈非編碼小RNA,長度為19-23個(gè)核苷酸,其參與轉(zhuǎn)錄后水平的靶基因調(diào)控,且對幾乎所有動(dòng)物器官的靶基因都可以進(jìn)行微調(diào)。近年來,許多報(bào)道表明miRNAs在控制皮膚形態(tài)發(fā)生、毛囊發(fā)育和被毛顏色等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。研究者利用高通量測序技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),miR-27a在白色和棕色羊駝皮膚組織中有顯著的表達(dá)差異,表明miR-27a可能參與動(dòng)物毛色的形成。因此本研究選擇miR-27a作為研究目標(biāo),探索其在絨山羊毛色形成中的作用。本研究首先通過熒光定量PCR技術(shù)驗(yàn)證miR-27a在白色和棕色絨... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

miR-27a在白色和棕色絨山羊皮膚中的差異表達(dá)及其靶基因鑒定


黑色素合成過程[5]

動(dòng)物,途徑,前體


第一部分文獻(xiàn)綜述第二章microRNAs的研究進(jìn)展8第二章microRNAs的研究進(jìn)展MicroRNAs(MiRNAs)是一種內(nèi)源性的非編碼單鏈小RNA,具有19-23個(gè)核苷酸,它們可以通過降解靶mRNA或抑制翻譯來實(shí)現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控作用。miRNAs屬于高度保守分子,即在同物種的不同個(gè)體間或不同物種間都是相似的,且它們在細(xì)胞生物學(xué)中扮演著重要的角色。當(dāng)前,報(bào)道顯示這些分子被認(rèn)為是基因表達(dá)最重要的調(diào)控因子之一,據(jù)統(tǒng)計(jì),miRNAs可以靶向約三分之一的人類基因[42]。1miRNAs的生成過程miRNAs生成過程涉及復(fù)雜的蛋白質(zhì)系統(tǒng)(如圖2.1),并始于RNA聚合酶II作用下轉(zhuǎn)錄形成長的初級miRNA(pri-miRNA)。隨后,這些轉(zhuǎn)錄物通過Drosha及其輔助因子DGCR8(DiGeorge)的RNaseIII核酸內(nèi)切酶在細(xì)胞核中加工成70nt長的莖環(huán)結(jié)構(gòu)(發(fā)夾結(jié)構(gòu))的前體miRNA(pre-miRNA)。pre-miRNA通過exportin-5從細(xì)胞核運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)。在這里,前體miRNA被第二個(gè)核糖核酸酶Dicer進(jìn)一步加工成雙鏈RNA,其包含成熟的miRNA鏈及其互補(bǔ)鏈;パa(bǔ)鏈?zhǔn)潜唤到,而成熟miRNA鏈被合并進(jìn)入RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)用來靶向降解mRNA[43]。成熟miRNA生成的整個(gè)過程受多種機(jī)制調(diào)控,且處于miRNA生物發(fā)生的各個(gè)階段。圖2.1動(dòng)物中典型的miRNA生物發(fā)生途徑Fig2.1ThecanonicalmiRNAbiogenesispathwayinanimal

山羊皮,棕色,白色,黑色素


第二部分研究內(nèi)容第一章miR-27a在白色和棕色絨山羊皮膚的表達(dá)差異18圖1.1miR-27a在白色和棕色絨山羊皮膚中的表達(dá)情況Fig1.1ThemRNAexpressionofmiR-27aintheskinofwhiteandbrownCashmeregoats4討論絨山羊是世界上最重要的毛皮動(dòng)物之一,在養(yǎng)殖行業(yè)占很大比列,且在人們的生產(chǎn)生活及經(jīng)濟(jì)創(chuàng)收方面發(fā)揮重要作用[81]。其羊毛纖維直徑、長度和顏色是決定絨山羊經(jīng)濟(jì)價(jià)值的關(guān)鍵性狀,且這些性狀是由環(huán)境和遺傳共同決定的[82]。毛色作為一種常見的育種目標(biāo),大量報(bào)道已揭示它是由皮膚黑色素細(xì)胞合成的黑色素的類型和比例決定的。近年來,由于綠色革命和消費(fèi)者對自然產(chǎn)品的偏好,人們對自然顏色加工衣物的熱情增長,所以影響毛色形成的因素越來越引起人們的興趣。近年來的報(bào)道表明,大量的miRNAs與哺乳動(dòng)物皮毛顏色的形成有關(guān)。例如:Zhang等[31]人證明了miR-508-3p可以直接靶向MITF基因調(diào)節(jié)羊駝黑素細(xì)胞的黑色素合成;利用STTM技術(shù)可以抑制miR-508在羊駝黑色素細(xì)胞中的表達(dá),從而上調(diào)SOX6的表達(dá),導(dǎo)致黑色素合成關(guān)鍵基因MITF、TYR、TRP-1和TRP-2的表達(dá)增加,使黑色素合成升高[71]。miR-21a-5p通過靶向負(fù)調(diào)控SOX5,導(dǎo)致下游基因MITF的表達(dá)量升高,從而使黑色素合成升高[72]。Tian等[7]人利用高通量測序技術(shù)檢測揭示了miR-27a在白色和棕色羊駝皮膚中表達(dá)差異顯著;Apopo等[8]人也通過高通量測序揭示了miR-27a在白色鴨羽毛表達(dá)顯著高于黑色鴨羽毛,這表明miR-27a可能與動(dòng)物被毛顏色的形成有關(guān)。本試驗(yàn)利用熒光

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[3]miR-27a-3p抑制B4GALT3表達(dá)對胃癌BGC-823細(xì)胞增殖和侵襲的影響及機(jī)理研究[D]. 楊淑梅.南華大學(xué) 2018
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[8]MiR-125b在細(xì)毛羊與絨山羊皮膚組織中差異表達(dá)及其靶基因的篩選與鑒定[D]. 曲海娥.吉林大學(xué) 2014
[9]sFRP5抑制Wnt3a對黑素細(xì)胞黑素形成作用的研究[D]. 湯寅虹.重慶醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號:3443076

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