奶牛乳房炎是造成當(dāng)今國(guó)內(nèi)外奶牛業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的主要疾病之一。金黃色葡萄球菌可導(dǎo)致各種化膿性疾病、乳腺炎、敗血癥等,引起的奶牛乳房炎在臨床上最難治愈并造成經(jīng)濟(jì)損失最大。臨床上對(duì)奶牛乳房炎的治療主要采用抗生素療法,但抗生素對(duì)乳房炎的治愈率較低。噬菌體是一種感染細(xì)菌的病毒,僅能夠裂解特定的細(xì)菌,而不會(huì)損傷機(jī)體細(xì)胞和正常菌群,可作為抗菌物質(zhì),用于治療人畜的細(xì)菌感染性疾病。本文從患奶牛乳房炎的牛奶中分離了 2株葡萄球菌噬菌體分別命名為JS01和WH01,并從形態(tài)和生物學(xué)特性方面進(jìn)行了鑒定。透射電鏡表明JS01和WH01分別屬于長(zhǎng)尾噬菌體科（Siphoviridae）和肌尾噬菌體科（Myoviridae）,頭部直徑分別為50nm和200nm,尾部長(zhǎng)度分別為200nm和40nm。WH01宿主譜廣泛,不僅能裂解不同來(lái)源的金黃色葡萄球菌,也能裂解腐生葡萄球菌、產(chǎn)色葡萄球菌等。而JS01宿主譜較WH01窄,僅能裂解部分牛源的金黃色葡萄球菌。兩株噬菌體均在MOI=1時(shí),噬菌體滴度最大。JS01和WH01的潛伏期分別為10min和60min;生長(zhǎng)期分別為30min和20min;平均裂解量為78PFU/cell和9... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 奶牛金黃色葡萄球菌乳房炎研究進(jìn)展
        1 奶牛乳房炎概況
        2 金黃色葡萄球菌的主要特性
        3 金黃色葡萄球菌的主要危害
        4 金黃色葡萄球菌的毒力因子
            4.1 非分泌型的金黃色葡萄球菌表面因子
            4.2 分泌型金黃色葡萄球菌毒力因子(毒素和酶)
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 葡萄球菌噬菌體的研究進(jìn)展
        1 金黃色葡萄球菌噬菌體的分類
            1.1 噬菌體的形態(tài)分類
            1.2 噬菌體的生活周期分類
        2 溶原噬菌體與細(xì)菌毒力的關(guān)系
            2.1 細(xì)菌溶原現(xiàn)象的發(fā)生
            2.2 前噬菌體在細(xì)菌感染致病方面的作用
            2.3 噬菌體進(jìn)化和溶原轉(zhuǎn)換
            2.4 前噬菌體影響毒素的產(chǎn)生和釋放
        3 烈性噬菌體在治療細(xì)菌性疾病的作用
            3.1 噬菌體治療的歷史
            3.2 噬菌體治療的特點(diǎn)
            3.3 應(yīng)用葡萄球菌噬菌體治療的現(xiàn)狀
        4 葡萄球菌噬菌體基因組的研究
            4.1 金黃色葡萄球菌噬菌體基因組分類
            4.2 金黃色葡萄球菌噬菌體基因組的特點(diǎn)
        5 結(jié)論
        參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
    第三章 金黃色葡萄球菌噬菌體分離及生物特性研究
        1 材料和方法
            1.1 試劑和儀器
            1.2 奶樣的采集和保存
            1.3 金黃色葡萄球菌的分離鑒定
            1.4 金黃色葡萄球菌噬菌體的分離、誘導(dǎo)和純化
            1.5 噬菌體形態(tài)的電鏡觀察
            1.6 宿主譜的測(cè)定
            1.7 最適感染復(fù)數(shù)測(cè)定
            1.8 一步生長(zhǎng)曲線測(cè)定
            1.9 噬菌體穩(wěn)定性測(cè)定
            1.10 噬菌體基因組的酶切圖譜分析
            1.11 噬菌體顆粒的SDS-PAGE分析
        2 結(jié)果
            2.1 金黃色葡萄球菌的分離鑒定
            2.2 噬菌體的分離與純化
            2.3 噬菌體形態(tài)
            2.4 宿主譜
            2.5 最適MOI的測(cè)定
            2.6 噬菌體一步生長(zhǎng)曲線
            2.7 噬菌體的穩(wěn)定性
            2.8 噬菌體核酸的酶切圖譜
            2.9 噬菌體顆粒的SDS-PAGE
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第四章 金黃色葡萄球菌噬菌體JSOI基因組測(cè)序和比較基因組學(xué)分析
        1 材料與方法
            1.1 噬菌體DNA的提取
            1.2 噬菌體全基因組序列測(cè)序,序列拼接
            1.3 基因組ORF的預(yù)測(cè)和序列的比對(duì)
        2 結(jié)果與討論
            2.1 JS01基因組的一般特征
            2.2 JS01比較基因組分析
            2.3 比較基因組分析JS01與金黃色葡萄球菌和前噬菌體
        3 結(jié)論
        參考文獻(xiàn)
    第五章 噬菌體JS01功能基因的表達(dá)純化及活性分析
        1 材料和方法
            1.1 菌株和試劑
            1.2 模板DNA的提取
            1.3 引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增
            1.4 表達(dá)載體構(gòu)建
            1.5 重組蛋白的表達(dá)
            1.6 純化蛋白
            1.7 蛋白活性檢測(cè)
        2 結(jié)果
            2.1 lys和sak的克隆
            2.2 lys和sak表達(dá)
            2.3 蛋白的活性檢測(cè)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
碩士期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]奶牛乳腺炎防治的免疫學(xué)和藥理學(xué)機(jī)制[J]. 伍義行,黃利權(quán).  乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2001(04)



本文編號(hào)：3439531