小反芻獸疫（Peste des Petits Ruminants,PPR）是由小反芻獸疫病毒（Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV）引起的一種急性、高度傳染性、致命性疾病,主要感染偶蹄小反芻動物。該病主要表現(xiàn)為發(fā)熱,口腔炎,肺炎,結(jié)膜炎,眼鼻粘膜膿性分泌物,嚴(yán)重腹瀉,高發(fā)病率和死亡率。PPRV屬于副黏病毒科麻疹病毒屬,其基因組編碼6個結(jié)構(gòu)蛋白和2個非結(jié)構(gòu)蛋白。雖然PPRV各蛋白的結(jié)構(gòu)、功能等分子生物學(xué)的相關(guān)研究已經(jīng)取得進展,但其分子致病機制和免疫機制仍然缺乏相關(guān)信息。而病原與宿主的互作是研究其分子致病機制的途徑,目前PPRV該方面的研究比較少。本論文以病毒與宿主蛋白的互作為切入點,研究核仁素在小反芻獸疫病毒復(fù)制過程中的作用及其機制。PPRV N蛋白高度保守且免疫原性最高,在病毒復(fù)制和細(xì)胞趨向性中發(fā)揮重要作用。另外,PPRV N蛋白與許多宿主調(diào)節(jié)因子相互作用。因此,本研究旨在通過免疫共沉淀實驗及質(zhì)譜分析篩選與PPRV N蛋白互作的宿主蛋白。我們成功的篩選到了宿主分子核仁素（NCL）,隨后通過Co-IP、GST-pull down實驗進一步證實了NCL... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

小反芻獸疫病毒結(jié)構(gòu)示意圖(Liuetal.,2014)

圖 1.2 PPRV 復(fù)制模式示意圖(Kumar et al., 2014)過 HN 蛋白吸附到宿主細(xì)胞受體(SLAM/Nectin-4)表面。(2)病毒通過 F 和 HN 蛋白與胞膜融釋放到胞質(zhì)中。(4)通過病毒編碼核糖核蛋白的 RdRp 進行基因組復(fù)制。(5)由病毒編碼的 Rd（控制單個蛋白質(zhì)產(chǎn)生數(shù)量的機制）合成 mRNA。(6)全長正義 RNA（反基因組 RNA 或互補病毒蛋白的合成：F 和 H 蛋白在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（7A1）合成并穿過高爾基復(fù)合體（7A2）進行翻

圖 1.3 核仁素的結(jié)構(gòu)示意圖(Tajrishi et al., 2011)動物、植物和酵母中核仁素和核仁素樣蛋白主要序列域的示意圖。酸性伸展主要表現(xiàn)在 N 端區(qū)域，RRMs 在框中著色，GAR 區(qū)域以不同長度的條框表示。Fig.1.3 Schematic diagram of nucleolin structure(Tajrishi et al., 2011).Schematic representation of domain diagram of the primary sequence of nucleolin and nucleolin-like proteins in animal,


本文編號：3439299