本文旨在從湖南省安仁縣固態(tài)酒藥中篩選異常畢赤酵母（Pichia anonmala）,對其生化特性、最適培養(yǎng)條件及安全性評價進(jìn)行研究,并探究日糧添加異常畢赤酵母對斷奶仔豬生長與健康的影響及其機(jī)制。本研究內(nèi)容分為以下三個試驗(yàn)。試驗(yàn)一:通過傳統(tǒng)分類學(xué)和分子生物學(xué)方法從固態(tài)酒藥中篩選異常畢赤酵母,并測定其粗蛋白質(zhì)、氨基酸含量、嗜殺活性,優(yōu)化其培養(yǎng)條件。結(jié)果表明:（1）分離得到1株高蛋白菌株,經(jīng)26S rDNA基因序列測定被鑒定為異常畢赤酵母（Pichia anomala）,命名為AR₂₀₁₆。（2）菌株AR₂₀₁₆粗蛋白質(zhì)含量為59.56%,含有17種氨基酸,其最佳培養(yǎng)條件為:初始pH 5.0,生長溫度28oC,轉(zhuǎn)速180 r/min。試驗(yàn)二:通過測定異常畢赤酵母耐熱、耐膽鹽、耐胃腸液能力評價其有效性。為了評價異常畢赤酵母安全性,先選擇20只昆明小鼠,隨機(jī)分為2組（每組10只）,雌雄各占1/2。按最大灌胃容量20 mL/kg進(jìn)行7 d經(jīng)口毒性試驗(yàn),對照組灌喂生理鹽水,試驗(yàn)組灌喂2×10⁹ cfu/mL異常畢赤酵母菌液;再選擇40... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1.斷奶應(yīng)激對仔豬生長與健康的影響
        1.1 斷奶對仔豬消化道的影響
        1.2 斷奶對仔豬腸道結(jié)構(gòu)及免疫功能的影響
        1.3 斷奶對仔豬微生物區(qū)系的影響
    2.酵母資源及其鑒定方法
        2.1 酵母資源
        2.2 酵母的鑒定方法
            2.2.1 傳統(tǒng)鑒定方法
            2.2.2 分子生物學(xué)鑒定方法
    3.酵母的有效性性及安全性
    4.酵母相關(guān)的主要產(chǎn)品
        4.1 活性酵母
        4.2 酵母提取物
        4.3 酵母培養(yǎng)物
        4.4 酵母發(fā)酵飼料
    5.酵母對仔豬上的益生作用
        5.1 促進(jìn)仔豬消化道健康
        5.2 增強(qiáng)仔豬腸道免疫功能
        5.3 保護(hù)仔豬腸道屏障完整性
        5.4 維持仔豬腸道微生物區(qū)系平衡
    6.產(chǎn)朊假絲酵母及其應(yīng)用
    7.異常畢赤酵母及其應(yīng)用
    8.研究目的和意義
第二部分 引言
第三部分 試驗(yàn)研究
    第一章 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株分離鑒定及其優(yōu)化培養(yǎng)
        1.材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料與儀器
            1.2 培養(yǎng)基
            1.3 樣品采集與菌株分離鑒定
                1.3.1 樣品采集
                1.3.2 菌株分離
                1.3.3 26S rDNA鑒定
            1.4 菌株AR_(2016) 生物量及粗蛋白和氨基酸的測定
            1.5 菌株AR_(2016) 嗜殺活性的檢測方法
            1.6 菌株AR_(2016) 培養(yǎng)條件的優(yōu)化
                1.6.1 菌株AR_(2016) 種子液的制備
                1.6.2 初始pH值對菌株AR_(2016) 生長的影響
                1.6.3 培養(yǎng)溫度對菌株AR_(2016) 生長的影響
                1.6.4 培養(yǎng)轉(zhuǎn)速對菌株AR_(2016) 生長的影響
            1.7 數(shù)據(jù)處理
        2.結(jié)果與分析
            2.1 菌株的特征
                2.1.1 菌株的菌落特征
                2.1.2 菌株的細(xì)胞形態(tài)
                2.1.3 菌株AR_(2016) 生理生化特點(diǎn)
            2.2 菌株AR_(2016) 分子生物學(xué)鑒定
                2.2.1 BLAST分析
                2.2.2 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹
            2.3 菌株AR_(2016) 生物量、粗蛋白質(zhì)和氨基酸的含量
            2.4 菌株AR_(2016) 的嗜殺活性
            2.5 菌株AR_(2016) 培養(yǎng)條件的優(yōu)化
                2.5.1 初始pH值對菌株AR_(2016) 生長的影響
                2.5.2 溫度對菌株AR_(2016) 生長的影響
                2.5.3 轉(zhuǎn)速對菌株AR_(2016) 生長的影響
        3.討論
        4.小結(jié)
    第二章 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株有效性與安全性評價
        1.材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
                1.1.1 供試菌株
                1.1.2 培養(yǎng)基
                1.1.3 試劑與儀器
            1.2 試驗(yàn)動物及其飼養(yǎng)管理
            1.3 試驗(yàn)方法
                1.3.1 菌株AR_(2016) 的熱耐受能力
                1.3.2 菌株AR_(2016) 的酸耐受能力
                1.3.3 菌株AR_(2016) 的豬膽鹽耐受能力
                1.3.4 配制人工胃液和人工腸液
                1.3.5 模擬人工胃腸液
                1.3.6 7d經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)
                1.3.7 28d經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)
                1.3.8 樣品采集
                1.3.9 生化指標(biāo)及血常規(guī)測定
            1.4 數(shù)據(jù)處理
        2.結(jié)果與分析
            2.1 菌株AR_(2016) 的熱耐受能力
            2.2 菌株AR_(2016) 的酸耐受能力
            2.3 菌株AR_(2016) 的豬膽鹽耐受能力
            2.4 模擬人工胃腸液耐受能力
            2.5 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株的毒性和易位性
            2.6 口服異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株后小鼠血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果
            2.7 口服異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株后小鼠血常規(guī)測定結(jié)果
            2.8 口服異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株后小鼠血清細(xì)胞因子測定結(jié)果
        3.討論
            3.1 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株的有效性
            3.2 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株的安全性
                3.2.1 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株的毒性和易位性
                3.2.2 異常畢赤酵母AR_(2016)菌株對昆明小鼠生理生化指標(biāo)和血常規(guī)的影響
                3.2.3 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對昆明小鼠免疫功能的影響
        4.小結(jié)
    第三章 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬生長與健康的影響研究
        1.材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
                1.1.1 試驗(yàn)菌株
                1.1.2 主要試劑與儀器
            1.2 試驗(yàn)設(shè)計與日糧組成
            1.3 試驗(yàn)方法
                1.3.1 樣品采集
                1.3.2 計算腹瀉率
                1.3.3 生長性能的測定
                1.3.4 血漿生化指標(biāo)的測定
                1.3.5 回腸黏膜組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的測定
                1.3.6 空腸和回腸黏膜屏障相關(guān)蛋白的相對表達(dá)量
                1.3.7 空腸和回腸黏膜基因mRNA水平的相對表達(dá)量
                1.3.8 盲腸微生物區(qū)系測序
                1.3.9 空腸和回腸微生物脫羧酶的測定
            1.4 數(shù)據(jù)分析
        2.試驗(yàn)結(jié)果
            2.1 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響
            2.2 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)的影響
            2.3 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬消化酶活性的影響
            2.4 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬回腸黏膜組織形態(tài)的影響
            2.5 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬腸道黏膜蛋白水平表達(dá)的影響
            2.6 異常畢赤酵母AR_(2016) 菌株對斷奶仔豬腸道黏膜mRNA水平表達(dá)的影響
            2.7 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬盲腸微生物區(qū)系的影響
            2.8 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬腸道微生物脫羧酶活性的影響
        3.討論
            3.1 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響
            3.2 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響
            3.3 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬消化酶活性的影響
            3.4 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬回腸黏膜組織形態(tài)的影響
            3.5 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬腸道黏膜相關(guān)蛋白蛋相對表達(dá)量的影響
            3.6 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬腸道黏膜相關(guān)基因mRNA相對表達(dá)量的影響
            3.7 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬盲腸微生物區(qū)系的影響
            3.8 異常畢赤酵母AR_(2016) 對斷奶仔豬微生物脫羧酶的影響
        4.小結(jié)
第四部分 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)及展望
    1.結(jié)論
    2.創(chuàng)新點(diǎn)
    3.有待進(jìn)一步解決的問題
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬腸上皮緊密連接蛋白研究進(jìn)展[J]. 宗秋芳,欽偉云,霍永久,吳圣龍,包文斌.  浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2018(08)
[2]豬源益生菌對胃腸道環(huán)境、高溫的耐受性以及體外抑菌效果研究[J]. 宋獻(xiàn)藝,張凱,周勝花.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(13)
[3]4株乳酸菌對模擬胃腸環(huán)境的耐受性及生長特性研究[J]. 云月英,徐娟,張小利.  中國釀造. 2018(03)
[4]仔豬斷奶應(yīng)激對腸道功能和組織結(jié)構(gòu)影響的研究[J]. 于光輝,姜建陽,王西彤,張華杰,耿梅,宋春陽.  中國獸醫(yī)雜志. 2018(02)
[5]微生態(tài)制劑調(diào)節(jié)便秘、腹瀉人群腸道菌群結(jié)構(gòu)與產(chǎn)短鏈脂肪酸關(guān)鍵菌屬的相關(guān)性[J]. 臧凱麗,江巖,孫勇,陳慶森,趙林森,趙培,崔文靜,馬新穎,閆亞麗.  食品科學(xué). 2018(05)
[6]傳統(tǒng)發(fā)酵食品中耐胃腸道環(huán)境乳酸菌的篩選及其在酸乳發(fā)酵中的應(yīng)用[J]. 孫敏,袁鳳霞,曹曉虹,劉建利,王軍節(jié),張琇,李靖宇,覃璐琪,鄧鵬程,王曉丹.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2018(03)
[7]谷氨酸和天冬氨酸對斷奶仔豬生長性能和腸道功能的影響[J]. 黎育穎,尹杰,王利劍,何流琴,王倩,吳飛,姚繼明,范文君,李鐵軍.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2017(11)
[8]益生菌安全性和有效性評價方法的研究進(jìn)展[J]. 馮媛媛,喬琳,姚宏明,劉蕊,介琳霞,高長斌.  中國畜牧獸醫(yī). 2017(07)
[9]日糧中添加釀酒酵母對斷奶仔豬小腸黏膜消化酶及免疫功能基因mRNA表達(dá)水平的影響[J]. 王斌星,何歡,郭春華,張斌,高彥華,楊加豹,陳瑾.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(13)
[10]微生態(tài)制劑在畜禽飼料中的合理使用[J]. 王洪亮.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(05)

博士論文
[1]富鋅益生素對蛋雞生產(chǎn)性能及免疫功能的影響[D]. 王金和.吉林大學(xué) 2017
[2]社群環(huán)境下的短尾猴腸道微生物群落結(jié)構(gòu)及適應(yīng)進(jìn)化[D]. 孫丙華.安徽大學(xué) 2016

碩士論文
[1]益生菌制劑對斷奶仔豬腸道黏膜屏障功能的影響及其機(jī)理的研究[D]. 龐敏.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[2]益生菌復(fù)合微生態(tài)制劑的制備工藝及免疫功能研究[D]. 田木.吉林大學(xué) 2015
[3]復(fù)合微生態(tài)制劑在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究[D]. 宋良敏.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[4]異常畢赤酵母（Pichia anomala）HN1-2菌株產(chǎn)單細(xì)胞蛋白和嗜殺因子的研究[D]. 孫懷永.中國海洋大學(xué) 2012
[5]酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬生產(chǎn)性能、抗氧化及內(nèi)分泌相關(guān)指標(biāo)和胴體品質(zhì)的影響[D]. 田文生.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]新疆維吾爾族、哈薩克族2型糖尿病人群腸道菌群結(jié)構(gòu)特征研究[D]. 劉晶.新疆醫(yī)科大學(xué) 2011
[7]產(chǎn)嗜殺因子海洋酵母多樣性的初步研究[D]. 孫清榮.中國海洋大學(xué) 2010
[8]產(chǎn)生GABA酵母菌資源多樣性和分子系統(tǒng)學(xué)研究[D]. 徐曉波.浙江師范大學(xué) 2010



本文編號：3438822