牛瑟氏泰勒蟲（Theileria sergenti）是經(jīng)過蜱傳播的泰勒科（Theileriidae）、泰勒屬（Theileria）的血液原蟲。臨床上感染瑟氏泰勒蟲的牛會出現(xiàn)慢性貧血和高熱、黃疸,甚至死亡。當(dāng)前,牛瑟氏泰勒蟲病在全世界的各個地區(qū)分布較為廣泛。隨著全球經(jīng)濟貿(mào)易往來的日趨密集和養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)的不斷擴大,各國之間牛類產(chǎn)品的交易量劇增,不同大洲或地區(qū)的國家相繼報道了牛瑟氏泰勒蟲病。在這種嚴(yán)峻的情況下,對牛瑟氏泰勒蟲病的監(jiān)控和防治提出了更新、更高的要求。實時熒光定量PCR （Real-time Fluorescent Quantitive Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR） PCR反應(yīng)體系中加熒光集團,通過受體發(fā)色團偶極-偶極的作用使能量由供體轉(zhuǎn)移至受體,受體發(fā)射的熒光信號強度與DNA的產(chǎn)量成正比,因此通過檢測熒光信號強度從而去測定產(chǎn)物的量,進而推出靶序列的初始量。該技術(shù)自1996年產(chǎn)生以來,經(jīng)過不斷地發(fā)展和完善,現(xiàn)在已經(jīng)非常成熟并得到了廣泛的應(yīng)用。實時熒光定量PCR中的SYBR Green PCR方法可結(jié)合雙鏈DNA結(jié)合而發(fā)出熒光,而TaqManPCR方... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
前言
    1 牛瑟氏泰勒蟲形態(tài)學(xué)與生活史
    2 牛瑟氏泰勒蟲流行病學(xué)的概述
    3 牛瑟氏泰勒蟲的功能基因
    4 牛瑟氏泰勒蟲病診斷方法
        4.1 病原學(xué)診斷
        4.2 免疫學(xué)診斷
        4.3 分子生物學(xué)診斷
    5 熒光實時定量PCR技術(shù)的概述
        5.1 熒光定量PCR的原理
        5.2 熒光定量PCR的反應(yīng)方法
        5.3 熒光定量PCR的定量方法
        5.4 熒光定量PCR在預(yù)防獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
    6 本試驗?zāi)康呐c意義
試驗研究
    1 試驗材料
        1.1 血液樣本
        1.2 菌種和載體
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑的配制
        1.5 引物設(shè)計與合成
        1.6 主要儀器
    2 試驗方法
        2.1 標(biāo)準(zhǔn)品的制備和鑒定
        2.2 熒光定量PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
        2.3 熒光定量PCR敏感性試驗
        2.4 熒光定量PCR特異性試驗
        2.5 熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
        2.6 熒光定量PCR重復(fù)性試驗
        2.7 臨床樣本的檢測
試驗結(jié)果
    3.1 重組質(zhì)粒pMD18T-TsP1的制備和鑒定
    3.2 熒光定量PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
    3.3 TsP1-SYBR Green PCR檢測結(jié)果
    3.4 TsP1-TaqMan PCR檢測結(jié)果
    3.5 三種檢測方法之間的比較
    3.6 臨床樣本檢測
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介
在研期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]牛瑟氏泰勒蟲二溫式PCR快速檢測技術(shù)的建立及初步應(yīng)用[J]. 丁曉雙,夏曉輝,張曉軒,海旭楠,許應(yīng)天.  畜牧與獸醫(yī). 2013(07)
[2]牛瑟氏泰勒蟲ITS基因PCR診斷方法的建立[J]. 王軼男,賈立軍,薛書江,張影,錢年超,張守發(fā).  中國畜牧獸醫(yī). 2012(08)
[3]延邊地區(qū)牛瑟氏泰勒蟲病的分子流行病學(xué)調(diào)查[J]. 胡詩悅,錢年超,王軼男,賈立軍,張守發(fā).  中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(06)
[4]牛瑟氏泰勒蟲套式PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 楊興,許應(yīng)天,白雪梅,沈巖,孫平杰.  畜牧與獸醫(yī). 2010(06)
[5]熒光PCR技術(shù)應(yīng)用的研究進展[J]. 陳賢革.  畜牧與飼料科學(xué). 2010(02)
[6]實時熒光定量PCR的發(fā)展和數(shù)據(jù)分析[J]. 紀(jì)冬,辛紹杰.  生物技術(shù)通訊. 2009(04)
[7]牛瑟氏泰勒蟲表面蛋白p33基因的真核表達[J]. 常巧呈,李太元,許應(yīng)天,李艷茹,谷長維,陳媛媛.  中國獸醫(yī)寄生蟲病. 2008(05)
[8]熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理方法的探討[J]. 唐永凱,賈永義.  生物技術(shù). 2008(03)
[9]牛瑟氏泰勒蟲病PCR診斷方法的建立[J]. 金春梅,許應(yīng)天,張守發(fā),王笑玉,于龍政.  畜牧與獸醫(yī). 2007(05)
[10]牛瑟氏泰勒蟲病致病機理的研究進展[J]. 王旭有,李春花,許應(yīng)天.  中國獸醫(yī)寄生蟲病. 2007(03)

碩士論文
[1]牛瑟氏泰勒蟲P32主要表面蛋白基因的克隆及PCR診斷方法的建立[D]. 楊艷玲.吉林大學(xué) 2006
[2]以p33融合蛋白為抗原建立牛瑟氏泰勒蟲病間接ELISA診斷方法[D]. 高旭.延邊大學(xué) 2006



本文編號：3438610