發(fā)布時間：2021-10-15 18:20

　　奶牛乳腺炎是危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)最大的疾病之一,它能帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。乳腺上皮細(xì)胞是機體與外界直接接觸的細(xì)胞,也是抵御病原菌的重要免疫細(xì)胞。褪黑素（MLT）是由松果體分泌的,有廣泛的生理作用,更是一種有效的自由基清除劑和抗氧化劑。本研究以牛乳腺上皮細(xì)胞MAC-T為研究對象,通過脂多糖（LPS）誘導(dǎo)建立牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥模型,通過MTT法檢測細(xì)胞活力,熒光定量PCR檢測炎癥因子信號變化,探究MLT對LPS誘導(dǎo)的牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥的抗損傷作用,為有效篩選治療乳房炎藥物提供理論依據(jù)。1.LPS對MAC-T細(xì)胞活力的影響,與時間和濃度有關(guān)。MTT結(jié)果表明,不同濃度的LPS作用MAC-T細(xì)胞12h時,細(xì)胞活力沒有顯著的變化,作用MAC-T細(xì)胞24h時,LPS的濃度為100μg/m L顯著提高細(xì)胞活力,濃度400μg/m L的LPS顯著抑制細(xì)胞活力,LPS作用細(xì)胞48h時,LPS的濃度為200μg/m L、250μg/m L、300μg/m L、400μg/m L顯著抑制細(xì)胞活力,LPS作用細(xì)胞72h時,所有濃度的LPS均能抑制細(xì)胞活力。2.牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥模型的建立選擇LPS濃度為（50、100、... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：31 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

LPS對乳腺上皮細(xì)胞增殖活力的影響

4.2 LPS 對炎癥基因表達(dá)量的影響根據(jù) MTT 實驗結(jié)果，選擇濃度為（0、50、100、150、200、250）μg/mL 的 LPS 溶液，作用細(xì)胞 12h。用熒光定量 PCR 的檢測方法，對相關(guān)炎癥因子 IL- 6、IL-8 進(jìn)行基因表達(dá)水平的檢測，炎癥因子的檢測數(shù)據(jù)分析采用 2-△△Ct進(jìn)行統(tǒng)計分析為基因的相對表達(dá)倍數(shù)。

胞受到 LPS 刺激后，以 0μg/mL 的 LPS 濃度為對照組，如圖皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)量顯著上升，當(dāng) LPS 濃度為 100μg/mL水平均為最高值，LPS 濃度為 100 μg/mL 時為最佳刺激濃度乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響，不同濃度的褪黑素（50、100、150、200、250、300、400，50-250μM/L 褪黑素提高了乳腺上皮細(xì)胞活力，其中褪黑素高乳腺上皮細(xì)胞的活力是顯著的。由此可得知褪黑素濃度在 性的。所以我們選擇 50、150、200μM/L 濃度的褪黑素低中誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎性損傷的保護(hù)作用。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3438411