3株芽孢桿菌益生特性的初步研究與鑒定
發(fā)布時間:2021-10-11 23:14
近年來,抗生素被普遍應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)中,用以治療動物腸道致病菌的感染。但抗生素的長期過度使用常導(dǎo)致致病菌出現(xiàn)耐藥性,這些耐藥細菌會在動物之間傳播并進入環(huán)境[1],造成環(huán)境污染并可通過食物鏈傳播給人類,對人類的食品安全和健康構(gòu)成一定的威脅�,F(xiàn)在,越來越多的養(yǎng)殖人員和科研人員已經(jīng)意識到抗生素的濫用帶來的隱患,我國也進入了后抗生素時代,人們對安全有效抗菌制劑的需求也越來越強烈。益生菌制劑由于其有效、環(huán)保、綠色和健康的特點,有潛力成為代替抗生素的首選。本研究首先將實驗室保存的植物源混合菌種通過分離純化選出11株芽孢桿菌,再進行耐酸試驗、耐膽鹽試驗、抗生素敏感試驗和產(chǎn)酶定性試驗,篩選出生物學(xué)特性優(yōu)良的菌株,從生理生化特征和16S rDNA分子鑒定兩方面進行菌種鑒定;最后進行果蠅體內(nèi)抗氧化試驗。主要結(jié)果如下:(1)菌種鑒定結(jié)果顯示,513-A為短小芽孢桿菌,513-O為Bacillus gobiensis,513-N為枯草芽孢桿菌。三菌株均無耐藥性,513-N對常見致病菌具有良好的抑菌能力。513-A、513-O和513-N菌株經(jīng)pH值為2.0的HCl處理1 h存活率分別為70....
【文章來源】:山西大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
1.1 益生菌的研究概述
1.1.1 益生菌的定義
1.1.2 益生菌的生物特性
1.2 益生菌的種類
1.3 益生菌的應(yīng)用
1.3.1 益生菌在養(yǎng)禽業(yè)中的應(yīng)用
1.3.2 益生菌在畜牧業(yè)中的應(yīng)用
1.3.3 益生菌在水產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用
1.4 本實驗研究目的及意義
第二章 芽孢桿菌的分離純化
2.1 試驗材料和試劑
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑和儀器
2.1.3 培養(yǎng)基的配制
2.2 試驗方法
2.2.1 收集菌體
2.2.2 收集芽孢
2.2.3 芽孢復(fù)蘇
2.2.4 菌種純化和保存
2.2.5 菌落形態(tài)觀察
2.2.6 革蘭氏染色和顯微鏡觀察
2.3 試驗結(jié)果
2.3.1 菌種純化結(jié)果
2.3.2 顯微鏡觀察結(jié)果
2.4 討論
第三章 芽孢桿菌生物學(xué)特性的研究
3.1 試驗材料和試劑
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗試劑和儀器
3.1.3 培養(yǎng)基的配制
3.2 試驗方法
3.2.1 芽孢桿菌生長曲線的繪制
3.2.2 芽孢桿菌的耐酸性試驗
3.2.3 芽孢桿菌的耐膽鹽試驗
3.2.4 芽孢桿菌的體外抑菌試驗
3.2.5 芽孢桿菌的藥敏試驗
3.2.6 芽孢桿菌纖維素酶活力測定
3.2.7 芽孢桿菌蛋白酶活力測定
3.2.8 芽孢桿菌淀粉酶活力測定
3.3 試驗結(jié)果
3.3.1 芽孢桿菌生長曲線
3.3.2 芽孢桿菌的耐酸性試驗結(jié)果
3.3.3 芽孢桿菌的耐膽鹽試驗結(jié)果
3.3.4 芽孢桿菌的體外抑菌試驗結(jié)果
3.3.5 芽孢桿菌的藥敏性試驗結(jié)果
3.3.6 芽孢桿菌纖維素酶活力試驗結(jié)果
3.3.7 芽孢桿菌蛋白酶活力試驗結(jié)果
3.3.8 芽孢桿菌淀粉酶活力試驗結(jié)果
3.4 討論
第四章 芽孢桿菌的分子鑒定
4.1 試驗材料和試劑
4.1.1 試驗材料
4.1.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基
4.1.3 鑒定培養(yǎng)基
4.1.4 試驗試劑及儀器
4.2 試驗方法
4.2.1 生理生化特征鑒定
4.2.2 16 SrDNA分子生物學(xué)鑒定
4.3 試驗結(jié)果
4.3.1 菌株生理生化特征鑒定
4.3.2 分子生物學(xué)鑒定
4.4 討論
第五章 芽孢桿菌的果蠅體內(nèi)抗氧化試驗
5.1 試驗材料和試劑
5.1.1 試驗材料
5.1.2 果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制
5.1.3 含芽孢桿菌果蠅培養(yǎng)基的配制
5.1.4 試驗試劑和儀器
5.2 試驗方法
5.2.1 牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
5.2.2 果蠅的繁殖
5.2.3 果蠅抗氧化酶活力測定
5.3 試驗結(jié)果
5.3.1 牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
5.3.2 芽孢桿菌對雌果蠅體內(nèi)抗氧化活性的影響
5.3.3 芽孢桿菌對雄性果蠅體內(nèi)抗氧化活性的影響
5.4 討論
參考文獻
附錄
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介及聯(lián)系方式
【參考文獻】:
期刊論文
[1]枯草芽孢桿菌與錳協(xié)同對5~11周齡五龍鵝血清生化指標(biāo)、抗氧化能力及脛骨發(fā)育的影響[J]. 葛文華,刁翠萍,任民,王寶維,張名愛,岳斌,鄭惠文,張洋洋. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2017(08)
[2]豬沙門氏菌病的流行特點、臨床癥狀及防治措施[J]. 趙英久,史娜. 現(xiàn)代畜牧科技. 2016(10)
[3]益生菌在畜禽生產(chǎn)中的作用及其研究進展[J]. 楊亞晉,張穎,李健坤,韓智杰,王奎. 科技視界. 2016(23)
[4]芽孢桿菌在畜禽生產(chǎn)上的應(yīng)用[J]. 姜芬. 中國動物保健. 2016(04)
[5]益生菌對肉仔雞生產(chǎn)性能、胴體性狀、免疫功能和肉品質(zhì)的影響[J]. 李可,羅建杰,孟昆,姚斌,劉國華,鄭愛娟. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2015(09)
[6]動物免疫微生態(tài)制劑的研究進展[J]. 崔志偉. 中國畜禽種業(yè). 2014(07)
[7]復(fù)合益生菌制劑對肉雞生長性能、屠宰性能和肌肉品質(zhì)的影響[J]. 黃金華,李泰佑,王士長,梁珠民. 畜牧與飼料科學(xué). 2014(05)
[8]飼料中添加枯草芽孢桿菌對吉富羅非魚幼魚生長性能、免疫力和抗氧化功能的影響[J]. 程遠,黃凱,黃秀蕓,鐘靈香,武林華,黃清,唐麗寧. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2014(06)
[9]地衣芽孢桿菌對肉雞生產(chǎn)性能、抗氧化及營養(yǎng)物質(zhì)代謝的影響研究[J]. 楊家軍,錢坤,章薇,許月英,陳勝,唐焰. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2014(05)
[10]飼用雞源芽孢桿菌的鑒定及環(huán)境耐受性研究[J]. 楊家軍,許月英,章薇,陳勝. 中國家禽. 2014(06)
博士論文
[1]益生菌制劑研制及在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果評價[D]. 張曼.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
碩士論文
[1]兩株鹿源芽孢桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[D]. 張彤.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]不同益生菌培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能、免疫功能及盲腸微生物區(qū)系的影響[D]. 杜泓明.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]三甲基氯化錫(TMT)對大鼠神經(jīng)行為及氧化應(yīng)激的影響[D]. 范攀.華中科技大學(xué) 2013
[4]17株芽孢桿菌產(chǎn)酶特性及益生特性的研究[D]. 陶榮霞.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]復(fù)合芽孢桿菌制劑發(fā)酵工藝及其耐受性研究[D]. 張媛媛.東北林業(yè)大學(xué) 2012
[6]益生芽孢桿菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化的研究[D]. 曹曉敏.福建師范大學(xué) 2009
[7]一株益生芽孢桿菌的篩選及其腸道菌群調(diào)節(jié)作用研究[D]. 陳海華.第三軍醫(yī)大學(xué) 2005
本文編號:3431426
【文章來源】:山西大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
1.1 益生菌的研究概述
1.1.1 益生菌的定義
1.1.2 益生菌的生物特性
1.2 益生菌的種類
1.3 益生菌的應(yīng)用
1.3.1 益生菌在養(yǎng)禽業(yè)中的應(yīng)用
1.3.2 益生菌在畜牧業(yè)中的應(yīng)用
1.3.3 益生菌在水產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用
1.4 本實驗研究目的及意義
第二章 芽孢桿菌的分離純化
2.1 試驗材料和試劑
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑和儀器
2.1.3 培養(yǎng)基的配制
2.2 試驗方法
2.2.1 收集菌體
2.2.2 收集芽孢
2.2.3 芽孢復(fù)蘇
2.2.4 菌種純化和保存
2.2.5 菌落形態(tài)觀察
2.2.6 革蘭氏染色和顯微鏡觀察
2.3 試驗結(jié)果
2.3.1 菌種純化結(jié)果
2.3.2 顯微鏡觀察結(jié)果
2.4 討論
第三章 芽孢桿菌生物學(xué)特性的研究
3.1 試驗材料和試劑
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗試劑和儀器
3.1.3 培養(yǎng)基的配制
3.2 試驗方法
3.2.1 芽孢桿菌生長曲線的繪制
3.2.2 芽孢桿菌的耐酸性試驗
3.2.3 芽孢桿菌的耐膽鹽試驗
3.2.4 芽孢桿菌的體外抑菌試驗
3.2.5 芽孢桿菌的藥敏試驗
3.2.6 芽孢桿菌纖維素酶活力測定
3.2.7 芽孢桿菌蛋白酶活力測定
3.2.8 芽孢桿菌淀粉酶活力測定
3.3 試驗結(jié)果
3.3.1 芽孢桿菌生長曲線
3.3.2 芽孢桿菌的耐酸性試驗結(jié)果
3.3.3 芽孢桿菌的耐膽鹽試驗結(jié)果
3.3.4 芽孢桿菌的體外抑菌試驗結(jié)果
3.3.5 芽孢桿菌的藥敏性試驗結(jié)果
3.3.6 芽孢桿菌纖維素酶活力試驗結(jié)果
3.3.7 芽孢桿菌蛋白酶活力試驗結(jié)果
3.3.8 芽孢桿菌淀粉酶活力試驗結(jié)果
3.4 討論
第四章 芽孢桿菌的分子鑒定
4.1 試驗材料和試劑
4.1.1 試驗材料
4.1.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基
4.1.3 鑒定培養(yǎng)基
4.1.4 試驗試劑及儀器
4.2 試驗方法
4.2.1 生理生化特征鑒定
4.2.2 16 SrDNA分子生物學(xué)鑒定
4.3 試驗結(jié)果
4.3.1 菌株生理生化特征鑒定
4.3.2 分子生物學(xué)鑒定
4.4 討論
第五章 芽孢桿菌的果蠅體內(nèi)抗氧化試驗
5.1 試驗材料和試劑
5.1.1 試驗材料
5.1.2 果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制
5.1.3 含芽孢桿菌果蠅培養(yǎng)基的配制
5.1.4 試驗試劑和儀器
5.2 試驗方法
5.2.1 牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
5.2.2 果蠅的繁殖
5.2.3 果蠅抗氧化酶活力測定
5.3 試驗結(jié)果
5.3.1 牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
5.3.2 芽孢桿菌對雌果蠅體內(nèi)抗氧化活性的影響
5.3.3 芽孢桿菌對雄性果蠅體內(nèi)抗氧化活性的影響
5.4 討論
參考文獻
附錄
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介及聯(lián)系方式
【參考文獻】:
期刊論文
[1]枯草芽孢桿菌與錳協(xié)同對5~11周齡五龍鵝血清生化指標(biāo)、抗氧化能力及脛骨發(fā)育的影響[J]. 葛文華,刁翠萍,任民,王寶維,張名愛,岳斌,鄭惠文,張洋洋. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2017(08)
[2]豬沙門氏菌病的流行特點、臨床癥狀及防治措施[J]. 趙英久,史娜. 現(xiàn)代畜牧科技. 2016(10)
[3]益生菌在畜禽生產(chǎn)中的作用及其研究進展[J]. 楊亞晉,張穎,李健坤,韓智杰,王奎. 科技視界. 2016(23)
[4]芽孢桿菌在畜禽生產(chǎn)上的應(yīng)用[J]. 姜芬. 中國動物保健. 2016(04)
[5]益生菌對肉仔雞生產(chǎn)性能、胴體性狀、免疫功能和肉品質(zhì)的影響[J]. 李可,羅建杰,孟昆,姚斌,劉國華,鄭愛娟. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2015(09)
[6]動物免疫微生態(tài)制劑的研究進展[J]. 崔志偉. 中國畜禽種業(yè). 2014(07)
[7]復(fù)合益生菌制劑對肉雞生長性能、屠宰性能和肌肉品質(zhì)的影響[J]. 黃金華,李泰佑,王士長,梁珠民. 畜牧與飼料科學(xué). 2014(05)
[8]飼料中添加枯草芽孢桿菌對吉富羅非魚幼魚生長性能、免疫力和抗氧化功能的影響[J]. 程遠,黃凱,黃秀蕓,鐘靈香,武林華,黃清,唐麗寧. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2014(06)
[9]地衣芽孢桿菌對肉雞生產(chǎn)性能、抗氧化及營養(yǎng)物質(zhì)代謝的影響研究[J]. 楊家軍,錢坤,章薇,許月英,陳勝,唐焰. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2014(05)
[10]飼用雞源芽孢桿菌的鑒定及環(huán)境耐受性研究[J]. 楊家軍,許月英,章薇,陳勝. 中國家禽. 2014(06)
博士論文
[1]益生菌制劑研制及在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果評價[D]. 張曼.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
碩士論文
[1]兩株鹿源芽孢桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[D]. 張彤.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]不同益生菌培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能、免疫功能及盲腸微生物區(qū)系的影響[D]. 杜泓明.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]三甲基氯化錫(TMT)對大鼠神經(jīng)行為及氧化應(yīng)激的影響[D]. 范攀.華中科技大學(xué) 2013
[4]17株芽孢桿菌產(chǎn)酶特性及益生特性的研究[D]. 陶榮霞.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]復(fù)合芽孢桿菌制劑發(fā)酵工藝及其耐受性研究[D]. 張媛媛.東北林業(yè)大學(xué) 2012
[6]益生芽孢桿菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化的研究[D]. 曹曉敏.福建師范大學(xué) 2009
[7]一株益生芽孢桿菌的篩選及其腸道菌群調(diào)節(jié)作用研究[D]. 陳海華.第三軍醫(yī)大學(xué) 2005
本文編號:3431426
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