發(fā)布時間：2021-10-08 08:54

　　豬在遺傳學(xué)、生理學(xué)、解剖學(xué)上和人比較接近,被認(rèn)為是創(chuàng)制人類疾病動物模型和異種器官移植供體、揭示生殖與發(fā)育機(jī)制等理想的模式動物,在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)基礎(chǔ)研究方面具有廣闊的應(yīng)用前景。豬胚胎生產(chǎn)操作是推動上述技術(shù)造福人類的核心環(huán)節(jié)。目前,豬胚胎體外生產(chǎn)效率仍不理想,根本原因是對豬胚胎早期發(fā)育機(jī)制認(rèn)識不夠。MOF （males absent on the first）基因首先發(fā)現(xiàn)于果蠅,是果蠅性染色體劑量補償系統(tǒng)必不可少的成分,在多種真核生物中存在其同源基因。MOF蛋白主要負(fù)責(zé)特異性催化組蛋白H4第16位賴氨酸殘基發(fā)生乙�；℉4K16ac）,屬于組蛋白乙�；窶YST家族,在哺乳動物發(fā)育中具有重要作用,然而至今未見豬MOF （pMOF）的相關(guān)報道。因此,本研究以豬為研究對象,克隆pMOF并探討其組織表達(dá)譜,然后試圖揭示豬胚胎著床前pMOF表達(dá)模式及H4K16ac修飾水平的動態(tài)變化規(guī)律,再通過RNAi技術(shù)研究MOF基因?qū)ωi胚胎發(fā)育的影響及其機(jī)制。具體試驗及結(jié)果如下：試驗一：pMOF亞克隆及其編碼序列分析。成功克隆出包含完整開放閱讀框的（open reading frame, ORF）,長度為1471... 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?ＭＹＳＴ家族乙酷化酶的作用（引自Ｖａ組ｅｉａ等［６０Ｐ??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｔｈｅ?ａｃｅｔｊｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ?ｆｕｃｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＭＹＳＴ?ｆａｍｉｌｙ??

ＨＭＳＬ２、ＫＭＳＬ３等亞基，且發(fā)揮的功能與果蠟中一致［７４］。??基因具有組蛋白己醜基轉(zhuǎn)移酶區(qū)域、克羅莫結(jié)構(gòu)域和非典型鋒指結(jié)構(gòu)??Ｈ個保守結(jié)構(gòu)域（圖１－３）�？肆_莫結(jié)構(gòu)域也稱為染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域，它連接核酸與染??色質(zhì)結(jié)合使ＭＯＦ基因發(fā)揮酶的活性，促進(jìn)全基因組發(fā)生Ｈ４Ｋ１６ａｃ［７５］。Ｃ２ＨＣ??的巧指結(jié)構(gòu)的作用主要是促進(jìn)核小體和組蛋白Ｈ４Ｎ端尾部的底物結(jié)合，使ＭＯＦ??發(fā)揮組蛋白乙醜化酶的作用。??Ｍ０?舉眶．ｉｍ?＇心品■ｎ—??科…闊！——ｉｍ?■?■—……ｉｌｌ—??Ｍｏｆ／１＾１?Ｉ?Ｉｎ?ｕｎｉ?Ｉ??刷?ｒ———１??ＨｆａｏｌＷ?側(cè)?■?Ｉ?■■Ｉ?Ｉ??圖１－３?ＭＹＳＴ狙蛋白乙酷化酶家族的結(jié)構(gòu)巧２］??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｈｉｓｔｏｎｅ?ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅｓ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＭＹＳＴ?ｆａｍｉｌｙ??ＭＯＦ?（又稱ＭＹＳＴｌ、ＫＡＴ８）是ＭＹＳＴ家族成員之一。人類ＭＯＦ?（ｈＭＯＦ）??是果蝸ＭＯＦ蛋白的直系同源物，在體內(nèi)普遍存在和表達(dá)。近年來的研究已經(jīng)證??實ｈＭＯＦ作為催化亞基，在體內(nèi)可Ｗ和Ｍ化類蛋白形成多蛋白復(fù)合物（ｈｕｍａｎ??ＭＳＬ，ｈＭＳＬ），并特異性的石醜化組蛋白Ｈ４Ｋ１６位點。ｈＭＯＦ的催化活性不能單??獨完成，它必須與特異的復(fù)合體結(jié)合才能發(fā)揮生物學(xué)作用（圖１－４）。在人體內(nèi)??ＭＯＦ作為催化亞基能夠在體內(nèi)與其他蛋白質(zhì)形成至少兩種含ＭＯＦ的組蛋白乙??醜化酶復(fù)合物。除了上述的ＭＳＬ復(fù)合物Ｗ外，還可Ｗ與另一組蛋白質(zhì)形成非特??異致死復(fù)合物（ｎｏｎ－ｓｐｅｃ近Ｃ?ｌｅｔｈａｌ

２．２ＰＭＯＦ的序列分析??對；７如０護(hù)組結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其包含１１個外顯子，定位于第３號染色??體上，橫跨長度１０．９臥（圖２－３）。??１Ｋｂ??４?１?１?－ｈｆ?－ｔｉｆ?Ｔ＼?３－??Ｉ?巧?４?５?６?７８９?ｌＯｌｌ??圖２－３ｐＭＷ的基因組結(jié)構(gòu)，豎線標(biāo)號的代表外癥子，橫線的代表代表內(nèi)含子。??ＲｇｕｒｅＳ－Ｓ?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆｐＡ／ＯＦ－?Ｔｈｅ?ｅｘｏｎｓ?ａｎｄ?ｉｎｔｒｏｎｓ?ａｒｅ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｂｙ?ｓｏｌｉｄ?ｂｏｘｅｓ?ａｎｄ??ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ?ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌ?ｌｉｎｅｓ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ－?Ｔｈｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ?ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ?化?ｐＭＯＦ?ｃｏｎｓｉｓｔｓ?１１?ｅｘｏｎｓ－??２．３?ＭＯＦ在豬、人、小鼠中的序列比對??比對豬、人和小鼠ＭＯＦ基因序列（附錄Ｂ、Ｃ），結(jié)果顯示，核巧酸水平上，??豬與人、小鼠編碼區(qū)同源性分別為化．８８％與８８．９６％；氨基酸水平上，豬與人、??小鼠的同源性分別為９９．３４％與％．２５％?（表２－１）。??３６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組蛋白乙�；竓MOF在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 遲長亮,蘆志華,管旌旌,王勇,唐宇哲,蔡勇,金景姬,王春喜.  吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(02)
[2]hMOF蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 文愛平,汪海嬌,羅樂,趙磊,蔡勇,金景姬,岳瑛.  中國實驗診斷學(xué). 2011(10)
[3]宮頸病變組織中hMOF、P53蛋白的表達(dá)及臨床意義[J]. 劉寶,魏大鵬,胡麗娜,崔玲.  西部醫(yī)學(xué). 2011(05)
[4]Human parthenogenetic embryonic stem cells:one potential resource for cell therapy[J]. HAO Jie1,2,ZHU WanWan1,SHENG Chao1,YU Yang1,ZHOU Qi1 1 State Key Laboratory of Reproductive Biology,Institute of Zoology,Beijing 100101,China;2 Graduate School,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2009(07)



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