TLR是宿主識(shí)別細(xì)菌、病毒和真菌并激發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要模式識(shí)別受體。大多數(shù)TLR識(shí)別病原后,其信號(hào)傳導(dǎo)均需接頭蛋白MyD88的參與。MyD88蛋白水平的穩(wěn)態(tài)決定著病原感染時(shí)細(xì)胞產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力。泛素化介導(dǎo)的降解是機(jī)體調(diào)控蛋白水平的重要方式。SPOP是Rbx1-Cul3-SPOP泛素連接酶復(fù)合物中的適配蛋白,決定著該復(fù)合物的底物特異性。SPOP在肌肉發(fā)育、細(xì)胞周期調(diào)控、癌癥發(fā)生等方面有重要的調(diào)控作用,目前SPOP對(duì)先天免疫是否有影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究旨在解析SPOP調(diào)控MyD88蛋白穩(wěn)態(tài)和機(jī)體抗感染能力的分子機(jī)制,為動(dòng)物抗病育種提供理論依據(jù),主要結(jié)論如下:1.SPOP和MyD88存在蛋白間的相互作用。利用免疫共沉淀和western blot證實(shí)雞成纖維細(xì)胞（DF1）中二者外源表達(dá)和內(nèi)源表達(dá)后均存在互作,其中SPOP的MATH結(jié)構(gòu)域和MyD88的INT結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)二者的互作;免疫熒光顯示二者在細(xì)胞中存在共定位。此外,這種互作在人宮頸癌細(xì)胞（Hela）和中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）中均能檢測(cè)到,說(shuō)明二者互作在不同物種間具有保守性。2.SPOP通過(guò)泛素-蛋白酶體通路調(diào)控MyD88的降解。DF1... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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中性粒細(xì)胞/異噬性粒細(xì)胞殺滅病原微生物的機(jī)制（KOLACZKOWSKAandKUBES,2013）

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文第一章緒論6圖1-2脊椎動(dòng)物先天免疫系統(tǒng)的示意圖（RIERAROMOetal.,2016）Fig.1-2Schematicillustrationofvertebrateinnateimmunity注：病原入侵機(jī)體后，生理狀態(tài)下先天免疫中的物理屏障、免疫分子和免疫細(xì)胞協(xié)同作用，清除病原菌。1.2模式識(shí)別受體種類及其識(shí)別配體為了快速對(duì)病原菌的感染做出反應(yīng)，病原菌的識(shí)別是先天免疫應(yīng)答的前提，這主要依賴固有免疫系統(tǒng)識(shí)別病原的特殊分子——模式識(shí)別受體（Patternrecognitionreceptors，PRRs）。PRRs能夠識(shí)別病原微生物中一些保守且必需的特殊結(jié)構(gòu)——病原相關(guān)分子模式（Pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMPs）（JANEWAYandMEDZHITOV,2002;TAKEUCHIandAKIRA,2010），如糖脂、脂蛋白和核酸，從而誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)炎癥因子、I型干擾素、抗菌物質(zhì)以及調(diào)節(jié)PRRs信號(hào)通路的蛋白，啟動(dòng)宿主免疫應(yīng)答。PRRs具有以下特點(diǎn)：由胚系基因編碼，廣泛表達(dá)于所有細(xì)胞，不具有免疫記憶；不同的PRRs識(shí)別不同的PAMPs，從而激活不同的信號(hào)通路，引發(fā)特異性的抗病原反應(yīng)；在宿主中組成性地表達(dá)，與宿主的生命周期無(wú)關(guān)（AKIRAetal.,2006）。機(jī)體中PRRs主要有4類，包括Toll樣受體、NOD樣受體、RIG樣受體和C型凝集素受體，其中TLRs和CLRs是跨膜蛋白，其余兩種是胞質(zhì)蛋白（TAKEUCHIandAKIRA,2010）。這些受體互相影響，選擇性地激活不同的信號(hào)通路，誘導(dǎo)特異性的免疫應(yīng)答（IPetal.,2009;NEWTONandDIXIT,2012）。

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文第一章緒論8圖1-3RLRs識(shí)別RNA病毒的信號(hào)通路圖（TAKEUCHIandAKIRA,2010）Fig.1-3SignalpathwayofRLRsaftertherecognitionofRNAViruses1.2.2NOD樣受體（NOD-likereceptor,NLRs）該家族蛋白是一類位于胞質(zhì)中的PRRs，主要參與細(xì)菌的識(shí)別。該類蛋白主要由N端的蛋白互作結(jié)構(gòu)域如CARD結(jié)構(gòu)域和熱蛋白結(jié)構(gòu)域、中間核苷酸綁定結(jié)構(gòu)域（centralnucleotide-bindingdomain，NOD）和C端富含亮氨酸重復(fù)單元結(jié)構(gòu)域組成（C-terminalleucine-richrepeatsdomain，LRR）（INOHARAetal.,2005）。根據(jù)N端結(jié)構(gòu)域的類別，該家族可分為5個(gè)亞科單元：NLRA、NLRB、NLRC、NLRP和NLRX，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人類NLRs基因有23個(gè)，鼠科動(dòng)物34個(gè)，但大多數(shù)的NLR功能尚不明確（TINGetal.,2008）。當(dāng)C端LRR結(jié)構(gòu)域與相應(yīng)配體結(jié)合后，引起NOD結(jié)構(gòu)域構(gòu)象改變和蛋白低聚化，暴露出N端蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域，招募含有同型結(jié)構(gòu)域的效應(yīng)分子，從而激活各種信號(hào)通路。該家族中研究較多的是NOD1和NOD2，二者主要識(shí)別細(xì)菌中的肽聚糖。NOD1和NOD2與相應(yīng)配體結(jié)合后，CARD招募含有該結(jié)構(gòu)域的蛋白R(shí)IP2，通過(guò)降解NF-κB抑制劑，使NF-κB與其抑制劑解離，激活NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥因子的表達(dá)（KUFERetal.,2005）。此外，二者還能招募自噬相關(guān)蛋白參與自噬作用（TRAVASSOSetal.,2010）。除了參與抗菌感染外，最近研究發(fā)現(xiàn)NOD2還參與三磷酸RNA誘導(dǎo)的I型干擾素產(chǎn)生和宿主抗呼吸道合胞病毒的感染（SABBAHetal.,2009）。NOD1參與沙門(mén)氏菌感染后機(jī)體的免疫應(yīng)答：沙門(mén)氏菌刺激后，小鼠中


本文編號(hào)：3421813