為了解組織型纖溶酶原激活劑（tissue plasminogen activator, tPA）和纖溶酶原激活劑抑制劑1（plasminogen activator inhibitor, PAI-1）在牛卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體（COCs）體外成熟進(jìn)程中的可能作用；本研究首先運(yùn)用了實(shí)時(shí)定量RT-PCR和ELISA技術(shù)檢測了體外不同成熟時(shí)間（0h、8h、16h和24h）卵丘細(xì)胞中纖溶酶原（plasminogen）基因相對(duì)表達(dá)變化和tPA活性變化,然后通過添加不同濃度的tPA（0ng/ml.0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml）、PAI-1（0ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml）觀察透明質(zhì)酸合成酶2（Hyaluronan synthase2,HAS2）基因在體外成熟培養(yǎng)16h牛卵丘細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)變化。最后以1ng/ml tPA與10ng/ml PAI做添加組合,在體外成熟培養(yǎng)16h后,統(tǒng)計(jì)牛卵丘細(xì)胞中HAS2基因相對(duì)表達(dá),牛卵母細(xì)胞中GDF-9、BMP-15基因相對(duì)表達(dá),以及牛COCS的擴(kuò)散程度。結(jié)果如下,1.在COCs體外成熟過程中,牛卵丘細(xì)胞Plasmin... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：35 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
插圖和附表清單
縮略語表
1 前言
    1.1 卵母細(xì)胞成熟概述
    1.2 卵丘細(xì)胞與卵母細(xì)胞
    1.3 卵丘細(xì)胞擴(kuò)散
    1.4 HA與HAS2
    1.5 PA-系統(tǒng)概述
2 材料與方法
    2.1 儀器與試劑
    2.2 方法
        2.2.1 COCs的采集及體外成熟培養(yǎng)
        2.2.2 tPA活性檢測
        2.2.3 RNA提取和反轉(zhuǎn)錄
        2.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR
        2.2.5 卵丘擴(kuò)散程度檢測
        2.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果與分析
    3.1 PCR產(chǎn)物特異性確定
    3.2 成熟過程中牛卵丘細(xì)胞Plasminogen基因表達(dá)及tPA活性
        3.2.1 成熟過程中卵丘細(xì)胞Plasminogen基因表達(dá)
        3.2.2 成熟過程中卵丘細(xì)胞tPA活性
    3.3 添加不同濃度tPA成熟培養(yǎng)16h卵丘細(xì)胞HAS2基因表達(dá)的影響
    3.4 添加不同濃度PAI-1成熟培養(yǎng)16h卵丘細(xì)胞HAS2基因表達(dá)的影響
    3.5 添加tPA與PAI-1組合成熟培養(yǎng)16h卵丘細(xì)胞HAS2基因表達(dá)的影響
    3.6 添加tPA與PAI-1組合成熟培養(yǎng)16h對(duì)卵丘細(xì)胞擴(kuò)散的影響
    3.7 組合(tPA+PAI-1)對(duì)卵母細(xì)胞GDF-9和BMP-15基因表達(dá)的影響
4 討論
    4.1 tPA和Plasminogen在不同體外成熟時(shí)間卵丘細(xì)胞中的表達(dá)
    4.2 tPA和PAI-1在COCs成熟過程中對(duì)卵丘細(xì)胞的作用
    4.3 tPA和PAI-1對(duì)卵丘擴(kuò)散的影響
    4.4 tPA和PAI-1對(duì)卵母細(xì)胞表達(dá)GDF-9和BMP-15的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組織型纖溶酶原激活劑基因在牛卵丘-卵母復(fù)合體體外成熟進(jìn)程中的表達(dá)[J]. 關(guān)洪敏,米焱,張伶俐,李海軍,曹貴方.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(08)
[2]BFF、rbGH對(duì)牛卵泡卵母細(xì)胞體外受精后發(fā)育的影響[J]. 徐照學(xué),錢菊汾,蘭亞莉,張趁心,辛?xí)粤?賀文杰.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1996(06)
[3]大鼠顆粒細(xì)胞tPA和PAI-1表達(dá)的激素調(diào)控[J]. 劉以訓(xùn),彭曉蓉,劉奎,T.Ny.  中國科學(xué)（B輯 化學(xué) 生命科學(xué) 地學(xué)）. 1993(07)
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碩士論文
[1]卵丘細(xì)胞對(duì)豬卵母細(xì)胞成熟及其發(fā)育能力的影響[D]. 郝元斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3421809