吸附是微生物降解牧草細(xì)胞壁的關(guān)鍵,緊密吸附于細(xì)胞壁上的微生物數(shù)量和群落結(jié)構(gòu)與牧草組成和組織結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。細(xì)胞壁中纖維素、半纖維素和果膠等物質(zhì)經(jīng)微生物降解后形成大量揮發(fā)性脂肪酸為反芻動物供能,它們對奶牛瘤胃健康和脂肪酸合成至關(guān)重要,并能降低奶牛發(fā)生瘤胃酸中毒的幾率。因此,提高牧草降解率和高效利用牧草資源一直都是動物營養(yǎng)學(xué)研究的熱點。本文運用半體內(nèi)法,借助電子顯微鏡和高通量測序技術(shù)并結(jié)合動物生產(chǎn)試驗探究不同牧草纖維瘤胃動態(tài)降解規(guī)律及其對泌乳中期奶牛瘤胃發(fā)酵、微生物蛋白合成和瘤胃細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響。試驗1瘤胃微生物對不同牧草動態(tài)降解特性及組織結(jié)構(gòu)變化的研究本試驗旨在研究苜蓿、燕麥草、羊草和稻草莖稈在奶牛瘤胃中的降解特性及組織結(jié)構(gòu)變化。選用長勢株高相近的初花期苜蓿、抽穗初期燕麥草和羊草以及稻草秸稈,剝離出莖稈后將樣品分為兩份,一份用于尼龍袋降解率試驗,樣品在瘤胃中降解2h、6h、12h、24h、36h、48h和72h取出,測定干物質(zhì)（DM）和中性洗滌纖維（NDF）降解率；另一份用于掃描和透射電子顯微鏡觀察。結(jié)果顯示：（1）四種牧草DM降解率隨時間的增加不斷上升,DM72h降解率：燕麥草>... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 瘤胃微生物對牧草細(xì)胞壁降解的研究進(jìn)展
        1.1 牧草組織及細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)
            1.1.1 牧草組織結(jié)構(gòu)
            1.1.2 牧草細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)
        1.2 瘤胃中降解植物細(xì)胞壁的微生物
            1.2.1 細(xì)菌
            1.2.2 真菌
            1.2.3 原蟲
        1.3 瘤胃微生物對細(xì)胞壁的降解
            1.3.1 細(xì)胞壁組織結(jié)構(gòu)的變化
            1.3.2 細(xì)胞壁纖維成分降解
    2 分子生物學(xué)方法對瘤胃微生物多樣性的研究進(jìn)展
        2.1 瘤胃微生物定量分析
            2.1.1 斑點雜交
            2.1.2 熒光原位雜交
            2.1.3 競爭性定量PCR
            2.1.4 實時熒光定量PCR
        2.2 瘤胃微生物多樣性指紋圖譜技術(shù)
            2.2.1 變性/溫度梯度凝膠電泳
            2.2.2 核糖體間隔基因分析
            2.2.3 末端限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)
        2.3 宏基因組學(xué)研究
            2.3.1 宏基因組學(xué)簡介
            2.3.2 宏基因組學(xué)研究策略
            2.3.3 基于新一代測序技術(shù)的研究策略
            2.3.4 高通量測序技術(shù)在宏基因組學(xué)研究中的應(yīng)用
    3 牧草來源對奶牛瘤胃發(fā)酵、微生物蛋白合成和瘤胃微生物的研究進(jìn)展
        3.1 不同牧草來源日糧對瘤胃發(fā)酵的影響
        3.2 不同牧草來源日糧對微生物蛋白合成的影響
        3.3 不同牧草來源日糧對瘤胃微生物區(qū)系的影響
            3.3.1 瘤胃微生物區(qū)系組成
            3.3.2 日糧對微生物區(qū)系的影響
    4 本研究目的與意義
第二章 瘤胃微生物對不同牧草動態(tài)降解特性及組織結(jié)構(gòu)變化的研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗動物和飼養(yǎng)管理
        1.2 試驗材料
        1.3 DM和NDF瘤胃降解率和降解參數(shù)
        1.4 電鏡樣品的制備與觀察
            1.4.1 牧草莖稈的降解
            1.4.2 掃描電鏡樣品的制備
            1.4.3 透射電鏡樣品的制備
        1.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 不同牧草莖稈DM降解率和降解參數(shù)
        2.2 不同牧草莖稈NDF降解率和降解參數(shù)
        2.3 苜蓿莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.3.1 掃描電鏡下苜蓿莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.3.2 透射電鏡下苜蓿莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
        2.4 燕麥草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.4.1 掃描電鏡下燕麥草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.4.2 透射電鏡下燕麥草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
        2.5 羊草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.5.1 掃描電鏡下羊草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.5.2 透射電鏡下羊草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
        2.6 稻草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.6.1 掃描電鏡下稻草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
            2.6.2 透射電鏡下稻草莖稈組織結(jié)構(gòu)的降解
    3 討論
        3.1 瘤胃微生物對苜蓿莖稈降解的影響
        3.2 瘤胃微生物對燕麥草莖稈降解的影響
        3.3 瘤胃微生物對羊草莖稈降解的影響
        3.4 瘤胃微生物對稻草莖稈降解的影響
    4 小結(jié)
第三章 吸附在牧草細(xì)胞壁中的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)研究
    1 材料與設(shè)備
        1.1 主要試劑和藥品
        1.2 主要儀器和設(shè)備
    2 材料與方法
        2.1 試驗動物和飼養(yǎng)管理
        2.2 試驗材料
        2.3 試驗步驟
        2.4 牧草中微生物混合總DNA的提取
        2.5 PCR擴(kuò)增及膠回收純化
        2.6 構(gòu)建文庫并測序
    3 數(shù)據(jù)處理與分析
        3.1 序列處理
        3.2 優(yōu)質(zhì)序列的生物信息學(xué)處理
        3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4 結(jié)果與分析
        4.1 細(xì)菌豐富度和多樣性
        4.2 細(xì)菌組成和群落結(jié)構(gòu)
        4.3 處理組間的相似性分析
    5 討論
    6 小結(jié)
第四章 不同牧草來源日糧對奶牛瘤胃發(fā)酵、微生物蛋白合成和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響
    1 材料與方法
        1.1 試驗動物、日糧及飼養(yǎng)管理
        1.2 試驗設(shè)計
        1.3 樣品采集與測定
            1.3.1 飼料及剩料樣品采集與分析
            1.3.2 尿樣采集和嘌呤衍生物的測定
            1.3.3 微生物蛋白產(chǎn)量的計算
            1.3.4 瘤胃液樣品采集及分析
    2 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 不同牧草來源日糧對瘤胃發(fā)酵的影響
        3.2 不同牧草來源日糧對微生物蛋白合成的影響
        3.3 不同牧草來源日糧對瘤胃細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響
            3.3.1 細(xì)菌豐富度和多樣性
            3.3.2 細(xì)菌組成和群落結(jié)構(gòu)
            3.3.3 處理組間的相似性分析
    4 討論
        4.1 不同牧草來源日糧對瘤胃發(fā)酵的影響
        4.2 不同牧草來源日糧對微生物蛋白合成的影響
        4.3 不同牧草來源日糧對瘤胃細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響
    5 小結(jié)
結(jié)論、創(chuàng)新點和后續(xù)研究展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宏基因組學(xué)及其在瘤胃微生物中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 吳錫川,楊舒黎,茍瀟,冷靜,毛華明.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(12)
[2]牧草細(xì)胞壁:瘤胃內(nèi)降解（英文）[J]. 孫學(xué)釗,Simone O. Hoskin,Keith N. Joblin,Ian G. Andrew,Philip J. Harris,盛亦兵.  草地學(xué)報. 2007(04)
[3]驅(qū)除瘤胃真菌對綿羊瘤胃內(nèi)纖維物質(zhì)降解的影響[J]. 霍鮮鮮,侯先志,李大彪,敖力格日瑪.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2006(05)
[4]微生物預(yù)處理對麥草微觀結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分的影響[J]. 于紅,秦夢華,盧雪梅,曲音波,高培基.  中國造紙學(xué)報. 2004(01)

博士論文
[1]稻草預(yù)處理后超微結(jié)構(gòu)及其理化特性變化規(guī)律研究[D]. 王佳堃.浙江大學(xué) 2006
[2]日糧精粗比對奶牛消化代謝及乳脂肪酸成分影響的研究[D]. 王吉峰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2004



本文編號：3419485