雞傳染性支氣管炎病毒弱毒株的篩選
發(fā)布時間：2021-10-05 02:21
雞傳染性支氣管炎（Infectious Bronchitis,IB）是一種傳染性極高的急性呼吸道疾病，它的病原是雞傳染性支氣管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus,IBV），臨床主要癥狀為喘氣、氣管啰音、咳嗽、流鼻液。IB對不同日齡的雞均易感，而目前生產(chǎn)中使用的疫苗因為不同血清型IBV的交叉保護(hù)差，常常達(dá)不到保護(hù)的作用，給家禽養(yǎng)殖帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本課題對某地區(qū)IBV流行毒株進(jìn)行優(yōu)勢毒株的篩選，然后對其致弱，進(jìn)而對致弱毒株的S1基因、N基因序列進(jìn)行分析比較，對研制新型弱毒疫苗具有十分重要的現(xiàn)實意義。本研究首先挑選5個地方分離株（GY毒株、HQ毒株、DP毒株、FJW毒株、WT毒株）和H120疫苗株，選擇氣管環(huán)組織作為培養(yǎng)系統(tǒng)，對病毒效價TOC-ID50進(jìn)行測定。計算結(jié)果，得出GY、HQ、DP、FJW、WT毒株的TOC-ID50分別為10-5.5/mL、10-6.54/mL、10-4.69/mL、10-5.33/mL、10...
【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
IBV病毒粒子結(jié)構(gòu)圖
停止、上皮組織脫落、萎縮等[22]。近年有研究發(fā)現(xiàn)，用雞氣管黏膜上皮細(xì)胞來研究和增殖 IBV 可以大大縮短病毒適應(yīng)時間并且可以獲得較高的病毒滴度[23]。3 IBV 的基因組特點(diǎn)及功能蛋白3.1 IBV 基因組IBV 基因組為不分節(jié)段的單股正鏈 RNA，大小約為 27.4～27.7Kb，不同毒株的長度可能略有差別。病毒核酸本身具有侵染性，前 2/3 的基因組編碼具有活性的復(fù)制酶（見圖 1-2），余下基因組編碼結(jié)構(gòu)蛋白和一小組可讀框（ORF）[24]。IBV 基因組可分為 6 個區(qū)域，有 10 個明顯的 ORF，順序為 5′-1a-1b-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-3′[25]。IBV 為套式病毒，這類病毒有一種獨(dú)特的不連續(xù)轉(zhuǎn)錄方式，在感染細(xì)胞中可轉(zhuǎn)錄出一組嵌套的基因組和 6 種亞基因組 mRNA，所有 mRNA包括基因組 5′端都具有一個 64bp 的前導(dǎo)序列， 3′端具有相同的末端結(jié)構(gòu)[26]。
圖 2-1 正常氣管環(huán)（10×） 圖 2-2 病變后的氣管環(huán)（10×）Fig.2-1 The normal tracheal ring Fig.2-2 The lesions of tracheal ring3.1.1 GY 分離株 TOC-ID50的測定表 2-2 GY 分離株 TOC-ID50的測定Table.2-2 The determination of GY isolate’s TOC-ID50病毒稀釋倍數(shù)氣管環(huán)觀察結(jié)果 累計和病變比例 百分比病變 正常 病變 正常10-26 0 24 0 24/24 100.00%10-36 0 18 0 18/18 100.00%10-45 1 12 1 12/13 92.31%10-53 3 7 4 7/11 63.64%10-63 3 4 7 4/11 36.36%10-71 5 1 12 1/13 7.69%10-80 6 0 18 0/18 0.00%TOC-ID50=10-5.5/mL3.1.2 WT 分離株 TOC-ID50的測定表 2-3 WT 分離株 TOC-ID的測定
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離毒株抗原相關(guān)性的研究[J]. 王秀英,李孟,韋平,陳秋英,韋正吉,磨美蘭,韋天超. 病毒學(xué)報. 2012(06)
[2]63株IBV分離株M基因的遺傳變異與系統(tǒng)進(jìn)化分析[J]. 鄭俏偉,龔軍,劉大偉,何琴,王建華,郭露鉸,徐成剛,廖明,任濤. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[3]雞傳染性支氣管炎病毒基因型與血清型相關(guān)性初步研究[J]. 汪洋,李俊平,楊承槐,李啟紅,黃建華,于靜,夏業(yè)才. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(11)
[4]廣西不同時期IBV分離株S1基因高變區(qū)Ⅰ的遺傳變異分析[J]. 韋正吉,韋平,磨美蘭,李孟,韋天超,李康然. 病毒學(xué)報. 2008(02)
[5]傳染性支氣管炎病毒的分離及其S1基因高變區(qū)Ⅰ的遺傳變異性分析[J]. 磨美蘭,韋正吉,韋平,仇興華,陳秋英,張勝斌,黃百花,韋天超. 中國獸醫(yī)雜志. 2006(08)
[6]RT-PCR及RFLP分析技術(shù)對雞傳染性支氣管炎病毒的診斷和S1基因分型的研究[J]. 磨美蘭,李康然,韋平. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2001(04)
[7]傳染性腺胃炎病毒ZJ971株的一些生物學(xué)特性[J]. 周繼勇. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2000(03)
[8]腺胃病變型雞傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定[J]. 榮駿弓,康麗娟,谷守林,吳東來,尹訓(xùn)南,王云峰,江國托,褚桂芳. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 1999(02)
[9]雞腺胃型傳染性支氣管炎病毒（QX IBV）的分離和鑒定[J]. 王玉東,王永玲,張子春,范根成,蔣貽海,劉相娥,丁江,王樹雙. 中國動物檢疫. 1998(01)
[10]雞腺胃型傳染性支氣管炎[J]. 王玉東,張子春,王永玲,范根成,蔣貽海,劉相娥,丁江. 山東家禽. 1997(05)
博士論文
[1]雞氣管黏膜上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系的建立及IBV致細(xì)胞病變作用的研究[D]. 孫裴.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
碩士論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒的分離及N基因、S1基因的序列分析[D]. 何錫棟.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[2]雞傳染性支氣管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V株雞胚傳代致弱及其免疫效力的初步評價[D]. 龔利洋.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
[3]雞傳染性支氣管炎病毒tl/CH/LDT3/03的雞胚傳代致弱及其免疫效力的初步評價[D]. 聶磊.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3418808
【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
IBV病毒粒子結(jié)構(gòu)圖
停止、上皮組織脫落、萎縮等[22]。近年有研究發(fā)現(xiàn)，用雞氣管黏膜上皮細(xì)胞來研究和增殖 IBV 可以大大縮短病毒適應(yīng)時間并且可以獲得較高的病毒滴度[23]。3 IBV 的基因組特點(diǎn)及功能蛋白3.1 IBV 基因組IBV 基因組為不分節(jié)段的單股正鏈 RNA，大小約為 27.4～27.7Kb，不同毒株的長度可能略有差別。病毒核酸本身具有侵染性，前 2/3 的基因組編碼具有活性的復(fù)制酶（見圖 1-2），余下基因組編碼結(jié)構(gòu)蛋白和一小組可讀框（ORF）[24]。IBV 基因組可分為 6 個區(qū)域，有 10 個明顯的 ORF，順序為 5′-1a-1b-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-3′[25]。IBV 為套式病毒，這類病毒有一種獨(dú)特的不連續(xù)轉(zhuǎn)錄方式，在感染細(xì)胞中可轉(zhuǎn)錄出一組嵌套的基因組和 6 種亞基因組 mRNA，所有 mRNA包括基因組 5′端都具有一個 64bp 的前導(dǎo)序列， 3′端具有相同的末端結(jié)構(gòu)[26]。
圖 2-1 正常氣管環(huán)（10×） 圖 2-2 病變后的氣管環(huán)（10×）Fig.2-1 The normal tracheal ring Fig.2-2 The lesions of tracheal ring3.1.1 GY 分離株 TOC-ID50的測定表 2-2 GY 分離株 TOC-ID50的測定Table.2-2 The determination of GY isolate’s TOC-ID50病毒稀釋倍數(shù)氣管環(huán)觀察結(jié)果 累計和病變比例 百分比病變 正常 病變 正常10-26 0 24 0 24/24 100.00%10-36 0 18 0 18/18 100.00%10-45 1 12 1 12/13 92.31%10-53 3 7 4 7/11 63.64%10-63 3 4 7 4/11 36.36%10-71 5 1 12 1/13 7.69%10-80 6 0 18 0/18 0.00%TOC-ID50=10-5.5/mL3.1.2 WT 分離株 TOC-ID50的測定表 2-3 WT 分離株 TOC-ID的測定
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離毒株抗原相關(guān)性的研究[J]. 王秀英,李孟,韋平,陳秋英,韋正吉,磨美蘭,韋天超. 病毒學(xué)報. 2012(06)
[2]63株IBV分離株M基因的遺傳變異與系統(tǒng)進(jìn)化分析[J]. 鄭俏偉,龔軍,劉大偉,何琴,王建華,郭露鉸,徐成剛,廖明,任濤. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[3]雞傳染性支氣管炎病毒基因型與血清型相關(guān)性初步研究[J]. 汪洋,李俊平,楊承槐,李啟紅,黃建華,于靜,夏業(yè)才. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(11)
[4]廣西不同時期IBV分離株S1基因高變區(qū)Ⅰ的遺傳變異分析[J]. 韋正吉,韋平,磨美蘭,李孟,韋天超,李康然. 病毒學(xué)報. 2008(02)
[5]傳染性支氣管炎病毒的分離及其S1基因高變區(qū)Ⅰ的遺傳變異性分析[J]. 磨美蘭,韋正吉,韋平,仇興華,陳秋英,張勝斌,黃百花,韋天超. 中國獸醫(yī)雜志. 2006(08)
[6]RT-PCR及RFLP分析技術(shù)對雞傳染性支氣管炎病毒的診斷和S1基因分型的研究[J]. 磨美蘭,李康然,韋平. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2001(04)
[7]傳染性腺胃炎病毒ZJ971株的一些生物學(xué)特性[J]. 周繼勇. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2000(03)
[8]腺胃病變型雞傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定[J]. 榮駿弓,康麗娟,谷守林,吳東來,尹訓(xùn)南,王云峰,江國托,褚桂芳. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 1999(02)
[9]雞腺胃型傳染性支氣管炎病毒（QX IBV）的分離和鑒定[J]. 王玉東,王永玲,張子春,范根成,蔣貽海,劉相娥,丁江,王樹雙. 中國動物檢疫. 1998(01)
[10]雞腺胃型傳染性支氣管炎[J]. 王玉東,張子春,王永玲,范根成,蔣貽海,劉相娥,丁江. 山東家禽. 1997(05)
博士論文
[1]雞氣管黏膜上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系的建立及IBV致細(xì)胞病變作用的研究[D]. 孫裴.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
碩士論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒的分離及N基因、S1基因的序列分析[D]. 何錫棟.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[2]雞傳染性支氣管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V株雞胚傳代致弱及其免疫效力的初步評價[D]. 龔利洋.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
[3]雞傳染性支氣管炎病毒tl/CH/LDT3/03的雞胚傳代致弱及其免疫效力的初步評價[D]. 聶磊.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3418808
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