發(fā)布時間：2021-09-29 18:18

　　濟寧青山羊是中國優(yōu)質(zhì)的地方山羊品種，也是世界上優(yōu)良的種質(zhì)資源。因青山羊性成熟較早，高繁殖力，四季均可發(fā)情，遺傳性穩(wěn)定，適應(yīng)性強，肉質(zhì)細(xì)膩、鮮美等優(yōu)良特性而深受廣大人民的青睞。母羊初情期一般始于60日齡，90¹20日齡即性成熟。為探討濟寧青山羊出生當(dāng)天至180日齡雌激素（E）和孕激素（P）含量的變化規(guī)律，雌激素受體α（ERα）、雌激素受體β（ERβ）和孕激素受體（PR）在子宮中的分布和表達(dá)規(guī)律，本試驗用放射免疫分析法檢測濟寧青山羊出生當(dāng)天至180日齡血清中雌激素和孕激素的含量；用SABC免疫組化法檢測ERα、ERβ和PR免疫陽性細(xì)胞在不同試驗組濟寧青山羊子宮中的分布；以GAPDH為內(nèi)參基因，qRT-PCR法對生后發(fā)育不同時期濟寧青山羊子宮中ERα、ERβ和PRmRNA表達(dá)規(guī)律進(jìn)行研究。放射免疫分析法結(jié)果顯示：濟寧青山羊出生當(dāng)天至180日齡均能檢測到E和P，血清中E含量出生時最多，30日齡顯著下降（P<0.05），雖在90日齡和180日齡分別出現(xiàn)兩個峰值，但60¹80日齡期間變化不大（P>0.05）；血清中P濃度在出生時較高，此后迅速... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 下丘腦一垂體一卵巢軸對動物生殖的影響
    1.2 子宮的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能
    1.3 雌、孕激素對子宮發(fā)育的調(diào)控
        1.3.1 雌激素對子宮發(fā)育的調(diào)控
        1.3.2 孕激素對子宮發(fā)育的調(diào)控
    1.4 雌、孕激素受體的結(jié)構(gòu)和功能及對子宮發(fā)育的調(diào)控
        1.4.1 雌激素受體的結(jié)構(gòu)和功能及對子宮發(fā)育的調(diào)控
        1.4.2 孕激素受體的結(jié)構(gòu)和功能及對子宮發(fā)育的調(diào)控
    1.5 熒光定量 qRT-PCR 技術(shù)
    1.6 濟寧青山羊的生物學(xué)特性
    1.7 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 試驗地點
        2.1.3 主要試劑和試驗用品
    2.2 放射免疫分析法測定血清中 E2和 P
        2.2.1 血清樣品的采集與保存
        2.2.2 激素水平的測定
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.3 SABC 免疫組織化學(xué)方法檢測子宮 ERα、ERβ和 PR 陽性分布
        2.3.1 切片標(biāo)本制備
        2.3.2 HE 法染色
        2.3.3 SABC 免疫組織化學(xué)方法
        2.3.4 對照試驗
        2.3.5 Image pro-plus 4.5 圖像分析
    2.4 qRT-PCR 檢測子宮 ERαmRNA、ERβmRNA 和 PR mRNA 相對表達(dá)量
        2.4.1 總 RNA 的提取
        2.4.2 RNA 質(zhì)量的鑒定
        2.4.3 引物設(shè)計及 qRT-PCR 擴增
3 結(jié)果及分析
    3.1 生后發(fā)育過程中血清中 E2和 P 的分泌變化
    3.2 生后發(fā)育過程中子宮的形態(tài)學(xué)變化
    3.3 生后發(fā)育過程中 ERα、ERβ和 PR 陽性細(xì)胞在子宮的分布規(guī)律
        3.3.1 ERα陽性細(xì)胞在生后發(fā)育不同階段子宮內(nèi)的分布特點
        3.3.2 ERβ陽性細(xì)胞在生后發(fā)育不同階段子宮內(nèi)的分布特點
        3.3.3 PR 陽性細(xì)胞在生后發(fā)育不同階段子宮內(nèi)的分布特點
    3.4 qRT-PCR 試驗結(jié)果
        3.4.1 溶解曲線分析結(jié)果
        3.4.2 總 RNA 及 PCR 產(chǎn)物的檢測結(jié)果
        3.4.3 重組質(zhì)粒的 PCR 檢測結(jié)果
        3.4.4 陽性克隆的測序
        3.4.5 擴增曲線的分析結(jié)果
        3.4.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線產(chǎn)物的檢測結(jié)果
        3.4.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線及其目的基因的的擴增效率
        3.4.8 生后發(fā)育過程中子宮內(nèi) ERα mRNA 變化規(guī)律
        3.4.9 生后發(fā)育過程中子宮內(nèi) ERβ mRNA 變化規(guī)律
        3.4.10 生后發(fā)育過程中子宮內(nèi) PR mRNA 變化規(guī)律
4 討論
    4.1 生后發(fā)育過程中血清中 E2和 P 的分泌規(guī)律
    4.2 生后發(fā)育時期濟寧青山羊子宮內(nèi) ERα、ERβ和 PR 的分布特點及表達(dá)
        4.2.1 生后發(fā)育時期濟寧青山羊子宮內(nèi) ERα的分布特點及表達(dá)
        4.2.2 生后發(fā)育時期濟寧青山羊子宮內(nèi) ERβ的分布特點及表達(dá)
        4.2.3 生后發(fā)育時期濟寧青山羊子宮內(nèi) PR 的分布特點及表達(dá)
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
7 附圖
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雌激素受體α和孕激素受體在不同發(fā)情周期牦牛子宮中的表達(dá)變化[J]. 阿依木古麗,蔡勇,曹忻,龍玲,陳士恩,余四九,崔燕.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(11)
[2]人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞雌、孕激素受體的表達(dá)[J]. 沙文瓊,王自能,蘇放明.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(45)
[3]牦牛發(fā)情周期子宮組織結(jié)構(gòu)的觀察[J]. 段永霞,崔燕,余四九,楊波.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2010(09)
[4]雌激素的非基因組途徑在哺乳動物雌性生殖過程中的作用機制[J]. 梁曉歡,楊增明.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(06)
[5]自然發(fā)情與誘導(dǎo)發(fā)情小鼠子宮內(nèi)膜中雌激素受體α表達(dá)的比較[J]. 高雅,林自力,張鴻波,梁鴻斌,劉云海,郭勇,倪和民.  中國實驗動物學(xué)報. 2010(02)
[6]神經(jīng)肽Y-Y1受體基因（NPY-Y1R）多態(tài)性及其與山羊繁殖性能關(guān)系[J]. 儲明星,馮濤,趙有璋,張英杰,方麗,狄冉.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2009(06)
[7]八點黑獺兔不同發(fā)育時期子宮組織結(jié)構(gòu)變化的研究[J]. 位蘭,盧佳佳,薛幫群,羅來強.  中國養(yǎng)兔. 2009(09)
[8]濟寧青山羊品種資源調(diào)查[J]. 蔡泉.  中國草食動物. 2008(06)
[9]不同時期小鼠血漿中孕激素的變化[J]. 朱河水,都軍霞,劉濤,林茂旺.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(14)
[10]實時熒光定量PCR技術(shù)的類型、特點與應(yīng)用[J]. 袁亞男,劉文忠.  中國畜牧獸醫(yī). 2008(03)

碩士論文
[1]雌激素受體亞型在子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜及小白鼠模型中的表達(dá)及意義[D]. 張翼海.中國醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號：3414219