熒光定量RT-PCR和RT-LAMP檢測BVDV方法的建立及應(yīng)用比較
發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 18:10
為建立一種快速、靈敏診斷牛病毒性腹瀉病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的方法,試驗(yàn)采用RT-LAMP和熒光定量RT-PCR兩種檢測方法,與通用RT-PCR方法在特異性、靈敏性、樣品檢出率、試驗(yàn)設(shè)計(jì)復(fù)雜程度、擴(kuò)增反應(yīng)效率、使用儀器簡單程度和檢測成本高低七個(gè)方面對BVDV進(jìn)行了綜合性比較分析。結(jié)果表明:試驗(yàn)建立的RT-LAMP方法與熒光定量RT-PCR、通用RTPCR方法相比具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、樣品檢出率和擴(kuò)增反應(yīng)效率高、操作簡便快速、低成本等特點(diǎn)。說明RT-LAMP方法對快速、靈敏診斷牛病毒性腹瀉病、防止疫情的擴(kuò)散具有重要意義。
【文章來源】:黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017,(19)北大核心
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料
1.1 毒株與病料
1.2 主要儀器和試劑
1.3 引物的設(shè)計(jì)和合成
2 方法
2.1 病毒RNA提取和模板制備
2.2 通用RT-PCR
2.3 熒光定量RT-PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
2.4 RT-LAMP反應(yīng)條件的優(yōu)化
2.5 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP特異性比較試驗(yàn)
2.6 通用RT-PCR、實(shí)時(shí)定量RT-PCR和RT-LAMP靈敏性比較試驗(yàn)
2.7 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP樣品檢出率比較試驗(yàn)
2.8 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP檢測方法綜合比較
3 結(jié)果與分析
3.1 通用RT-PCR
3.2 熒光定量RT-PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.3 RT-LAMP反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.4 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP特異性比較試驗(yàn)
3.5 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP靈敏性比較試驗(yàn)
3.6 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP樣品檢出率比較試驗(yàn)
3.7 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP檢測方法綜合比較
4 討論
5 小結(jié)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 包振中,雷程紅,蔡元慶,高竇,卞賽賽,葛婷. 中國畜牧獸醫(yī). 2015(09)
[2]牛病毒性腹瀉病毒一步RT-LAMP快速檢測方法的建立[J]. 袁萬哲,王騰,王建昌,李麗敏,張秀媛,孫繼國. Agricultural Science & Technology. 2014(10)
[3]河北省奶牛牛病毒性腹瀉/粘膜病病毒的分離鑒定[J]. 趙月蘭,楊漢春,左玉柱,秦建華,劉占民,范京惠,張寧. 中國動(dòng)物檢疫. 2006(11)
[4]我國規(guī);馀雠2《拘愿篂a-粘膜病流行狀況監(jiān)測[J]. 邱昌慶,高雙娣,周繼章,程淑敏,李英才,陳桂華,楊學(xué)禮. 中國獸醫(yī)科技. 1998(08)
[5]用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢測牛血清BVD/MD抗體[J]. 陳茂盛,寇改霞. 中國獸醫(yī)雜志. 1994(01)
[6]牛睪丸原代細(xì)胞在牛病毒性腹瀉/粘膜病中和試驗(yàn)上的應(yīng)用[J]. 嚴(yán)愛蓮,霍燕瓊,吳時(shí)清. 動(dòng)物檢疫. 1988(01)
本文編號:3414206
【文章來源】:黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017,(19)北大核心
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料
1.1 毒株與病料
1.2 主要儀器和試劑
1.3 引物的設(shè)計(jì)和合成
2 方法
2.1 病毒RNA提取和模板制備
2.2 通用RT-PCR
2.3 熒光定量RT-PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
2.4 RT-LAMP反應(yīng)條件的優(yōu)化
2.5 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP特異性比較試驗(yàn)
2.6 通用RT-PCR、實(shí)時(shí)定量RT-PCR和RT-LAMP靈敏性比較試驗(yàn)
2.7 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP樣品檢出率比較試驗(yàn)
2.8 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP檢測方法綜合比較
3 結(jié)果與分析
3.1 通用RT-PCR
3.2 熒光定量RT-PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.3 RT-LAMP反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.4 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP特異性比較試驗(yàn)
3.5 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP靈敏性比較試驗(yàn)
3.6 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP樣品檢出率比較試驗(yàn)
3.7 通用RT-PCR、熒光定量RT-PCR和RT-LAMP檢測方法綜合比較
4 討論
5 小結(jié)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 包振中,雷程紅,蔡元慶,高竇,卞賽賽,葛婷. 中國畜牧獸醫(yī). 2015(09)
[2]牛病毒性腹瀉病毒一步RT-LAMP快速檢測方法的建立[J]. 袁萬哲,王騰,王建昌,李麗敏,張秀媛,孫繼國. Agricultural Science & Technology. 2014(10)
[3]河北省奶牛牛病毒性腹瀉/粘膜病病毒的分離鑒定[J]. 趙月蘭,楊漢春,左玉柱,秦建華,劉占民,范京惠,張寧. 中國動(dòng)物檢疫. 2006(11)
[4]我國規(guī);馀雠2《拘愿篂a-粘膜病流行狀況監(jiān)測[J]. 邱昌慶,高雙娣,周繼章,程淑敏,李英才,陳桂華,楊學(xué)禮. 中國獸醫(yī)科技. 1998(08)
[5]用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢測牛血清BVD/MD抗體[J]. 陳茂盛,寇改霞. 中國獸醫(yī)雜志. 1994(01)
[6]牛睪丸原代細(xì)胞在牛病毒性腹瀉/粘膜病中和試驗(yàn)上的應(yīng)用[J]. 嚴(yán)愛蓮,霍燕瓊,吳時(shí)清. 動(dòng)物檢疫. 1988(01)
本文編號:3414206
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